從巴戟天中克隆MEP途徑中的1-脫氧-D-木酮糖5-磷酸還原異構(gòu)酶基因MoDXR及其啟動子序列,并進行生物信息學分析、啟動子區(qū)順式作用元件分析,以及進行原核表達分析。根據(jù)巴戟天轉(zhuǎn)錄組中DXR基因原始序列和NCBI-ORFfinder分析,設計特異性引物,并進行RT-PCR擴增和生物信息學分析;采用染色體步移克隆MoDXR基因的5′端啟動子序列;通過亞細胞定位分析MoDXR基因在細胞中的位置;構(gòu)建原核表達載體pET-28a-MoDXR,導入BL21（DE3）表達感受態(tài)細胞后,在IPTG誘導下表達。從巴戟天中克隆的MoDXR基因,其cDNA全長2 015 bp,預測的閱讀框大小為1 425 bp,編碼474個氨基酸,分子質(zhì)量為51.27 kDa; BlastP序列比對分析表明MoDXR基因與其他植物的DXR基因具有高度同源性,如:咖啡樹DXR （CaDXR）、蘿芙木DXR （RvDXR）;系統(tǒng)進化發(fā)育樹分析顯示,巴戟天MoDXR蛋白與小粒咖啡和梔子的DXR蛋白聚為一類,其親緣關(guān)系最近;由亞細胞定位可知MoDXR基因所編碼的蛋白定位于葉綠體上; MoDXR基因5′端啟動子序列長度為1 493... 

【文章來源】：藥學學報. 2020,55(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
材料與方法
結(jié)果與分析
    1 巴戟天MoDXR基因克隆
    2 巴戟天MoDXR生物信息學分析
    3 巴戟天MoDXR基因啟動子區(qū)順式作用元件分析
    4 MoDXR亞細胞定位分析
    5 巴戟天MoDXR蛋白原核表達分析
    6 巴戟天MoDXR基因相對表達量分析
討論


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3181711