研究背景和目的:骨骼肌的再生是修復(fù)骨骼肌損傷的關(guān)鍵。隨著年齡的增長(zhǎng),骨骼肌再生能力明顯下降,而骨骼肌再生的關(guān)鍵——低氧通路,其活性也受到抑制。目前科學(xué)界對(duì)于低氧通路導(dǎo)致骨骼肌再生能力下降的機(jī)制仍然缺乏完整的認(rèn)識(shí)。有研究表明芳香烴受體核轉(zhuǎn)運(yùn)子（ARNT）是低氧通路中的關(guān)鍵組成部分,可能是調(diào)控骨骼肌再生的關(guān)鍵。本研究旨在探索骨骼肌再生機(jī)制,為提高老齡人口骨骼肌再生效率,尋找促骨骼肌再生方法提供理論依據(jù)。方法:1.分析衰老對(duì)骨骼肌再生能力的影響選用幼齡鼠與老齡鼠分別構(gòu)建骨骼肌冰凍損傷模型,于術(shù)后第5、10天取材。HE染色再生肌纖維橫截面積以量化骨骼肌再生能力;使用ELISA、Western、qRT-PCR、PCR芯片分析低氧通路、Notch通路、骨骼肌再生相關(guān)基因的表達(dá)變化;免疫熒光染色、多普勒超聲用以評(píng)估小鼠下肢血流情況;提取骨骼肌前體細(xì)胞（SMPs）進(jìn)行體外誘導(dǎo)以探究不同年齡來(lái)源成肌細(xì)胞數(shù)量及分化差異。2.探索ARNT在骨骼肌再生過(guò)程中的作用與機(jī)制采用siRNA技術(shù)使C2C12細(xì)胞系中的ARNT基因沉默并觀察細(xì)胞分化差異及相關(guān)因子的表達(dá)變化;構(gòu)建骨骼肌特異性敲除ARNT基因的轉(zhuǎn)基因小鼠,... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：116 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１．小鼠骨骼肌冰凍損傷模型的制備

所有獲得的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)均用平均值士標(biāo)準(zhǔn)誤（ｎｉｅａｎ±ＳＤ）表示。數(shù)據(jù)進(jìn)行方??差分析（ＡＮＯＶＡ），以確定兩個(gè)平均值之間的統(tǒng)計(jì)意義。ｐ值＜０．０５有統(tǒng)計(jì)學(xué)意??義。??１．３結(jié)果??１．?３．?１幼齡鼠與老齡鼠的肌纖維橫截面積在非損傷條件下的對(duì)比??為了更好的評(píng)估不同組別之間的差異，本實(shí)驗(yàn)首先選取非損傷條件下的幼齡??鼠和老齡鼠的脛骨前肌，切片后進(jìn)行ＨＥ染色并計(jì)算平均肌纖維橫截面積。結(jié)果??顯示二者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。??

冰凍損傷，于損傷后第５天和第１０??天取材，對(duì)所取材的脛骨前肌進(jìn)行ＨＥ染色并計(jì)算其中再生肌纖維的面積。ＨＥ??染色片中可見(jiàn)同一取材時(shí)間點(diǎn)，幼齡鼠的冉生骨骼肌肌纖維面積要顯著大于老??齡鼠，老齡鼠的骨骼肌再生區(qū)域內(nèi)可見(jiàn)更多的炎性細(xì)胞，甚至出現(xiàn)局部壞死。??統(tǒng)計(jì)顯示幼齡鼠的骨骼肌再生肌纖維面積在損傷后第５天和第１０天的統(tǒng)計(jì)中都??明顯大于老齡鼠（ｐ＜〇．?０００１），提示幼齡鼠損傷后的骨骼肌再生能力要優(yōu)于老??齡鼠。??Ａ?Ｒ??ｎ?Ｙｏｕｎｇ?Ｏｌｄ?＾?Ｙ??戀＿??圖１：丨．冰凍損傷后第５天和第１０天，幼齡鼠與老齡鼠的肌纖維橫截面積對(duì)比。??（Ａ）幼齡鼠（ｎ＝８，?８－丨０周，雌雄各半）與老齡鼠（ｎ＝８，２２－２４月，雌雄各半）的骨骼肌再??生肌纖維面積在損傷后第５天和第１０天的ＨＥ染色片對(duì)比，？?（Ｂ）在損傷ｈ？第５天和第１０??天，幼齡鼠與老齡鼠的再生肌纖維橫截面積對(duì)比�；鶞�(zhǔn)尺：ｌ〇〇Ｐｍ。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－３．?Ｔｈｅ?ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ａｖｅｒａｇｅ?ｃｒｏｓｓ－ｓｅｃｔｉｏｎａｌ?ａｒｅａｓ?ｏｆ?ＴＡ?ｍｕｓｃｌｅ?ｆｉｂｅｒｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ??ｙｏｕｎｇ?ａｎｄ?ｏｌｄ?ｍｉｃｅ?ｏｎ?ｂｏｔｈ?ｄａｙｓ?５?ａｎｄ?１０?ｐｏｓｔ－ｉｎｊｕｒｙ．??（Ａ）?Ｔｈｅ?ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ?ｏｆ?ＴＡ?ｍｕｓｃｌｅ?ｆｉｂｅｒｓ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｙｏｕｎｇ?（ｎ二８，８－１０?ｗｅｅｋｓ，?ｈａｌｆ?ｍａｌｅ?ａｎｄ??２８??


本文編號(hào)：3043048