目的:探討抑瘤素M （OSM）對體外培養(yǎng)的人臍帶間充質干細胞（hUCMSCs）增殖及成骨分化的影響,闡明OSM是一種有效的成骨誘導活性因子。方法:體外培養(yǎng)hUCMSCs,流式細胞術檢測第3代hUCMSCs表面標志物;CCK-8法測定不同劑量(0.1、1.0和10.0μg·L^-1)重組人抑瘤素M （rhOSM）處理后hUCMSCs的增殖活性。將hUCMSCs分為對照組、經典成骨誘導劑組和不同劑量(0.1、1.0和10.0μg·L^-1)rhOSM組,于成骨誘導第4、7和14天,采用BCIP/NBT法進行堿性磷酸酶（ALP）染色并定量檢測細胞中ALP活性,茜素紅染色法檢測鈣結節(jié)的生成情況并半定量分析細胞礦化活性,實時熒光定量PCR（RT-qPCR）法檢測hUCMSCs中Runt相關轉錄因子2 （Runx2）和OCN mRNA表達水平。結果:hUCMSCs符合間充質干細胞（MSCs）鑒定標準。rhOSM處理hUCMSCs 72h,與對照組比較,10.0μg·L^-1 rhOSM組細胞增殖活性明顯降低（P<0.05）;處理96... 

【文章來源】：吉林大學學報(醫(yī)學版). 2020,46(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細胞、主要試劑和儀器
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 流式細胞術鑒定hUCMSCs免疫表型
    1.4 CCK-8法檢測hUCMSCs的增殖活性
    1.5 hUCMSCs成骨分化誘導培養(yǎng)
    1.6 BCIP/NBT法進行ALP染色和ALP活性檢測
    1.7 茜素紅染色法檢測鈣結節(jié)的生成及半定量分析細胞礦化活性
    1.8 實時熒光定量PCR（RT-qPCR）法檢測細胞中成骨分化相關基因mRNA表達水平
    1.9 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 流式細胞術鑒定hUCMSCs表面標志物
    2.2 各組hUCMSCs增殖活性
    2.3 各組細胞ALP染色情況和ALP活性
    2.4 各組細胞礦化鈣結節(jié)形成情況和細胞礦化活性
    2.5 各組細胞中Runx2和OCN mRNA表達水平
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]前列腺素E2誘導大鼠骨髓間充質干細胞成骨分化過程中p38MAPK信號通路蛋白的表達[J]. 才忠民,王歡,尚平,王琦,李劼若.  鄭州大學學報(醫(yī)學版). 2020(01)
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[3]轉化生長因子β3促進兔牙髓干細胞成骨向分化機制的初步研究[J]. 艾力麥爾旦·艾尼瓦爾,木合塔爾·霍加.  口腔醫(yī)學. 2019(02)
[4]巴斯德畢赤酵母表達的人抑瘤素M發(fā)酵條件及發(fā)酵產物分析[J]. 孔寧,高海成,劉國民,陳月,周余來,顏煒群.  吉林大學學報(醫(yī)學版). 2012(05)

博士論文
[1]BMP9通過MAPKs通路調控間充質干細胞成骨分化及其機制的初步研究[D]. 趙迎澤.重慶醫(yī)科大學 2010



本文編號：3161195