OsRhoGDI2是通過酵母雙雜交從水稻幼穗中分離的一個與Rho蛋白家族成員OsRacD相互作用蛋白的編碼基因,但功能尚不明確。本研究利用CRISPR/Cas9技術創(chuàng)制水稻OsRhoGDI2基因敲除突變體。檢測結果表明,轉基因水稻T0代獲得2種純合突變體,T1代獲得8種純合突變體。序列分析顯示,在敲除水稻中,該基因的編輯靶點附近發(fā)生了堿基的替換或缺失,預期生成喪失RhoGDI保守結構域的截短蛋白。表型比對分析發(fā)現(xiàn),敲除水稻與對照相比,株高顯著降低,統(tǒng)計學分析結果顯示,敲除水稻株高降低源于第Ⅱ和第Ⅲ莖節(jié)的縮短,提示OsRhoGDI2基因可能與水稻株高控制相關。 

【文章來源】：生物工程學報. 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

OsRhoGDI2基因結構及編輯靶點的位置

pW-T-OsRhoGDI2表達載體的構建

圖2 pW-T-OsRhoGDI2表達載體的構建將上述PCR產物測序，并進行序列分析。結果顯示(表2),T0代獲得雜合株系6個(占54.5%)、雙等位突變株系2個(占18.2%)、純合株系2個(占18.2%)、未被編輯株系1個(占9.1%)。T0代11個株系與野生型進行編輯靶點序列比對，發(fā)現(xiàn)6個雜合株系中有2個(#1、#5)在靶位點2處發(fā)生突變，4個(#2、#3、#8、#11)在靶位點1處發(fā)生突變；2個雙等位突變株系(#7、#9)均在靶位點1處發(fā)生突變；2個純合株系(#6、#10)均在靶位點1處發(fā)生突變(圖4)。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3098369