PGC7（Primordial germ cell 7）是一個(gè)固有無(wú)序蛋白,能夠與多種蛋白產(chǎn)生互作關(guān)系,并參與多個(gè)生物學(xué)過(guò)程,如保護(hù)母源印記,調(diào)控早期胚胎發(fā)育,維持細(xì)胞多能性,促進(jìn)體細(xì)胞重編程等。我們前期研究表明,異染色質(zhì)結(jié)合蛋白HP1BP3是PGC7互作蛋白之一,二者能夠通過(guò)改變?nèi)旧|(zhì)的濃縮狀態(tài)參與印記基因GTL2的表達(dá)調(diào)控,進(jìn)而影響細(xì)胞多能性。此外,PGC7能夠影響HP1α與HP1BP3之間的互作關(guān)系。在這項(xiàng)研究的基礎(chǔ)上,本文發(fā)現(xiàn)PGC7還能夠與HP1α蛋白互作。HP1α是重要的異染色質(zhì)結(jié)構(gòu)性蛋白,通常參與異染色質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)建立,基因表達(dá)調(diào)控和細(xì)胞周期調(diào)控等過(guò)程�；赑GC7和HP1α的互作關(guān)系,本文分別從這兩個(gè)蛋白各自的功能出發(fā),通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR（Quantitative Real time PCR,qRT-PCR）、免疫印記（Western blot）、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP）、CRISPR-Cas9、堿性磷酸酶染色（AP染色）、流式細(xì)胞周期檢測(cè)等技術(shù),探討了二者在細(xì)胞多能性維持和細(xì)胞周期調(diào)控中的作用。研究結(jié)果如下:1.本文首先利用... 

【文章來(lái)源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 PGC7及HP1α的結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能
        1.1.1 PGC結(jié)構(gòu)及功能概述
        1.1.2 HP1α結(jié)構(gòu)及功能概述
    1.2 多能性維持和表觀遺傳調(diào)控
        1.2.1 干細(xì)胞與細(xì)胞多能性
        1.2.2 DNA甲基化及組蛋白修飾
        1.2.3 基因組印記與多能性維持
        1.2.4 H19 參與細(xì)胞多能性維持
    1.3 細(xì)胞周期的動(dòng)態(tài)調(diào)控
        1.3.1 組蛋白翻譯后修飾與細(xì)胞周期
        1.3.2 HP1 參與細(xì)胞周期進(jìn)程
第二章 PGC7與HP1α互作關(guān)系鑒定及HP1α敲除細(xì)胞系構(gòu)建
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要溶液配制
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 HP1α載體構(gòu)建及蛋白表達(dá)
        2.2.2 HP1α與 PGC7 互作關(guān)系驗(yàn)證
        2.2.3 HP1α敲除細(xì)胞系構(gòu)建
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 PGC7與HP1α對(duì)細(xì)胞多能性的影響
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要溶液配制
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 HP1α敲除對(duì)細(xì)胞甲基化的影響
        3.2.2 HP1α敲除對(duì)印記基因表達(dá)的影響
        3.2.3 HP1α敲除對(duì)H19 印記調(diào)控區(qū)甲基化水平的影響
        3.2.4 HP1α與 PGC7 參與多能性因子表達(dá)調(diào)控
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 PGC7與HP1α參與調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要溶液配制
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.2.1 HP1α影響細(xì)胞周期進(jìn)程
        4.2.2 PGC7與HP1α參與細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期調(diào)控
        4.2.3 PGC7 影響H3K9me3和H3S10ph水平
        4.2.4 PGC7與HP1α影響細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3005034