產(chǎn)褐藻膠裂解酶交替單胞菌的發(fā)酵優(yōu)化及alg2951的外源表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2021-05-07 09:53
褐藻膠裂解酶是制備生物活性寡糖的重要功能酶,在食品、農(nóng)業(yè)、工業(yè)等行業(yè)中具有重要應(yīng)用價(jià)值。本研究以交替單胞菌屬新種HB161718為出發(fā)菌株,在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,通過Box-Behnken設(shè)計(jì)及響應(yīng)面法優(yōu)化獲得該菌的最佳產(chǎn)酶培養(yǎng)基:海藻酸鈉7.23 g/L,蛋白胨7 g/L,NaCl 23.11 g/L,K2HPO40.1 g/L,MgSO40.1 g/L,優(yōu)化條件下酶活力為(54.28±3.47) U/mL,達(dá)到優(yōu)化前的1.59倍。為進(jìn)一步提高酶活性,通過分子生物學(xué)方法實(shí)現(xiàn)了褐藻膠裂解酶alg2951在大腸桿菌中的外源表達(dá),純化后的酶活性為636 U/mL,達(dá)到原始菌株酶活的18.6倍。本研究為褐藻膠裂解酶的工業(yè)生產(chǎn)提供了新的來源。
【文章來源】:基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(05)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 結(jié)果與分析
1.1 單因素實(shí)驗(yàn)
1.2 Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分析
1.3 Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.4 優(yōu)化培養(yǎng)基驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
1.5 褐藻膠裂解酶的外源表達(dá)、純化及活性檢測(cè)
2 討論
3 材料與方法
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.2 培養(yǎng)方法
3.3 菌體生物量和酶活測(cè)定
3.4 產(chǎn)褐藻膠裂解酶單因素優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
3.5 Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.6 Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)
3.7 褐藻膠裂解酶的外源表達(dá)、純化及活性檢測(cè)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]響應(yīng)面優(yōu)化天胡荽多酚超聲波輔助提取工藝及其抗氧化性[J]. 林啟凰,陳仲巍,林聰煒,葉廷秀,紀(jì)美茹,張崗. 分子植物育種. 2018(10)
[2]鮑魚來源褐藻膠裂解酶菌株的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 李云濤,汪立平,張孟,張宇. 大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(05)
[3]星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化丹參花粉離體萌發(fā)培養(yǎng)條件的研究[J]. 胡青青,王濤,姜媛媛,楊程,茍麗瓊,張利. 分子植物育種. 2018(08)
[4]一株明亮發(fā)光桿菌產(chǎn)褐藻膠裂解酶的培養(yǎng)基優(yōu)化[J]. 劉彩琴,王楠,陳薇青,金建昌,項(xiàng)麗艷. 食品工業(yè)科技. 2017(08)
[5]響應(yīng)面優(yōu)化微泡菌ALW1產(chǎn)褐藻膠裂解酶的發(fā)酵條件[J]. 李永幸,楊帆,姜澤東,倪輝,楊秋明,肖安風(fēng). 發(fā)酵科技通訊. 2016(02)
[6]高產(chǎn)褐藻膠裂解酶菌株的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 嚴(yán)芬,連燕萍,楊光,王培松,吳晨爍,陳寧辛. 食品工業(yè)科技. 2015(22)
[7]Sphingobacterium bambusaue及其紫外誘變菌株的石油降解功能[J]. 段盛文,劉正初,鄭科,馮湘沅,成莉鳳,鄭霞. 微生物學(xué)通報(bào). 2013(12)
[8]海藻寡糖對(duì)鎘、鉛單一污染的小油菜及土壤的影響[J]. 張朝霞,許加超,盛泰,劉曉琳,楊海征,李建林,郭亮,高昕,付曉婷. 食品工業(yè)科技. 2014(07)
[9]三株鞘氨醇桿菌細(xì)胞鞘脂類組分的分析[J]. 熱孜亞·艾肯,努麗曼姑·司馬義,布阿依夏木·阿木提,買孜拉木·肉扎洪,麥合甫再木·阿不都熱合曼,吾爾麥提汗·麥麥提明,帕提古麗·馬合木提,艾爾肯·熱合曼. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(09)
