目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基聯(lián)合白藜蘆醇對人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡的影響。方法:通過CCK8細(xì)胞活力檢測試劑盒測定白藜蘆醇及其與人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基共同處理人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞HTR8后對細(xì)胞增殖及活性的影響;細(xì)胞遷移試驗(yàn)檢測白藜蘆醇和人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基對細(xì)胞遷移能力的影響;顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),并用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率的變化;Western blot檢測白藜蘆醇和人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基對細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2以及遷移相關(guān)蛋白MMP-9表達(dá)的影響。結(jié)果:白藜蘆醇能夠抑制HTR8細(xì)胞增殖,抑制細(xì)胞遷移及MMP-9蛋白的表達(dá),改變Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。而人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基能夠逆轉(zhuǎn)白藜蘆醇對細(xì)胞的抑制作用。結(jié)論:人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基能夠通過調(diào)控Bax、Bcl-2、MMP-9的蛋白表達(dá)逆轉(zhuǎn)白藜蘆醇對人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞的抑制作用。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基可作為潛在的治療人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞功能障礙的臨床手段,孕婦需要小心使用白藜蘆醇。 

【文章來源】：現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,20(07)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

人臍帶來源的間充質(zhì)干細(xì)胞的流式鑒定

為了檢測白藜蘆醇對人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞的影響，我們首先通過CCK8細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)確定白藜蘆醇的使用劑量。結(jié)果顯示，與空白對照組相比，白藜蘆醇處理能夠顯著抑制人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞的細(xì)胞活力，并且其抑制效應(yīng)呈劑量依賴性，隨著白藜蘆醇濃度的升高，抑制效果逐漸增強(qiáng)，25μM為白藜蘆醇的抑制中濃度（IC50）（見圖2）。接著，我們采用CCK8細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)探究聯(lián)合使用人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的條件培養(yǎng)基和白藜蘆醇對人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞活力的影響，結(jié)果顯示，隨著人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的條件培養(yǎng)基的濃度逐漸升高（40%、60%、80%），白藜蘆醇對于人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞活力的抑制作用逐漸減弱（見圖3）。2.3 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的條件培養(yǎng)基能夠挽救白藜蘆醇對人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞遷移的抑制作用

人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞的遷移能力對于其侵入子宮蛻膜螺旋小動脈并介導(dǎo)動脈的重塑過程至關(guān)重要[18,19]，因此，我們研究了白藜蘆醇以及人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件性培養(yǎng)基對于人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞遷移能力的影響。結(jié)果顯示，相比于對照組細(xì)胞，白藜蘆醇處理組細(xì)胞的遷移能力明顯受到抑制，當(dāng)加入不同濃度（40%、60%、80%）的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件性培養(yǎng)基后，相比于白藜蘆醇處理組細(xì)胞，隨著人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞條件性培養(yǎng)基濃度的升高，人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞的遷移能力逐漸恢復(fù)（見圖4）。圖4 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的條件培養(yǎng)基和白藜蘆醇對人絨毛膜外滋養(yǎng)層細(xì)胞遷移的影響


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