發(fā)布時間：2021-03-20 21:06

　　目的:研究轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）對人肺支氣管上皮細(xì)胞（HBEC）的細(xì)胞形態(tài)和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）標(biāo)志基因表達(dá)的影響。方法:TGF-β1處理HBEC 0、1、2、3、4和5 d,觀察細(xì)胞形態(tài);運(yùn)用免疫熒光實驗,觀察TGF-β1處理HBEC 4 d時的細(xì)胞骨架;TGF-β1分別處理0、1、3、6 h和0、1、2、3、4、5 d,提取總RNA后反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行實時熒光定量PCR檢測EMT標(biāo)志基因α-SMA、β-catenin、SNAI1和E-cadherin的mRNA表達(dá)情況。結(jié)果:TGF-β1處理HBEC 2 d時就能夠引起類似EMT的形態(tài)改變,在處理3、4和5 d時細(xì)胞形態(tài)改變尤為明顯,大多數(shù)細(xì)胞變?yōu)榧忓N形;免疫熒光實驗結(jié)果顯示,細(xì)胞骨架的分布隨細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變;實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,SNAI1在3 h和Ecadherin在6 h的mRNA表達(dá)量顯著升高;α-SMA和β-catenin的mRNA表達(dá)量在各時間點均顯著降低;SNAI1和Ecadherin的mRNA表達(dá)量在1 d時顯著升高,隨后各時間點mRNA表達(dá)量都呈現(xiàn)不同程度的下降,SNAI1在3和4 d時mRNA表達(dá)量顯... 

【文章來源】：生物技術(shù)通訊. 2020,31(01)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

TGF-β1誘導(dǎo)HBEC形態(tài)變化

利用實時熒光定量PCR檢測TGF-β1處理細(xì)胞0、1、2、3、4和5 d的mRNA表達(dá)量。如圖4所示，與對照組相比，SNAI1在1 d時的mRNA表達(dá)量極顯著上升，而后各時間點的mRNA表達(dá)量都呈現(xiàn)不同程度的下降，2、4和5 d的mRNA表達(dá)量顯著下降；α-SMA在1 d時的mRNA表達(dá)量極顯著上升，而后各時間都呈現(xiàn)不同程度的下降，3和4 d的mRNA表達(dá)量顯著下降；E-cadherin在2、3和5 d的mRNA表達(dá)量都顯著下降；β-catenin的mRNA表達(dá)量在不同時間點均無顯著變化。圖3 TGF-β1處理HBEC 0～6 h EMT標(biāo)志基因mRNA的表達(dá)量

TGF-β1處理HBEC 0～6 h EMT標(biāo)志基因mRNA的表達(dá)量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]ZEB家族調(diào)節(jié)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用機(jī)制[J]. 沈靈,辛天池,李明發(fā).  細(xì)胞生物學(xué)雜志. 2009(06)

博士論文
[1]GLIPR-2促進(jìn)Ⅱ、Ⅲ型EMT的作用和機(jī)制研究[D]. 黃紹光.第三軍醫(yī)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]人結(jié)直腸癌相關(guān)成纖維細(xì)胞和結(jié)腸正常成纖維細(xì)胞對結(jié)直腸癌細(xì)胞EMT的影響及機(jī)制[D]. 聶倩倩.浙江大學(xué) 2016



本文編號：3091668