[10]真菌鞘脂代謝及其與抗真菌藥物關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 郭星軍,茍萍. 生物技術(shù). 2010(02)
博士論文
[1]褐藻膠裂解酶分泌菌株的分離鑒定及Tamlana holothuriorum s12T中褐藻膠裂解酶的研究[D]. 周燕霞.山東大學(xué) 2016
本文編號(hào):3173190
【文章來源】:基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(05)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 結(jié)果與分析
1.1 單因素實(shí)驗(yàn)
1.2 Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分析
1.3 Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.4 優(yōu)化培養(yǎng)基驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
1.5 褐藻膠裂解酶的外源表達(dá)、純化及活性檢測(cè)
2 討論
3 材料與方法
3.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.2 培養(yǎng)方法
3.3 菌體生物量和酶活測(cè)定
3.4 產(chǎn)褐藻膠裂解酶單因素優(yōu)化實(shí)驗(yàn)
3.5 Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.6 Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)
3.7 褐藻膠裂解酶的外源表達(dá)、純化及活性檢測(cè)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]響應(yīng)面優(yōu)化天胡荽多酚超聲波輔助提取工藝及其抗氧化性[J]. 林啟凰,陳仲巍,林聰煒,葉廷秀,紀(jì)美茹,張崗. 分子植物育種. 2018(10)
[2]鮑魚來源褐藻膠裂解酶菌株的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 李云濤,汪立平,張孟,張宇. 大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(05)
[3]星點(diǎn)設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法優(yōu)化丹參花粉離體萌發(fā)培養(yǎng)條件的研究[J]. 胡青青,王濤,姜媛媛,楊程,茍麗瓊,張利. 分子植物育種. 2018(08)
[4]一株明亮發(fā)光桿菌產(chǎn)褐藻膠裂解酶的培養(yǎng)基優(yōu)化[J]. 劉彩琴,王楠,陳薇青,金建昌,項(xiàng)麗艷. 食品工業(yè)科技. 2017(08)
[5]響應(yīng)面優(yōu)化微泡菌ALW1產(chǎn)褐藻膠裂解酶的發(fā)酵條件[J]. 李永幸,楊帆,姜澤東,倪輝,楊秋明,肖安風(fēng). 發(fā)酵科技通訊. 2016(02)
[6]高產(chǎn)褐藻膠裂解酶菌株的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 嚴(yán)芬,連燕萍,楊光,王培松,吳晨爍,陳寧辛. 食品工業(yè)科技. 2015(22)
[7]Sphingobacterium bambusaue及其紫外誘變菌株的石油降解功能[J]. 段盛文,劉正初,鄭科,馮湘沅,成莉鳳,鄭霞. 微生物學(xué)通報(bào). 2013(12)
[8]海藻寡糖對(duì)鎘、鉛單一污染的小油菜及土壤的影響[J]. 張朝霞,許加超,盛泰,劉曉琳,楊海征,李建林,郭亮,高昕,付曉婷. 食品工業(yè)科技. 2014(07)
[9]三株鞘氨醇桿菌細(xì)胞鞘脂類組分的分析[J]. 熱孜亞·艾肯,努麗曼姑·司馬義,布阿依夏木·阿木提,買孜拉木·肉扎洪,麥合甫再木·阿不都熱合曼,吾爾麥提汗·麥麥提明,帕提古麗·馬合木提,艾爾肯·熱合曼. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(09)
[10]真菌鞘脂代謝及其與抗真菌藥物關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 郭星軍,茍萍. 生物技術(shù). 2010(02)
博士論文
[1]褐藻膠裂解酶分泌菌株的分離鑒定及Tamlana holothuriorum s12T中褐藻膠裂解酶的研究[D]. 周燕霞.山東大學(xué) 2016
本文編號(hào):3173190
本文鏈接:http://sikaile.net/projectlw/swxlw/3173190.html
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