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螢火素酶互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)檢測蛋白互作

發(fā)布時(shí)間:2021-05-06 21:06
  蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用在真核生物的各項(xiàng)生命活動中發(fā)揮重要作用。與其它蛋白質(zhì)互作研究技術(shù)相比,借助于煙草(Nicotiana benthamiana)瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)的螢火素酶互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)(LCA)具有簡單、靈敏、可靠、高效和低背景等優(yōu)點(diǎn),并可輕松擴(kuò)展為大規(guī)模蛋白質(zhì)互作的篩選和驗(yàn)證研究。該文介紹了螢火素酶互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)的具體操作過程,通過2種數(shù)據(jù)收集方法來定性并定量分析生物發(fā)光或發(fā)光強(qiáng)度,從而檢測植物目標(biāo)蛋白之間的相互作用。 

【文章來源】:植物學(xué)報(bào). 2020,55(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 試劑及用具
3 試劑配方
4 儀器設(shè)備
5 實(shí)驗(yàn)程序
    5.1 融合蛋白表達(dá)載體的構(gòu)建
    5.2 煙草注射
    5.3 螢火素酶活性觀察
        5.3.1 植物活體成像系統(tǒng)定性檢測螢火素酶活性
        5.3.2 luminometer定量檢測熒光強(qiáng)度
    5.4 蛋白檢測
6 注意事項(xiàng)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植物中驗(yàn)證蛋白相互作用的Pull-down和Co-IP技術(shù)[J]. 徐重益.  植物學(xué)報(bào). 2020(01)



本文編號:3172616

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