基于ESIPT和AIE探針的活細(xì)胞和脂滴實(shí)時(shí)熒光成像研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-20 04:15
聚集誘導(dǎo)發(fā)光(Aggregation-induced emission,AIE)這一概念自2001年被提出以來,對(duì)有機(jī)發(fā)光材料和生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域產(chǎn)生了重大且深遠(yuǎn)的影響。聚集誘導(dǎo)發(fā)光試劑(AIE Luminogens,AIEgens)作為一種具有高穩(wěn)定性、高可見度的光學(xué)成像探針,已在精準(zhǔn)定位生物成像、胞內(nèi)物質(zhì)測定、動(dòng)態(tài)過程實(shí)時(shí)監(jiān)控、藥物可視化傳輸?shù)缺姸囝I(lǐng)域展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。其中,AIEgens精準(zhǔn)的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)定位能力是一項(xiàng)重要的基礎(chǔ)性研究,對(duì)其在生物醫(yī)學(xué)成像領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用發(fā)揮了不可替代的作用。線粒體、溶酶體、細(xì)胞膜、脂滴等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的特異性染色和點(diǎn)亮的AIEgens的特征和規(guī)律總結(jié),為指導(dǎo)特定功能分子探針的設(shè)計(jì)和豐富分子載體材料的選擇提供了重要的參考價(jià)值。近年來功能性AIEgens的報(bào)道層出不窮,進(jìn)一步拓展了其在生物成像分析領(lǐng)域的應(yīng)用范圍,因此系統(tǒng)性地研究這些新興AIEgens的成像性質(zhì)和定位能力是必要且重要的。其中激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移(Excited-state intramolecular proton transfer,ESIPT)熒光功能分子的細(xì)胞成像性能研究、天然藥物分子的A...
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:123 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 選題依據(jù)及研究內(nèi)容
1.1 研究意義
1.2 研究現(xiàn)狀
1.2.1 聚集誘導(dǎo)發(fā)光
1.2.2 AIE生物成像和傳感應(yīng)用
1.2.3 AIE的精準(zhǔn)定位成像
1.2.4 激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移
1.2.5 天然藥物分子的AIE性質(zhì)
1.2.6 存在的主要問題
1.3 研究內(nèi)容和擬解決的關(guān)鍵問題
1.3.1 研究目的
1.3.2 研究內(nèi)容
1.3.3 擬解決的關(guān)鍵問題
1.3.4 研究思路
1.3.5 技術(shù)和研究手段
第2章 高跨膜性能ESIPT類 AIEgen的制備和細(xì)胞成像應(yīng)用
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)部分
2.2.1 儀器
2.2.2 主要試劑和細(xì)胞系
2.2.3 DSS系列ESIPT分子的制備
2.2.4 MTT法分析DSS系列分子的細(xì)胞毒性
2.2.5 DSS系列分子細(xì)胞穿透能力成像考查
2+的熒光分析以及選擇性"> 2.2.6 Cu2+的熒光分析以及選擇性
2.2.7 EDTA-2Na和 PPi介導(dǎo)的熒光恢復(fù)
2+的細(xì)胞內(nèi)成像分析"> 2.2.8 Cu2+的細(xì)胞內(nèi)成像分析
2.2.9 DSS-4-DEA增強(qiáng)的染料的細(xì)胞內(nèi)化
2.2.10 DSS-4-DEA增強(qiáng)的姜黃素毒性
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 ESIPT探針細(xì)胞成像和熒光傳感的方案設(shè)計(jì)
2.3.2 ESIPT系列探針的合成與結(jié)構(gòu)表征
2.3.3 ESIPT系列探針的AIE性質(zhì)考查
2.3.4 DSS系列分子細(xì)胞穿透成像考查
2+選擇性識(shí)別與機(jī)制探討"> 2.3.5 Cu2+選擇性識(shí)別與機(jī)制探討
2+的熒光成像分析"> 2.3.6 細(xì)胞內(nèi)Cu2+的熒光成像分析
2.3.7 DSS-4-DEA增強(qiáng)的DSS-5-Cl的細(xì)胞內(nèi)化
2.3.8 DSS-4-DEA增強(qiáng)的Cur的細(xì)胞毒性
2.4 結(jié)論
第3章 脂代謝干預(yù)中鹽酸小檗堿的AIE實(shí)時(shí)成像研究
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.1 儀器
3.2.2 主要試劑和細(xì)胞系
3.2.3 細(xì)胞的培養(yǎng)
3.2.4 MTT法分析BBR-Cl對(duì)細(xì)胞存活率影響
3.2.5 油紅O染色脂滴的觀察及細(xì)胞內(nèi)脂滴含量檢測
3.2.6 BBR-Cl對(duì)細(xì)胞的脂代謝干預(yù)的處理
3.2.7 分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 小檗堿類的AIE性質(zhì)
3.3.2 BBR-Cl對(duì)3T3-L1 脂肪細(xì)胞的脂代謝干預(yù)成像監(jiān)控
3.3.3 BBR-Cl對(duì) HeLa細(xì)胞油酸喂養(yǎng)模型的脂代謝干預(yù)成像監(jiān)控
3.4 結(jié)論
第4章 脂滴定位AIEgen TPA-CN的制備和高靈敏成像研究
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 儀器
4.2.2 細(xì)胞和試劑
4.2.3 TPA-CN的制備和表征
