發(fā)布時間：2021-04-18 01:11

　　目的在人間充質(zhì)干細(xì)胞（hMSCs）誘導(dǎo)成軟骨分化過程中,探討X型膠原與其啟動子甲基化狀態(tài)之間的關(guān)系,為揭示表觀遺傳學(xué)調(diào)控參與成軟骨分化的可能機制提供理論基礎(chǔ)。方法收集6例來源于深圳市第二人民醫(yī)院脊柱外科患者的腰椎椎體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為研究對象,運用離心沉淀法進行細(xì)胞微球培養(yǎng),用含有轉(zhuǎn)化生長因子β3（TGF-β3）及2%胎牛血清（FBS）的高糖細(xì)胞培養(yǎng)基（DMEM）進行成軟骨誘導(dǎo)并作為實驗組（3例）;在該誘導(dǎo)液中加入5’-氮雜胞苷（5’-AZA）作為誘導(dǎo)組（3例）;不含TGF-β3的2%胎牛血清的高糖細(xì)胞培養(yǎng)基的為對照組（3例）。在分化3 d后進行定量PCR,檢測成軟骨分化相關(guān)基因表達(dá)以及X型膠原啟動子區(qū)域甲基化改變情況,采用方差分析及多樣本間的均數(shù)比較（q檢驗）分析基因水平表達(dá)差異;組間DNA甲基化水平差異采用Kruskal-Wallis檢驗統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)果通過生物信息學(xué)預(yù)測X型膠原的啟動子區(qū)域可能存在CpG富集區(qū)域,在含有5’-氮雜胞苷的成軟骨誘導(dǎo)分化過程中,X型膠原表達(dá)逐漸上升,與對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（F=37.526,P <0.001）,而X型膠原啟動子區(qū)域的甲基化... 

【文章來源】：中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版). 2020,14(02)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

圖１分離培善綱人＿＿干離胞）及＿雷標(biāo)恚物的棒測

中華關(guān)節(jié)外科雜志（電子版）２〇２〇?年?４?月第?Ｉ４?卷第?２?期?Ｃｈｉｎ?Ｊ?Ｊｏｉｎｔ?Ｓｕｒｇ（Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ?Ｅｄｉｔｉｏｎ），Ａｐｒｉｌ?２〇２〇，Ｖｏｌ．?Ｍ，Ｎｏ．?２??？?１７１?？??０．０??？??對照組?誘導(dǎo)組?誘導(dǎo)組＋５’－ＡＺＡ??圖２?Ｃｄ－Ｘａｌ，倉動子Ｋ＿域餅ＣｐＧ．島甲碁租比率比較．。圖．Ａ為Ｍ－Ｘａｌ廢戰(zhàn)子Ｊｉ雜約ｌＯＯＯｂｐ?興及韻國Ｂ為３０??個克隆子經(jīng)測序顯示Ｃ〇ｌ－Ｘａｌ啟動子區(qū)域的旮６島＿．蠢徹謹(jǐn)＿蔡；圖Ｃ為比較咨組．聞Ｃｏｌ－Ｘａｉｇ著子Ｋ獄的ＣＰＧ島ｆ?＿化??率，對照組部．誘審組ｔｉ？?＝?１１．?０６６，Ｐ?＞０．０５》，》．．＃照組與誘＿?＋ＭＡＺＡ祖比較＜〇．?０５＞??有研究翁萌在某些情況下，腿Ａ申基化抑制的??效車可能取決于申基化ＣＰＧ位點的總數(shù)Ｄｅ＿１１］，但??有幾項研寃清楚地表明，早個ＣＰＧ位點的去甲基化??對于允許基因表達(dá)可能是決定性的￥在稀疏時??ＣｐＧ，皂動子中，基因組區(qū)域的完全脫甲盡化對于允??許轉(zhuǎn)錄不是必需的。但仍有另外一種可能性，針？對??軟骨調(diào)節(jié)蛋白啟動子的分析表明，ＤＮＡ甲基化和組??蛋白乙�；c轉(zhuǎn)錄調(diào)控均有關(guān)［１２＿１３］。組蛋白乙??酰化也參與了軟骨細(xì)胞肥大的減節(jié)，，因此也可能存??在Ｃｏｌ－Ｘａｌ表達(dá)受祖蛋白乙�；{(diào)節(jié)＊但是，需ｇ??進一步的研究怔實這種可能性＆??在軼骨分化過程中，甲基化水平進一步陣低，這??可能是由于復(fù)制過程中子代ＤＮＡ鏈甲基化的抑制??所致。因此甲棊化永平降低與細(xì)胞生長也有關(guān)，這??是由于分化過程中細(xì)胞群體的甲塞化喪失所致ｓ??同樣也需要對生長板中的肥大軟脅細(xì)胞進行分析，??ＡＡＴＴＴ


本文編號：3144501