目的:探討抑瘤素M （OSM）對體外培養(yǎng)的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUCMSCs）增殖及成骨分化的影響,闡明OSM是一種有效的成骨誘導(dǎo)活性因子。方法:體外培養(yǎng)hUCMSCs,流式細(xì)胞術(shù)檢測第3代hUCMSCs表面標(biāo)志物;CCK-8法測定不同劑量(0.1、1.0和10.0μg·L^-1)重組人抑瘤素M （rhOSM）處理后hUCMSCs的增殖活性。將hUCMSCs分為對照組、經(jīng)典成骨誘導(dǎo)劑組和不同劑量(0.1、1.0和10.0μg·L^-1)rhOSM組,于成骨誘導(dǎo)第4、7和14天,采用BCIP/NBT法進(jìn)行堿性磷酸酶（ALP）染色并定量檢測細(xì)胞中ALP活性,茜素紅染色法檢測鈣結(jié)節(jié)的生成情況并半定量分析細(xì)胞礦化活性,實(shí)時熒光定量PCR（RT-qPCR）法檢測hUCMSCs中Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2 （Runx2）和OCN mRNA表達(dá)水平。結(jié)果:hUCMSCs符合間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）鑒定標(biāo)準(zhǔn)。rhOSM處理hUCMSCs 72h,與對照組比較,10.0μg·L^-1 rhOSM組細(xì)胞增殖活性明顯降低（P<0.05）;處理96... 

【文章來源】：吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2020,46(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞、主要試劑和儀器
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 流式細(xì)胞術(shù)鑒定hUCMSCs免疫表型
    1.4 CCK-8法檢測hUCMSCs的增殖活性
    1.5 hUCMSCs成骨分化誘導(dǎo)培養(yǎng)
    1.6 BCIP/NBT法進(jìn)行ALP染色和ALP活性檢測
    1.7 茜素紅染色法檢測鈣結(jié)節(jié)的生成及半定量分析細(xì)胞礦化活性
    1.8 實(shí)時熒光定量PCR（RT-qPCR）法檢測細(xì)胞中成骨分化相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平
    1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 流式細(xì)胞術(shù)鑒定hUCMSCs表面標(biāo)志物
    2.2 各組hUCMSCs增殖活性
    2.3 各組細(xì)胞ALP染色情況和ALP活性
    2.4 各組細(xì)胞礦化鈣結(jié)節(jié)形成情況和細(xì)胞礦化活性
    2.5 各組細(xì)胞中Runx2和OCN mRNA表達(dá)水平
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]前列腺素E2誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過程中p38MAPK信號通路蛋白的表達(dá)[J]. 才忠民,王歡,尚平,王琦,李劼若.  鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2020(01)
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)及臨床應(yīng)用中的研究進(jìn)展[J]. 李婷,陳莉智,黃文華.  中國醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志. 2019(08)
[3]轉(zhuǎn)化生長因子β3促進(jìn)兔牙髓干細(xì)胞成骨向分化機(jī)制的初步研究[J]. 艾力麥爾旦·艾尼瓦爾,木合塔爾·霍加.  口腔醫(yī)學(xué). 2019(02)
[4]巴斯德畢赤酵母表達(dá)的人抑瘤素M發(fā)酵條件及發(fā)酵產(chǎn)物分析[J]. 孔寧,高海成,劉國民,陳月,周余來,顏煒群.  吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2012(05)

博士論文
[1]BMP9通過MAPKs通路調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及其機(jī)制的初步研究[D]. 趙迎澤.重慶醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號：3161195