狂犬病是由狂犬病病毒引起的一種引起中樞神經(jīng)損害的急性人獸共患病。每年全球接近59000人死于狂犬病,我國是狂犬病的高發(fā)地區(qū)之一�？袢∫坏┌l(fā)病致死率幾乎100%,目前尚無有效的治療方法,而接種疫苗是目前預(yù)防狂犬病的最高效的方法�？袢〔《居�5種結(jié)構(gòu)蛋白以及單股負(fù)鏈RNA構(gòu)成。糖蛋白位于細(xì)胞膜表面,是目前發(fā)現(xiàn)狂犬病病毒中唯一一種可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體（Virus-neutralizing antibody,VNA）的蛋白。有研究表明,Tenascin C中的FBG結(jié)構(gòu)域可以結(jié)合并激活Toll樣受體4（Toll like receptor 4,TLR4）,基于本實驗室之前的研究發(fā)現(xiàn)TLR4佐劑可以顯著提高狂犬疫苗的免疫效果,我們推測Tenascin C也可用作狂犬疫苗的佐劑。為了探索Tenascin C的FBG結(jié)構(gòu)域?qū)τ诳袢〔《靖腥緳C(jī)體引起的免疫應(yīng)答的影響,我們通過反向遺傳操作構(gòu)建了表達(dá)Tenascin C-FBG結(jié)構(gòu)域的重組狂犬病病毒LBNSE-FBG-C,并對該重組病毒在體內(nèi)外的基本特性進(jìn)行了研究。首先在親本狂犬病病毒LBNSE的G和L蛋白中間位置插入Tenascin C蛋白的FB... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

RABV顆粒結(jié)構(gòu)模式圖(Davisetal.2015)

表達(dá)TenascinC-FBG的重組狂犬病病毒的構(gòu)建與鑒定3弱毒毒株的G蛋白替換強(qiáng)毒G蛋白，會導(dǎo)致病毒的致病性減弱(Faberetal.2004)。L蛋白約有2127-2142個氨基酸，含量最少，主要發(fā)揮RNA依賴的RNA聚合酶（RNA-dependentRNApolymerase,RdRP）功能，參與病毒的轉(zhuǎn)錄復(fù)制(Holmesetal.2005)。圖1-2RABV基因組結(jié)構(gòu)模式圖(Albertinietal.2011)Fig.1-2DiagramofRABVgenome(Albertinietal.2011)1.2.3狂犬病病毒的理化性質(zhì)RABV的穩(wěn)定性差，會被多種理化因子影響。RABV對高溫，紫外線等物理因素敏感，病毒在56℃存活不到1h或被紫外線照射30min也可被有效滅活。部分消毒劑如75%酒精、甲醛、H2O2、高錳酸鉀及脂溶劑等均會破壞病毒結(jié)構(gòu)，使其失去感染機(jī)體的能力。環(huán)境的酸堿度對RABV也有影響，pH值在7.2-8.0時病毒較穩(wěn)定，過高（>11）或過低（<5）也會造成病毒失活(潘鐵驪等.2011)。RABV在低溫環(huán)境中可以保存較長時間，4℃時病毒滴度可以保持10天左右，-80℃則可以穩(wěn)定維持?jǐn)?shù)年。1.3狂犬病的流行病學(xué)目前為止，狂犬病在除大洋洲和南極洲之外的地方都有存在，特別是在亞非地區(qū)危害較大，夏秋季節(jié)多發(fā)。所有的溫血動物都有幾率感染RABV，哺乳動物是主要儲存宿主(Dietzscholdetal.2008)。歐美地區(qū)通過大規(guī)模疫苗接種使得狂犬病發(fā)病率持續(xù)下降，已基本得到控制，目前主要存在于狐貍、蝙蝠、鼬類等野生動物中。而亞非地區(qū)大多是發(fā)展中國家，因為人口密度大，經(jīng)濟(jì)較為落后，對于狂犬病的防控能力較差，是狂犬病的高發(fā)地區(qū)，而印度是狂犬病發(fā)病率最高的國家。流浪貓狗是狂犬病流行的一大因素，兒童與流浪貓狗接觸幾率大導(dǎo)致被抓傷或咬傷的風(fēng)險增高。高達(dá)80%的狂犬病病例發(fā)生在農(nóng)村，農(nóng)村犬類多以放養(yǎng)為主，防控意識淡薄，管理監(jiān)督制度不完善，疫苗接種覆蓋率低都是?

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文4人數(shù)超過7000人（如圖1-3）。21世紀(jì)以后，我國施行一系列政策防控狂犬病，疫情開始回落（如圖1-4）。2015年WHO提出在2030年消除人類中的狂犬病，而疫苗接種是我國實現(xiàn)此目標(biāo)的關(guān)鍵。圖1-31950-2014年中國狂犬病報告病例數(shù)(中國疾病預(yù)防控制中心2016)Figure.1-3ReportontheincidenceofrabiesinChinaduring1950-2014圖1-42015-2019年中國狂犬病報告Figure.1-4ReportontheincidenceofrabiesinChinaduring2015-20191.4狂犬病的發(fā)病機(jī)制RABV不能通過未受傷的皮膚感染，只能經(jīng)傷口進(jìn)入宿主體內(nèi)，在傷口處的肌肉細(xì)胞中增殖，之后經(jīng)運動神經(jīng)逆軸突進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)（Centralnervoussystem,CNS）并大量增殖，從脊髓到腦的擴(kuò)散速度加快。RABV的復(fù)制過程包括吸附胞吞、脫殼、基因組轉(zhuǎn)錄復(fù)制、組裝、出芽。病毒表面囊膜上的G蛋白與宿主細(xì)胞744592502410276801644516422290010020030040050060070080090020152016201720182019狂犬病死亡數(shù)狂犬病發(fā)病數(shù)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]鋁佐劑特性及其研究進(jìn)展[J]. 陳婷婷,陸偉根.  世界臨床藥物. 2015(02)
[4]CpG-ODN疫苗佐劑的研究進(jìn)展[J]. 張慶勇,羅春華,朱武飛.  中國免疫學(xué)雜志. 2014(10)
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