環(huán)磷酰胺對(duì)鐵過載小鼠骨髓造血干細(xì)胞的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-04-08 01:11
目的研究環(huán)磷酰胺對(duì)鐵過載小鼠骨髓造血干細(xì)胞的影響。方法建立鐵過載小鼠模型,隨機(jī)將40只雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、低劑量組(0.25 g/kg)、中劑量組(0.5 g/kg)、高劑量組(1 g/kg)。模型組小鼠腹腔注射不同濃度及劑量的右旋糖酐鐵,對(duì)照組小鼠注射磷酸緩沖鹽溶液(PBS液)0.2 m L/次,觀察體質(zhì)量及肝脾、骨髓等臟器改變,檢測(cè)血清鐵蛋白水平;進(jìn)一步選擇中劑量組模型小鼠按不同時(shí)間點(diǎn)分組(D1,D2,D3,D4,D5,D6,D7,D14),連續(xù)2 d腹腔注射環(huán)磷酰胺(Cy)50 mg/kg,對(duì)照組小鼠注射PBS液0.2 mL/次,建立鐵過載小鼠Cy預(yù)處理模型,流式細(xì)胞儀檢測(cè)骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMMNCs)、造血干細(xì)胞(HSCs)細(xì)胞數(shù)目及其在細(xì)胞周期中的分布、骨髓微環(huán)境等變化情況。結(jié)果與對(duì)照組小鼠相比,鐵過載組小鼠體質(zhì)量明顯降低、血清鐵蛋白明顯升高、肝脾明顯增大、臟器鐵沉積明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);鐵過載組小鼠外周血未見明顯改變;Cy小鼠外周血白細(xì)胞(WBC)數(shù)目、淋巴細(xì)胞百分率(YM%)第1~4天明顯降低,第4天降至最低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義...
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,40(01)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 動(dòng)物
1.2 試劑和儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 建立鐵過載三級(jí)危險(xiǎn)模型
1.2在前期成功實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,取中度危險(xiǎn)鐵過載模型鼠建立Cy預(yù)處理模型
1.2.1 外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)
1.2.2 BMMNCs分離及計(jì)數(shù)
1.2.3 磁珠富集造血干 (lin-c-kit+scal+) /祖細(xì)胞 (lin-c-kit+Sca-l-) 分選
1.2.4造血干細(xì)胞(Lin-c-kit+Sca-1+)流式分選
1.2.5 流式細(xì)胞周期檢測(cè)
1.3 統(tǒng)計(jì)方法
2 結(jié)果
2.1 地中海貧血三級(jí)危險(xiǎn)鐵過載模型建立
2.1.1 小鼠的一般表現(xiàn)
2.1.2 小鼠體質(zhì)量變化
2.1.3 肝脾系數(shù)及肝臟質(zhì)量增加指數(shù)變化
2.1.4 血清鐵蛋白的檢測(cè)
2.1.5肝臟HE、普魯士染色
2.1.6 脾臟HE、普魯士染色
2.1.7 骨髓活檢HE染色及普魯士藍(lán)染色
2.2 Cy預(yù)處理鐵過載模型小鼠
2.2.1 Cy處理后小鼠的一般情況
2.2.2 Cy對(duì)外周血象的影響
2.3 Cy對(duì)鐵過載小鼠骨髓細(xì)胞的影響
2.3.1 骨髓單個(gè)核細(xì)胞數(shù)目變化
2.3.2 Cy對(duì)骨髓細(xì)胞數(shù)目的影響
2.3.3 Cy對(duì)骨髓HSCs周期的影響
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]小鼠鐵過載模型的建立及其對(duì)骨髓造血功能的影響[J]. 柴笑,趙明峰,李德冠,孟娟霞,盧文藝,穆娟,孟愛民. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(05)
本文編號(hào):3124558
【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,40(01)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 動(dòng)物
1.2 試劑和儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 建立鐵過載三級(jí)危險(xiǎn)模型
1.2在前期成功實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,取中度危險(xiǎn)鐵過載模型鼠建立Cy預(yù)處理模型
1.2.1 外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)
1.2.2 BMMNCs分離及計(jì)數(shù)
1.2.3 磁珠富集造血干 (lin-c-kit+scal+) /祖細(xì)胞 (lin-c-kit+Sca-l-) 分選
1.2.4造血干細(xì)胞(Lin-c-kit+Sca-1+)流式分選
1.2.5 流式細(xì)胞周期檢測(cè)
1.3 統(tǒng)計(jì)方法
2 結(jié)果
2.1 地中海貧血三級(jí)危險(xiǎn)鐵過載模型建立
2.1.1 小鼠的一般表現(xiàn)
2.1.2 小鼠體質(zhì)量變化
2.1.3 肝脾系數(shù)及肝臟質(zhì)量增加指數(shù)變化
2.1.4 血清鐵蛋白的檢測(cè)
2.1.5肝臟HE、普魯士染色
2.1.6 脾臟HE、普魯士染色
2.1.7 骨髓活檢HE染色及普魯士藍(lán)染色
2.2 Cy預(yù)處理鐵過載模型小鼠
2.2.1 Cy處理后小鼠的一般情況
2.2.2 Cy對(duì)外周血象的影響
2.3 Cy對(duì)鐵過載小鼠骨髓細(xì)胞的影響
2.3.1 骨髓單個(gè)核細(xì)胞數(shù)目變化
2.3.2 Cy對(duì)骨髓細(xì)胞數(shù)目的影響
2.3.3 Cy對(duì)骨髓HSCs周期的影響
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]小鼠鐵過載模型的建立及其對(duì)骨髓造血功能的影響[J]. 柴笑,趙明峰,李德冠,孟娟霞,盧文藝,穆娟,孟愛民. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào). 2013(05)
本文編號(hào):3124558
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