4.2.4 TPA-CN的光學(xué)性質(zhì)測定
4.2.5 TPA-CN的 pH響應(yīng)考查和機(jī)制解析
4.2.6 MTT法分析TPA-CN分子對(duì)細(xì)胞存活率影響
4.2.7 TPA-CN的脂滴定位成像
4.2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 TPA-CN的合成與結(jié)構(gòu)表征
4.3.2 TPA-CN的 AIE性質(zhì)
4.3.3 TPA-CN的 pH響應(yīng)的光譜分析
4.3.4 TPA-CN的脂滴定位成像研究
4.3.5 TPA-CN用于脂滴動(dòng)態(tài)信息的高靈敏成像
4.4 結(jié)論
第5章 全文總結(jié)與展望
5.1 全文總結(jié)
5.2 論文創(chuàng)新點(diǎn)
5.3 展望
5.3.1 覆蓋更廣的亞細(xì)胞定位探針
5.3.2 智能型治療劑的開發(fā)
5.3.3 AIE性質(zhì)天然分子庫的建立
參考文獻(xiàn)
科研成果
致謝
本文編號(hào):3148955
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:123 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 選題依據(jù)及研究內(nèi)容
1.1 研究意義
1.2 研究現(xiàn)狀
1.2.1 聚集誘導(dǎo)發(fā)光
1.2.2 AIE生物成像和傳感應(yīng)用
1.2.3 AIE的精準(zhǔn)定位成像
1.2.4 激發(fā)態(tài)分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移
1.2.5 天然藥物分子的AIE性質(zhì)
1.2.6 存在的主要問題
1.3 研究內(nèi)容和擬解決的關(guān)鍵問題
1.3.1 研究目的
1.3.2 研究內(nèi)容
1.3.3 擬解決的關(guān)鍵問題
1.3.4 研究思路
1.3.5 技術(shù)和研究手段
第2章 高跨膜性能ESIPT類 AIEgen的制備和細(xì)胞成像應(yīng)用
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)部分
2.2.1 儀器
2.2.2 主要試劑和細(xì)胞系
2.2.3 DSS系列ESIPT分子的制備
2.2.4 MTT法分析DSS系列分子的細(xì)胞毒性
2.2.5 DSS系列分子細(xì)胞穿透能力成像考查
2+的熒光分析以及選擇性"> 2.2.6 Cu2+的熒光分析以及選擇性
2.2.7 EDTA-2Na和 PPi介導(dǎo)的熒光恢復(fù)
2+的細(xì)胞內(nèi)成像分析"> 2.2.8 Cu2+的細(xì)胞內(nèi)成像分析
2.2.9 DSS-4-DEA增強(qiáng)的染料的細(xì)胞內(nèi)化
2.2.10 DSS-4-DEA增強(qiáng)的姜黃素毒性
2.3 結(jié)果與討論
2.3.1 ESIPT探針細(xì)胞成像和熒光傳感的方案設(shè)計(jì)
2.3.2 ESIPT系列探針的合成與結(jié)構(gòu)表征
2.3.3 ESIPT系列探針的AIE性質(zhì)考查
2.3.4 DSS系列分子細(xì)胞穿透成像考查
2+選擇性識(shí)別與機(jī)制探討"> 2.3.5 Cu2+選擇性識(shí)別與機(jī)制探討
2+的熒光成像分析"> 2.3.6 細(xì)胞內(nèi)Cu2+的熒光成像分析
2.3.7 DSS-4-DEA增強(qiáng)的DSS-5-Cl的細(xì)胞內(nèi)化
2.3.8 DSS-4-DEA增強(qiáng)的Cur的細(xì)胞毒性
2.4 結(jié)論
第3章 脂代謝干預(yù)中鹽酸小檗堿的AIE實(shí)時(shí)成像研究
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)部分
3.2.1 儀器
3.2.2 主要試劑和細(xì)胞系
3.2.3 細(xì)胞的培養(yǎng)
3.2.4 MTT法分析BBR-Cl對(duì)細(xì)胞存活率影響
3.2.5 油紅O染色脂滴的觀察及細(xì)胞內(nèi)脂滴含量檢測
3.2.6 BBR-Cl對(duì)細(xì)胞的脂代謝干預(yù)的處理
3.2.7 分析及統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3.3 結(jié)果與討論
3.3.1 小檗堿類的AIE性質(zhì)
3.3.2 BBR-Cl對(duì)3T3-L1 脂肪細(xì)胞的脂代謝干預(yù)成像監(jiān)控
3.3.3 BBR-Cl對(duì) HeLa細(xì)胞油酸喂養(yǎng)模型的脂代謝干預(yù)成像監(jiān)控
3.4 結(jié)論
第4章 脂滴定位AIEgen TPA-CN的制備和高靈敏成像研究
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)部分
4.2.1 儀器
4.2.2 細(xì)胞和試劑
4.2.3 TPA-CN的制備和表征
4.2.4 TPA-CN的光學(xué)性質(zhì)測定
4.2.5 TPA-CN的 pH響應(yīng)考查和機(jī)制解析
4.2.6 MTT法分析TPA-CN分子對(duì)細(xì)胞存活率影響
4.2.7 TPA-CN的脂滴定位成像
4.2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
4.3 結(jié)果與討論
4.3.1 TPA-CN的合成與結(jié)構(gòu)表征
4.3.2 TPA-CN的 AIE性質(zhì)
4.3.3 TPA-CN的 pH響應(yīng)的光譜分析
4.3.4 TPA-CN的脂滴定位成像研究
4.3.5 TPA-CN用于脂滴動(dòng)態(tài)信息的高靈敏成像
4.4 結(jié)論
第5章 全文總結(jié)與展望
5.1 全文總結(jié)
5.2 論文創(chuàng)新點(diǎn)
5.3 展望
5.3.1 覆蓋更廣的亞細(xì)胞定位探針
5.3.2 智能型治療劑的開發(fā)
5.3.3 AIE性質(zhì)天然分子庫的建立
參考文獻(xiàn)
科研成果
致謝
本文編號(hào):3148955
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