細(xì)菌素可作為食品添加劑用于控制食源性致病菌、延長貨架期、替代抗生素等,具有廣闊的應(yīng)用前景。在之前的研究中,通過結(jié)合面包乳桿菌MN047的全基因組序列和多肽信息學(xué)分析的方法,鑒定得到一種新的II類細(xì)菌素（細(xì)菌素BM1029）基因,并在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中成功表達(dá)�；诖�,本研究以新型異源表達(dá)細(xì)菌素BM1029為研究對象,探究了BM1029對大腸桿菌ATCC25922和金黃色葡萄球菌ATCC25923的抑菌作用及機(jī)制。主要研究內(nèi)容與結(jié)果如下:（1）對得到的工程菌株使用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo),反復(fù)凍融裂解細(xì)胞,離心后得到的上清作為細(xì)菌素粗品。通過透析、超濾等方式除去鹽離子及雜質(zhì)蛋白,之后使用離子交換色譜和高效液相色譜等方式進(jìn)一步分離純化,通過LC-MS/MS鑒定純化后的樣品。獲得14個片段,覆蓋率為88.52%,表明純化得到的蛋白為目標(biāo)細(xì)菌素。結(jié)構(gòu)和性質(zhì)預(yù)測表明細(xì)菌素BM1029具有α-螺旋結(jié)構(gòu),較高的穩(wěn)定性,功能注釋為可能的DNA結(jié)合蛋白。（2）通過瓊脂擴(kuò)散法測定了細(xì)菌素BM1029的抑菌譜及穩(wěn)定性,結(jié)果表明BM1029對測試的革蘭氏陽性和革蘭氏陰性食源性致病菌均顯示出較強(qiáng)的抑菌活性,對測試菌株的... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 研究背景
        1.1.1 食品安全現(xiàn)狀
        1.1.2 耐藥性細(xì)菌
        1.1.3 天然防腐劑
    1.2 細(xì)菌素概述
        1.2.1 細(xì)菌素的性質(zhì)
        1.2.2 乳酸菌細(xì)菌素的分類
        1.2.3 細(xì)菌素的異源表達(dá)
        1.2.4 細(xì)菌素的純化
        1.2.5 細(xì)菌素的應(yīng)用
    1.3 細(xì)菌素的作用機(jī)制
        1.3.1 抑制細(xì)胞壁合成
        1.3.2 破壞細(xì)菌膜完整性
        1.3.3 干擾細(xì)胞內(nèi)生物大分子
    1.4 研究意義及內(nèi)容
        1.4.1 研究目的與意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
        1.4.3 技術(shù)路線
第二章 細(xì)菌素BM1029的純化鑒定
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 主要儀器及設(shè)備
        2.1.2 主要試劑與培養(yǎng)基
        2.1.3 主要溶液的配置
        2.1.4 供試菌株
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)菌素BM1029的分離純化
        2.2.2 細(xì)菌素BM1029的鑒定
        2.2.3 最小抑菌濃度的測定
        2.2.4 細(xì)菌素BM1029的理化性質(zhì)預(yù)測
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 細(xì)菌素BM1029的分離純化
        2.3.2 細(xì)菌素BM1029的鑒定
        2.3.3 細(xì)菌素BM1029的最小抑菌濃度
        2.3.4 細(xì)菌素BM1029的理化性質(zhì)預(yù)測
    2.4 小結(jié)
第三章 細(xì)菌素BM1029的理化性質(zhì)
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 主要儀器及設(shè)備
        3.1.2 主要試劑與耗材
        3.1.3 供試菌株
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 細(xì)菌素BM1029的抑菌譜
        3.2.2 細(xì)菌素BM1029的穩(wěn)定性
        3.2.3 細(xì)菌素BM1029的體外溶血活性
        3.2.4 細(xì)菌素BM1029的抑菌活性
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 細(xì)菌素BM1029的抑菌譜
        3.3.2 細(xì)菌素BM1029的穩(wěn)定性
        3.3.3 細(xì)菌素BM1029的體外溶血活性
        3.3.4 細(xì)菌素BM1029的抑菌活性
    3.4 小結(jié)
第四章 細(xì)菌素BM1029的抑菌機(jī)制
    4.1 試驗(yàn)材料
        4.1.1 主要儀器及設(shè)備
        4.1.2 主要試劑與耗材
        4.1.3 供試菌株
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 細(xì)菌素BM1029對細(xì)菌細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響
        4.2.2 細(xì)菌素BM1029對細(xì)菌細(xì)胞膜完整性的影響
        4.2.3 細(xì)菌素BM1029對細(xì)菌DNA的影響
        4.2.4 細(xì)菌素BM1029對細(xì)胞周期的影響
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 細(xì)菌素BM1029對細(xì)菌細(xì)胞表面特性的影響
        4.3.2 細(xì)菌素BM1029對細(xì)菌細(xì)胞膜完整性的影響
        4.3.3 細(xì)菌素BM1029對細(xì)菌DNA的影響
        4.3.4 細(xì)菌素BM1029對細(xì)胞周期的影響
    4.4 小結(jié)
第五章 細(xì)菌素BM1029對食品中微生物的影響
    5.1 試驗(yàn)材料
        5.1.1 主要儀器及設(shè)備
        5.1.2 主要食物與培養(yǎng)基
        5.1.3 供試菌株
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 細(xì)菌素BM1029對牛奶中細(xì)菌生長的影響
        5.2.2 細(xì)菌素BM1029對牛肉中細(xì)菌生長的影響
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 細(xì)菌素BM1029對牛奶中細(xì)菌生長的影響
        5.3.2 細(xì)菌素BM1029對牛肉中細(xì)菌生長的影響
    5.4 小結(jié)
第六章 結(jié)論
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乳酸菌細(xì)菌素的作用機(jī)制及在肉制品中的應(yīng)用[J]. 張曉寧,尚一娜,陳境,霍麒文,李明慧,楊姝玉,邢葉妮,王俊國.  食品研究與開發(fā). 2018(11)
[2]細(xì)菌素在乳制品生產(chǎn)及貯藏保鮮中的應(yīng)用[J]. 師坤,李軍,楊胖.  中國奶牛. 2018(01)
[3]乳酸菌抗菌肽(細(xì)菌素)抗菌機(jī)理的研究進(jìn)展[J]. 任璐雅,楊艷艷,章檢明,易華西,張?zhí)m威.  中國食品添加劑. 2015(01)
[4]食品中大腸桿菌生物檢測方法的研究進(jìn)展[J]. 郝江燕,胡文忠,馮敘橋,何煜波,呂曉萌.  食品工業(yè)科技. 2013(15)
[5]細(xì)菌素應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 孫紅姣,許軍勇.  科技信息. 2009(36)



本文編號：3190625