褐藻膠裂解酶是制備生物活性寡糖的重要功能酶,在食品、農業(yè)、工業(yè)等行業(yè)中具有重要應用價值。本研究以交替單胞菌屬新種HB161718為出發(fā)菌株,在單因素實驗基礎上,通過Box-Behnken設計及響應面法優(yōu)化獲得該菌的最佳產酶培養(yǎng)基:海藻酸鈉7.23 g/L,蛋白胨7 g/L,NaCl 23.11 g/L,K₂HPO₄0.1 g/L,MgSO₄0.1 g/L,優(yōu)化條件下酶活力為（54.28±3.47） U/mL,達到優(yōu)化前的1.59倍。為進一步提高酶活性,通過分子生物學方法實現了褐藻膠裂解酶alg2951在大腸桿菌中的外源表達,純化后的酶活性為636 U/mL,達到原始菌株酶活的18.6倍。本研究為褐藻膠裂解酶的工業(yè)生產提供了新的來源。 

【文章來源】：基因組學與應用生物學. 2020,39(05)北大核心CSCD

【文章頁數】：8 頁

【文章目錄】：
1 結果與分析
    1.1 單因素實驗
    1.2 Plackett-Burman實驗設計與分析
    1.3 Box-Behnken中心組合實驗設計
    1.4 優(yōu)化培養(yǎng)基驗證實驗
    1.5 褐藻膠裂解酶的外源表達、純化及活性檢測
2 討論
3 材料與方法
    3.1 實驗材料
    3.2 培養(yǎng)方法
    3.3 菌體生物量和酶活測定
    3.4 產褐藻膠裂解酶單因素優(yōu)化實驗
    3.5 Plackett-Burman實驗設計
    3.6 Box-Behnken中心組合實驗
    3.7 褐藻膠裂解酶的外源表達、純化及活性檢測


【參考文獻】：
期刊論文
[1]響應面優(yōu)化天胡荽多酚超聲波輔助提取工藝及其抗氧化性[J]. 林啟凰,陳仲巍,林聰煒,葉廷秀,紀美茹,張崗.  分子植物育種. 2018(10)
[2]鮑魚來源褐藻膠裂解酶菌株的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 李云濤,汪立平,張孟,張宇.  大連海洋大學學報. 2017(05)
[3]星點設計-響應面法優(yōu)化丹參花粉離體萌發(fā)培養(yǎng)條件的研究[J]. 胡青青,王濤,姜媛媛,楊程,茍麗瓊,張利.  分子植物育種. 2018(08)
[4]一株明亮發(fā)光桿菌產褐藻膠裂解酶的培養(yǎng)基優(yōu)化[J]. 劉彩琴,王楠,陳薇青,金建昌,項麗艷.  食品工業(yè)科技. 2017(08)
[5]響應面優(yōu)化微泡菌ALW1產褐藻膠裂解酶的發(fā)酵條件[J]. 李永幸,楊帆,姜澤東,倪輝,楊秋明,肖安風.  發(fā)酵科技通訊. 2016(02)
[6]高產褐藻膠裂解酶菌株的篩選及發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 嚴芬,連燕萍,楊光,王培松,吳晨爍,陳寧辛.  食品工業(yè)科技. 2015(22)
[7]Sphingobacterium bambusaue及其紫外誘變菌株的石油降解功能[J]. 段盛文,劉正初,鄭科,馮湘沅,成莉鳳,鄭霞.  微生物學通報. 2013(12)
[8]海藻寡糖對鎘、鉛單一污染的小油菜及土壤的影響[J]. 張朝霞,許加超,盛泰,劉曉琳,楊海征,李建林,郭亮,高昕,付曉婷.  食品工業(yè)科技. 2014(07)
[9]三株鞘氨醇桿菌細胞鞘脂類組分的分析[J]. 熱孜亞·艾肯,努麗曼姑·司馬義,布阿依夏木·阿木提,買孜拉木·肉扎洪,麥合甫再木·阿不都熱合曼,吾爾麥提汗·麥麥提明,帕提古麗·馬合木提,艾爾肯·熱合曼.  新疆農業(yè)科學. 2013(09)
[10]真菌鞘脂代謝及其與抗真菌藥物關系研究進展[J]. 郭星軍,茍萍.  生物技術. 2010(02)

博士論文
[1]褐藻膠裂解酶分泌菌株的分離鑒定及Tamlana holothuriorum s12T中褐藻膠裂解酶的研究[D]. 周燕霞.山東大學 2016



本文編號：3173190