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細菌群感效應(yīng)抑制劑的篩選與分離及QSI作用機理初探

發(fā)布時間:2020-12-28 18:13
  由表皮葡萄球菌引起的疾病多數(shù)為反復(fù)發(fā)作難以治愈,究其原因是因為表皮葡萄球菌易形成生物被膜(Biofilm,BF)。細菌在BF狀態(tài)下比浮游狀態(tài)下耐抗生素的能力能提高10~1000倍,而形成BF的細菌對抗生素更易產(chǎn)生耐藥性。表皮葡萄球菌BF的形成是由群感效應(yīng)(Quorum Sensing,QS)調(diào)控的,QS能直接控制BF的形成或解離。而群感效應(yīng)抑制劑(Quorum Sensing inhibitors,QSI)是在不抑菌的情況下,抑制QS的產(chǎn)生,因此微生物不易對QSI產(chǎn)生耐藥性,已經(jīng)成為當(dāng)今抗菌藥物研發(fā)的趨勢。在前期研究中,發(fā)現(xiàn)用不同的培養(yǎng)基發(fā)酵放線菌,其抑制表皮葡萄球菌BF形成和紫色素桿菌QS的效果差別很大。在前期工作中,發(fā)現(xiàn)灰色鏈霉菌TRM10325抑制紫色素桿菌QS和表皮葡萄球菌BF形成都有較好的效果,因此選取17種合成培養(yǎng)基、26種天然培養(yǎng)基發(fā)酵TRM10325,采用微孔板半定量法檢測其對紫色素桿菌QS以及表皮葡萄球菌BF形成的抑制作用。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同配方的培養(yǎng)基對放線菌TRM10325抑制QS活性的影響也不相同,說明成分不同的培養(yǎng)基,明顯影響微生物不同次級代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生。為篩... 

【文章來源】:塔里木大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:102 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

細菌群感效應(yīng)抑制劑的篩選與分離及QSI作用機理初探


紫色桿菌素、脫氧紫色桿菌素結(jié)構(gòu)式

生物膜,效應(yīng),氧化反應(yīng)


里木大學(xué)碩士學(xué)位論文 第 1 章 文獻綜成[8]。紫色桿菌素的合成途徑涉及 5 個基因:VioA、VioB、VioC、VioD 和 VioE,布在同一轉(zhuǎn)錄單元[9]。紫色桿菌素的合成由 5 個步驟組成[10-15]:①VioA 酶對 L-色氧化反應(yīng) ②VioB 酶對 IPA 氧化反應(yīng) ③VioE 酶對中間產(chǎn)物 X 催化反應(yīng) ④VioCioD 對脫氧紫色桿菌素前體的氧化反應(yīng) ⑤紫色桿菌素的生成。而其紫色桿菌素的合受 QS 調(diào)控的[16],由于有色素的產(chǎn)生易于觀察,因此被用作 QS 的指示菌株。綜上從 QS 調(diào)控途徑出發(fā),從多種來源篩選 QS 抑制劑(QS inhibitor, QSI)深入 QSI 成分及其結(jié)構(gòu),有望為新型藥物的研發(fā)提供實驗依據(jù)。

