細菌素可作為食品添加劑用于控制食源性致病菌、延長貨架期、替代抗生素等,具有廣闊的應用前景。在之前的研究中,通過結合面包乳桿菌MN047的全基因組序列和多肽信息學分析的方法,鑒定得到一種新的II類細菌素（細菌素BM1029）基因,并在大腸桿菌表達系統(tǒng)中成功表達�；诖�,本研究以新型異源表達細菌素BM1029為研究對象,探究了BM1029對大腸桿菌ATCC25922和金黃色葡萄球菌ATCC25923的抑菌作用及機制。主要研究內容與結果如下:（1）對得到的工程菌株使用IPTG進行誘導,反復凍融裂解細胞,離心后得到的上清作為細菌素粗品。通過透析、超濾等方式除去鹽離子及雜質蛋白,之后使用離子交換色譜和高效液相色譜等方式進一步分離純化,通過LC-MS/MS鑒定純化后的樣品。獲得14個片段,覆蓋率為88.52%,表明純化得到的蛋白為目標細菌素。結構和性質預測表明細菌素BM1029具有α-螺旋結構,較高的穩(wěn)定性,功能注釋為可能的DNA結合蛋白。（2）通過瓊脂擴散法測定了細菌素BM1029的抑菌譜及穩(wěn)定性,結果表明BM1029對測試的革蘭氏陽性和革蘭氏陰性食源性致病菌均顯示出較強的抑菌活性,對測試菌株的... 

【文章來源】：西北農林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 研究背景
        1.1.1 食品安全現(xiàn)狀
        1.1.2 耐藥性細菌
        1.1.3 天然防腐劑
    1.2 細菌素概述
        1.2.1 細菌素的性質
        1.2.2 乳酸菌細菌素的分類
        1.2.3 細菌素的異源表達
        1.2.4 細菌素的純化
        1.2.5 細菌素的應用
    1.3 細菌素的作用機制
        1.3.1 抑制細胞壁合成
        1.3.2 破壞細菌膜完整性
        1.3.3 干擾細胞內生物大分子
    1.4 研究意義及內容
        1.4.1 研究目的與意義
        1.4.2 研究內容
        1.4.3 技術路線
第二章 細菌素BM1029的純化鑒定
    2.1 試驗材料
        2.1.1 主要儀器及設備
        2.1.2 主要試劑與培養(yǎng)基
        2.1.3 主要溶液的配置
        2.1.4 供試菌株
    2.2 試驗方法
        2.2.1 細菌素BM1029的分離純化
        2.2.2 細菌素BM1029的鑒定
        2.2.3 最小抑菌濃度的測定
        2.2.4 細菌素BM1029的理化性質預測
    2.3 結果與分析
        2.3.1 細菌素BM1029的分離純化
        2.3.2 細菌素BM1029的鑒定
        2.3.3 細菌素BM1029的最小抑菌濃度
        2.3.4 細菌素BM1029的理化性質預測
    2.4 小結
第三章 細菌素BM1029的理化性質
    3.1 試驗材料
        3.1.1 主要儀器及設備
        3.1.2 主要試劑與耗材
        3.1.3 供試菌株
    3.2 試驗方法
        3.2.1 細菌素BM1029的抑菌譜
        3.2.2 細菌素BM1029的穩(wěn)定性
        3.2.3 細菌素BM1029的體外溶血活性
        3.2.4 細菌素BM1029的抑菌活性
    3.3 結果與分析
        3.3.1 細菌素BM1029的抑菌譜
        3.3.2 細菌素BM1029的穩(wěn)定性
        3.3.3 細菌素BM1029的體外溶血活性
        3.3.4 細菌素BM1029的抑菌活性
    3.4 小結
第四章 細菌素BM1029的抑菌機制
    4.1 試驗材料
        4.1.1 主要儀器及設備
        4.1.2 主要試劑與耗材
        4.1.3 供試菌株
    4.2 試驗方法
        4.2.1 細菌素BM1029對細菌細胞形態(tài)學的影響
        4.2.2 細菌素BM1029對細菌細胞膜完整性的影響
        4.2.3 細菌素BM1029對細菌DNA的影響
        4.2.4 細菌素BM1029對細胞周期的影響
    4.3 結果與分析
        4.3.1 細菌素BM1029對細菌細胞表面特性的影響
        4.3.2 細菌素BM1029對細菌細胞膜完整性的影響
        4.3.3 細菌素BM1029對細菌DNA的影響
        4.3.4 細菌素BM1029對細胞周期的影響
    4.4 小結
第五章 細菌素BM1029對食品中微生物的影響
    5.1 試驗材料
        5.1.1 主要儀器及設備
        5.1.2 主要食物與培養(yǎng)基
        5.1.3 供試菌株
    5.2 試驗方法
        5.2.1 細菌素BM1029對牛奶中細菌生長的影響
        5.2.2 細菌素BM1029對牛肉中細菌生長的影響
    5.3 結果與分析
        5.3.1 細菌素BM1029對牛奶中細菌生長的影響
        5.3.2 細菌素BM1029對牛肉中細菌生長的影響
    5.4 小結
第六章 結論
    6.1 結論
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻
附錄
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]乳酸菌抗菌肽(細菌素)抗菌機理的研究進展[J]. 任璐雅,楊艷艷,章檢明,易華西,張?zhí)m威.  中國食品添加劑. 2015(01)
[4]食品中大腸桿菌生物檢測方法的研究進展[J]. 郝江燕,胡文忠,馮敘橋,何煜波,呂曉萌.  食品工業(yè)科技. 2013(15)
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本文編號：3190625