擬南芥HXK1-CLF復(fù)合體參與調(diào)控葡萄糖應(yīng)答基因表達(dá)的分子機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2021-05-20 13:50
通過(guò)光合作用所產(chǎn)生糖這一生理過(guò)程對(duì)維持植物的存活和發(fā)育至關(guān)重要。葡萄糖除了是細(xì)胞的基礎(chǔ)構(gòu)件分子和能量代謝的中樞分子,它還是一種類(lèi)激素物質(zhì),能作為一種信號(hào)分子調(diào)控有機(jī)體的生理機(jī)能、新陳代謝以及基因表達(dá)等過(guò)程。并且,與多種糖信號(hào)分子比較而言,葡萄糖信號(hào)分子是最古老和最保守的。但是植物是如何識(shí)別并傳遞外界環(huán)境和內(nèi)部產(chǎn)生的糖信號(hào)從而調(diào)控植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程的呢?目前有大量研究基礎(chǔ)的就是植物中最重要的葡萄糖特異性的感受器HXK1,F(xiàn)有研究表明它可以通過(guò)招募一些轉(zhuǎn)錄因子形成復(fù)合體,從而對(duì)下游靶基因表達(dá)水平進(jìn)行調(diào)控,最終調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育全過(guò)程。但是在這一過(guò)程中表觀遺傳調(diào)控的作用目前還是未知的,即使有關(guān)非生物脅迫誘導(dǎo)表觀遺傳變化已有諸多報(bào)道。而在表觀遺傳調(diào)控元件中,人們關(guān)注最多的就是最為保守的Polycomb group(Pc G)和Trithorax group(Trx G)兩大蛋白家族。Pc G蛋白一般和抑制基因表達(dá)相關(guān),其主要以PRC1和PRC2兩組復(fù)合物的形式存在,而PRC2三甲基化H3K27是Pc G蛋白抑制靶基因轉(zhuǎn)錄的標(biāo)志。已報(bào)導(dǎo)的PRC2和PRC1復(fù)合體的多個(gè)成員中包括三種H3K27三甲...
【文章來(lái)源】:東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
1.1 植物中糖的生物學(xué)重要性
1.2 擬南芥中的葡萄糖信號(hào)感知和轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
1.2.1 擬南芥中葡萄糖感受器HXK1
1.2.2 擬南芥中的葡萄糖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑簡(jiǎn)述
1.3 表觀遺傳機(jī)制參與植物對(duì)環(huán)境條件的響應(yīng)
1.3.1 PcG蛋白家族
1.3.2 植物中的組蛋白修飾
1.4 研究的意義和目的
材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 植物材料培養(yǎng)條件
2.1.3 常用培養(yǎng)基的配置
2.1.4 常用抗生素的配置
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 CTAB法提取擬南芥基因組DNA
2.2.2 Trizol法提取擬南芥RNA
2.2.3 反轉(zhuǎn)錄PCR
2.2.4 表達(dá)載體的構(gòu)建
2.2.5 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化和蘸花法侵染擬南芥
2.2.6 擬南芥蛋白的提取
2.2.7 蛋白質(zhì)免疫印跡檢測(cè)
2.2.8 植物材料轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
2.2.9 擬南芥原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
2.2.10 擬南芥亞細(xì)胞定位的測(cè)定
2.2.11 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
結(jié)果分析
3.1 clf和 swn表現(xiàn)為葡萄糖不敏感表型
3.2 CLF、SWN和 HXK1 可能共同調(diào)控某些靶點(diǎn)
3.3 HXK1的亞細(xì)胞定位
3.4 免疫共沉淀的方法檢測(cè)HXK1與CLF、SWN之間的互作
3.5 雙突變體clf hxk1 糖表型的檢測(cè)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
博士論文
[1]擬南芥組蛋白H3K4甲基轉(zhuǎn)移酶ATX4和ATX5調(diào)控脫落酸及干旱脅迫響應(yīng)的機(jī)制研究[D]. 劉雨同.東北師范大學(xué) 2019
本文編號(hào):3197867
【文章來(lái)源】:東北師范大學(xué)吉林省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:43 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
1.1 植物中糖的生物學(xué)重要性
1.2 擬南芥中的葡萄糖信號(hào)感知和轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
1.2.1 擬南芥中葡萄糖感受器HXK1
1.2.2 擬南芥中的葡萄糖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑簡(jiǎn)述
1.3 表觀遺傳機(jī)制參與植物對(duì)環(huán)境條件的響應(yīng)
1.3.1 PcG蛋白家族
1.3.2 植物中的組蛋白修飾
1.4 研究的意義和目的
材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 植物材料培養(yǎng)條件
2.1.3 常用培養(yǎng)基的配置
2.1.4 常用抗生素的配置
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 CTAB法提取擬南芥基因組DNA
2.2.2 Trizol法提取擬南芥RNA
2.2.3 反轉(zhuǎn)錄PCR
2.2.4 表達(dá)載體的構(gòu)建
2.2.5 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化和蘸花法侵染擬南芥
2.2.6 擬南芥蛋白的提取
2.2.7 蛋白質(zhì)免疫印跡檢測(cè)
2.2.8 植物材料轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
2.2.9 擬南芥原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化
2.2.10 擬南芥亞細(xì)胞定位的測(cè)定
2.2.11 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
結(jié)果分析
3.1 clf和 swn表現(xiàn)為葡萄糖不敏感表型
3.2 CLF、SWN和 HXK1 可能共同調(diào)控某些靶點(diǎn)
3.3 HXK1的亞細(xì)胞定位
3.4 免疫共沉淀的方法檢測(cè)HXK1與CLF、SWN之間的互作
3.5 雙突變體clf hxk1 糖表型的檢測(cè)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
博士論文
[1]擬南芥組蛋白H3K4甲基轉(zhuǎn)移酶ATX4和ATX5調(diào)控脫落酸及干旱脅迫響應(yīng)的機(jī)制研究[D]. 劉雨同.東北師范大學(xué) 2019
本文編號(hào):3197867
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