將體外構(gòu)建的工程骨預(yù)血管化可降低其內(nèi)部的傳質(zhì)限制,促進(jìn)骨修復(fù)。在基于內(nèi)皮細(xì)胞的工程骨血管化策略中,通過(guò)將間充質(zhì)干細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行體外共培養(yǎng)支持構(gòu)建物成骨分化和血管生成。但在共培養(yǎng)研究中,尤其是在成骨誘導(dǎo)條件下,對(duì)兩種細(xì)胞間的相互作用及相關(guān)分子機(jī)制認(rèn)識(shí)尚不清楚。此外,體內(nèi)骨組織中存在機(jī)械刺激,其中流體剪切力（Fluid shear stress,FSS）是骨組織中調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化和內(nèi)皮細(xì)胞血管生成的重要因素,但目前FSS刺激對(duì)體外共培養(yǎng)物成骨和成血管影響的研究剛剛起步。本研究以大鼠骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs）和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human umbilical vein endothelial,HUVECs）為研究對(duì)象,考察生長(zhǎng)培養(yǎng)基（Growth medium,GM）和成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基（Osteogenic induction medium,OIM）對(duì)BMSCs-HUVECs共培養(yǎng)體系成骨分化以及血管生成的影響,探究OIM下BMSCs對(duì)HUVECs成血管和FSS刺激對(duì)共培養(yǎng)體系成骨分化的... 

【文章來(lái)源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１在ＧＭ和ＯＩＭ條件下ＢＭＳＣｓ單培養(yǎng)和ＢＭＳＣｓ－ＨＵＶＥＣｓ共培養(yǎng)成骨分化??

第２０頁(yè)?華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文??２．３．２培養(yǎng)基對(duì)ＢＭＳＣｓ單培養(yǎng)及ＢＭＳＣｓ－ＨＵＶＥＣｓ共培養(yǎng)物基因表達(dá)影響??為了考察ＢＭＳＣｓ單培養(yǎng)和ＢＭＳＣｓ－ＨＵＶＥＣｓ共培養(yǎng)物中成骨與成血管相關(guān)基因的??表達(dá)，本實(shí)驗(yàn)使用ｑＲＴ－ＲＣＲ分析在ＧＭ和ＯＩＭ中培養(yǎng)１、３、７和１４ｄ后相關(guān)基因的表??達(dá)情況。??結(jié)果如圖２．２所示，在成骨誘導(dǎo)條件下，與ＢＭＳＣｓ單培養(yǎng)組相比，共培養(yǎng)組的成??骨標(biāo)志基因辦似２和（９你ｒ／ｘ顯著上調(diào)（Ｐ＜０．０５），ｃｏ／／ａｇｅ？?／基因表達(dá)水平在１?ｄ??和３ｄ顯著升高（ＰＣ０．０５），而ＭＺ和ＯＣ＃的基因表達(dá)在７ｄ和１４ｄ顯著上調(diào)（Ｐ＜??０．０５）。此外，成骨誘導(dǎo)條件下，共培養(yǎng)組成骨標(biāo)志基因的表達(dá)水平明顯高于生長(zhǎng)條件??下的共培養(yǎng)組（ＰＣ０．０５）�；虮磉_(dá)水平檢測(cè)的結(jié)果證明，在成骨誘導(dǎo)條件下與ＨＵＶＥＣｓ??共培養(yǎng)能顯著促進(jìn)ＢＭＳＣｓ的成骨能力。??大量研宂表明ＶＥＧＦ－Ａ和趨化因子Ｃｘｃｌ９、Ｃｘｃｌｌ２對(duì)成骨和血管生成至關(guān)重要［４１］。??由圖２．２可見(jiàn)，１４ｄ內(nèi)，成骨誘導(dǎo)條件下共培養(yǎng)組中趨化因子Ｃｘｃ／７２的基因表達(dá)要顯著??低于ＢＭＳＣｓ單培養(yǎng)和ＧＭ組（Ｐ＜０．０５）。第１、３ｄ時(shí)，與ＧＭ組相比，成骨誘導(dǎo)條??件下共培養(yǎng)組中Ｃｃｃ／９和嘆有更高的基因表達(dá)（Ｐ＜０．０５）。??ＡＬＰ?Ｃｏｔｉａｇｅｎ?Ｔ?紀(jì)??Ｗ－ｊ?５．?（Ｈｉ?５．０－??［ＩＩ?，．?ｈ?＾?＃?ｙ?＼ｒ?｛�。�?＃?＃?ｉ?＾??ｊｌｉｙ?．Ｉ?Ｉ?ｊ，『ｉｕＭｉ?＂Ｈｉｉｉ?ｉ？ｌ?Ｊ?ｙ??１?ａ?７?１４?１?３?７?１４?ｔ?３?７?１４??Ｔｉｍｅ?（ｄａｙｓ）?

圖２．５間接共培養(yǎng)中Ｃｘｃｌ９對(duì)ＨＵＶＥＣｓ增殖的影響??Ｆｉｇ．２．５?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｃｘｃｌ９?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]剪切力和拉伸應(yīng)力對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的影響[J]. 王藝璇,蔡軍.  中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版). 2012(08)
[2]平行平板流動(dòng)腔的研究進(jìn)展[J]. 唐婉容,王璐.  口腔材料器械雜志. 2012(02)

博士論文
[1]ERK5信號(hào)通路在流體剪切力調(diào)控成骨細(xì)胞力學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的機(jī)制研究[D]. 姜金.蘭州大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3066990