發(fā)布時(shí)間：2021-05-08 09:50

　　α-半乳糖苷酶（α-Galactosidase）是一種通過分解糖分子中非還原性末端的α-1,6-半乳糖苷鍵從而消除豆類中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,提高營養(yǎng)素利用率的酶,它可以直接水解蜜二糖因此又叫蜜二糖酶。本論文從不同的樣品中篩選分離可產(chǎn)α-半乳糖苷酶的微生物,以尋找更多具有不同酶學(xué)性質(zhì)的的α-半乳糖苷酶。從腐乳中分離得到一株可產(chǎn)α-半乳糖苷酶的細(xì)菌菌株,并對(duì)所得菌株的產(chǎn)酶條件和酶學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究,主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:（1）根據(jù)X-α-Gal可在α-半乳糖苷酶的催化下產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)的特性,用它做指示劑從豆腐乳中篩選出一株產(chǎn)α-半乳糖苷酶能力較高的菌株,命名為GK。對(duì)菌株GK進(jìn)行16S rDNA、生理生化實(shí)驗(yàn)等一系列的鑒定,最終確定其為一株成團(tuán)泛菌（Pantoea agglomerans）。（2）對(duì)菌株GK的生長條件和產(chǎn)酶條件進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)菌株GK的最適生長pH為6.5、最適生長溫度為25℃,而最佳產(chǎn)酶條件為培養(yǎng)基初始pH7.0、裝液量250mL/500mL、培養(yǎng)溫度20℃、培養(yǎng)時(shí)間15h,此時(shí)的酶活為14.07U/mL。根據(jù)各單因素的實(shí)驗(yàn)結(jié)果又對(duì)溫度、pH、裝液量做了正交實(shí)驗(yàn)來分析各因素之間的... 

【文章來源】：廣西科技大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 α-D-半乳糖苷酶
        1.1.1 α-半乳糖苷酶來源及國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.1.2 α-半乳糖苷酶性質(zhì)
        1.1.3 α-半乳糖苷酶的應(yīng)用
            1.1.3.1 α-半乳糖苷酶在飼料中的應(yīng)用
            1.1.3.2 α-半乳糖苷酶在食品領(lǐng)域上的應(yīng)用
            1.1.3.3 α-半乳糖苷酶在醫(yī)學(xué)方面的應(yīng)用
            1.1.3.4 α-半乳糖苷酶在其他行業(yè)的應(yīng)用
    1.2 成團(tuán)泛菌
        1.2.1 成團(tuán)泛菌的由來
        1.2.2 成團(tuán)泛菌的作用
    1.3 本實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容、目的及創(chuàng)新性
        1.3.1 本實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容
        1.3.2 本試驗(yàn)的目的
        1.3.3 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 產(chǎn)α-半乳糖苷酶的成團(tuán)泛菌的篩選和鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 樣品采集
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥品
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 培養(yǎng)基與溶液的配制
            2.1.4.1 培養(yǎng)基的配制
            2.1.4.2 溶液的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 產(chǎn)α-半乳糖苷酶菌種的分離和純化
        2.2.2 菌株的鑒定
            2.2.2.1 菌株16S rDNA鑒定
            2.2.2.2 菌株形態(tài)學(xué)和生理生化特征
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 菌株16S rDNA鑒定
        2.3.2 菌株形態(tài)學(xué)和生理生化特征
    2.4 結(jié)論和討論
第三章 菌株生長及產(chǎn)酶條件的優(yōu)化
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 菌種
        3.1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥品
        3.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.4 培養(yǎng)基及試劑配方
    3.2 α-半乳糖苷酶活測(cè)定方法
        3.2.1 粗酶液的制備
        3.2.2 酶活的測(cè)定
        3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        3.2.4 胞內(nèi)酶和胞外酶的判斷
    3.3 菌株GK的生長和產(chǎn)酶條件優(yōu)化
        3.3.1 溫度對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.3.2 培養(yǎng)基初始pH對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.3.3 菌株生長及產(chǎn)酶隨時(shí)間的變化
        3.3.4 碳源對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.3.5 氮源對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.3.6 不同金屬離子及螯合劑對(duì)菌株生長的影響
        3.3.7 不同接種量對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.3.8 搖瓶裝液量對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.3.9正交實(shí)驗(yàn)
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 溫度對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.4.2 初始pH對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.4.3 菌株生長及產(chǎn)酶隨時(shí)間的變化
        3.4.4 碳源對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.4.5 氮源對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.4.6 不同金屬離子及螯合劑對(duì)菌株生長的影響
        3.4.7 不同接種量對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.4.8 不同搖瓶裝液量對(duì)菌株生長及產(chǎn)酶的影響
        3.4.9 正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
    3.5 結(jié)論與討論
第四章 成團(tuán)泛菌α-半乳糖苷酶酶學(xué)性質(zhì)研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 菌種
        4.1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥品
        4.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.4 溶液的配制
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 粗酶液的制備
        4.2.2 硫酸銨分級(jí)沉淀
        4.2.3 透析
    4.3 α-半乳糖苷酶酶學(xué)性質(zhì)研究
        4.3.1 最適溫度及溫度穩(wěn)定性
        4.3.2 最適pH及pH穩(wěn)定性
        4.3.3 不同金屬離子對(duì)酶活性的影響
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 硫酸銨分級(jí)沉淀
        4.4.2 透析
        4.4.3 溫度對(duì)酶活的影響
        4.4.4 溫度穩(wěn)定性
        4.4.5 最適pH
        4.4.6 pH穩(wěn)定性
        4.4.7 金屬離子及絡(luò)合物對(duì)α-半乳糖苷酶的影響
    4.5 結(jié)論與討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[6]日糧添加α-半乳糖苷酶對(duì)斷奶仔豬生長性能、養(yǎng)分消化率、腸道形態(tài)和消化酶活力的影響[J]. 馬紅艷,姚毅,趙輝.  中國飼料. 2018(14)
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博士論文
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[2]產(chǎn)α-半乳糖苷酶唾液乳桿菌XH4B篩選、性質(zhì)、應(yīng)用及高密度培養(yǎng)研究[D]. 杜新永.浙江大學(xué) 2014
[3]微生物來源36家族α-半乳糖苷酶的基因克隆與性質(zhì)研究[D]. 曹雅男.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2008

碩士論文
[1]α-半乳糖苷酶高產(chǎn)菌株的篩選及其基因的克隆、表達(dá)、純化和性質(zhì)研究[D]. 賁培培.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]不同類型日糧中添加a-半乳糖苷酶對(duì)肉仔雞作用效果的研究[D]. 張繼東.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



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