紫色素,合成培養(yǎng)基,桿菌,培養(yǎng)基


圖 2-1 17 種合成培養(yǎng)基發(fā)酵 TRM10325 對紫色素桿菌 QS 產(chǎn)生能力的影響Fig. 2-1 Effects of C. violaceum quorum sensing ability by 17 kinds of synthetic media fermentationActinomycetes TRM10325注 a:ISP4;b:ISP7;c:斜面保藏培養(yǎng)基;d:T3G;e:淀粉酪素培養(yǎng)基;f:GW1;g:海藻糖脯氨酸培養(yǎng)基;h:發(fā)酵 B 培養(yǎng)基;i:TKM;j:F1; k:F8;l:高氏一號;m:GTB;n:GA;o:SCNB;p:甘油精氨酸培養(yǎng)基;q:T5G;R:12472 對照組;S:Am6 對照組!癌 ” 代表抑制菌生長;“─ ─”代表促進菌生長。Note a:ISP4medium;b:ISP7medium;c: Inclined preservation medium;d:T3G medium;e: Starch casein medium;f:GW1medium;g: Trehaloseproline medium;h: Fermentation B medium;i:TKM medium;j:F1medium;k:F8medium;l:Gao's medium;m:GTB medium;n:GA medium;o:SCNB medium;p: Glycerin arginine medium;q:T5G medium;R: Untreated;S:Am6 medium. “─ ” :Inhibition bacterial growth;“─ ─”: Promotebacterial growth.17 種合成培養(yǎng)基中,沒有發(fā)現(xiàn)能使紫色素桿菌產(chǎn)色素能力低于 30%及以下的培養(yǎng)基。使紫色素桿菌產(chǎn)色素能力下降至 30%~60%之間的培養(yǎng)基有:ISP7、斜面保藏培養(yǎng)基、GW1、海藻糖脯氨酸培養(yǎng)基、高氏一號、GA、甘油精氨酸培養(yǎng)基 7 種培養(yǎng)基;下降至60%~100%之間的培養(yǎng)基有:ISP4、F82 種培養(yǎng)基。抑制紫色素桿菌生長的培養(yǎng)基有:淀粉酪素培養(yǎng)基、T3G、TKM、SCNB、T5G 發(fā)酵 B 培養(yǎng)基 6 種培養(yǎng)基。促進菌生長從而促進紫色素產(chǎn)生的培養(yǎng)基有:F、GTB 2 種培養(yǎng)基。

【參考文獻】:
期刊論文
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[6]中藥群體感應(yīng)抑制劑的篩選及對銅綠假單胞菌的作用[J]. 張安,吳潔,儲衛(wèi)華.  藥物生物技術(shù). 2016(01)
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博士論文
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[2]黑木耳黑色素對細菌群體感應(yīng)調(diào)控行為的抑制及其抗氧化活性的研究[D]. 李斌.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]海洋微生物中細菌群體感應(yīng)抑制因子的篩選與作用機制研究[D]. 史曉翀.中國海洋大學(xué) 2008

碩士論文
[1]兩株放線菌多相分類與阿拉爾鏈霉菌TRM 155-22遺傳操作體系構(gòu)建[D]. 高廣斌.塔里木大學(xué) 2017
[2]新型胸苷三唑類衍生物的設(shè)計合成及對群體感應(yīng)的抑制作用[D]. 崔玲.吉林大學(xué) 2017
[3]抑制表皮葡萄球菌生物膜形成的放線菌篩選及其作用機制研究[D]. 謝婷婷.塔里木大學(xué) 2016
[4]蜂房哈夫尼菌AHLs的分泌規(guī)律及群體感應(yīng)抑制劑的篩選[D]. 孔西曼.大連工業(yè)大學(xué) 2016
[5]阪崎腸桿菌群體感應(yīng)信號分子的產(chǎn)生及其對生物膜形成的影響[D]. 王錦利.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[6]群感效應(yīng)抑制劑的篩選及QSI對銅綠假單胞菌作用的研究[D]. 姚江寧.廣東藥科大學(xué) 2016
[7]新疆南疆地區(qū)奶牛乳房炎性表皮葡萄球菌aap基因的原核表達及功能研究[D]. 李英.塔里木大學(xué) 2015
[8]細菌群體感應(yīng)抑制因子的篩選與活性研究[D]. 唐藝丹.中國海洋大學(xué) 2014
[9]假單胞菌喹諾酮信號系統(tǒng)抑制劑的篩選與研究[D]. 鄭紅達.中國海洋大學(xué) 2013
[10]細菌群體感應(yīng)抑制因子的篩選與功能的初步研究[D]. 陳立志.福建農(nóng)林大學(xué) 2013



本文編號:2944177

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