細胞分裂素作為一種重要的植物激素,在植物的生長、發(fā)育、衰老、抗病以及非生物脅迫等方面發(fā)揮著巨大的作用。在已有的文獻報道中,細胞分裂素的合成代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的研究已較為詳細,但轉(zhuǎn)運的分子機制等方面研究尚少。AtABCG14作為植物體內(nèi)細胞分裂素的轉(zhuǎn)運蛋白而被發(fā)現(xiàn),它能夠?qū)⒏亢铣傻膖rans-Zeatin（tZ）類細胞分裂素向地上組織運輸。因此,為進一步研究細胞分裂素的轉(zhuǎn)運機制,我們采用正向遺傳學(xué)方法,借助EMS誘變建立突變體庫,本研究主要進行根部細胞分裂素積累突變體的篩選、基因定位以及功能研究。具體研究結(jié)果如下:（1）以根短且根部熒光積累為標準,我們篩選到zsr9突變體。通過突變體表型分析,發(fā)現(xiàn)zsr9突變體表現(xiàn)為蓮座葉小且花序小、莖細、葉綠素含量低等表型,結(jié)合qRT-PCR分析,zsr9突變體與atabcg14突變體有類似的表達模式,初步確定其與細胞分裂素之間存在聯(lián)系。（2）zsr9突變基因的克隆。將突變體zsr9與兩種生態(tài)型Col-4（Columbia-4）和Ler（Landsberg）進行雜交,利用雜交的F2代進行基因定位,利用回交的F2代進行表型觀察,借助于圖位克隆和重測序兩... 

【文章來源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

擬南芥磷酸蛋白磷酸酶（PPP）催化亞基系譜圖

圖 3.1 zsr9 突變體的表型觀察（A，B）Col-4、atabcg14 以及 zsr9 突變體 10 d 幼苗的根長、根部熒光，bar = 1 cm（A），Col-4 與 zsr9 突變體 10 d 根部伸長區(qū)表型（B）；（C，D）Col-4、atabcg14 以及 zsr9 突變體25 d 蓮座葉表型，bar = 1 cm（C），25 d 蓮座葉大小統(tǒng)計（D）；（E，F(xiàn)）Col-4 與 zsr9 突變體 25 d 葉綠素含量的測定（E），Col-4 與 zsr9 突變體 35 d 株高、花序表型，bar = 5 cm，（F），數(shù)據(jù)表示為平均值±SD（n = 12），顯著性差異（t 檢驗）用*表示：*，P < 0.05；**，P < 0.01；***，P < 0.001。Figure 3.1 Phenotypes of zsr9 mutant.(A,B) The Root length, root fluorescence of 10-DAG seedlings of Col-4, atabcg14 and zsr9mutant, scale bar = 1 cm (A), the elongation phenotype of 10-DAG seedlings of Col-4, atabcg14and zsr9 mutant (B); (C,D) The rosette phenotype of 25-DAG Col-4, atabcg14 and zsr9 mutant,scale bar = 1 cm (C), the rosette diameter of 25-DAG wild-type, atabcg14 and zsr9 mutant (D);

圖 3.2 zsr9 突變體中 ARR5 基因表達量分析）Col-4、atabcg14突變體以及zsr9突變體10 d小苗的熒光表型，bar = 50 μm（；B定量檢測 Col-4、atabcg14 突變體以及 zsr9 突變體的地下組織以及地上組織表達量。數(shù)據(jù)表示為平均值±SD（n = 3），顯著性差異（t 檢驗）用*表示：*，P < 0.01；***，P < 0.001。Figure 3.2Analysis of ARR5 gene expression in zsr9 mutant) Expression of GFP fluorescence in wild-type, atabcg14 and zsr9 mutant, bar = T-PCR analysis of ARR5 expression in 10-DAG plants. R, root; s, shoot. The ACTId as the control. Data are means ± SD (n = 3), significant differences (Student’icated with asterisks: *, P < 0.05 and **, P < 0.01, ***, P < 0.001.zsr9 突變體的圖位克隆利用實驗室已有的兩種擬南芥生態(tài)型 ARR5::eGFP Col-4 和 AR


本文編號：2913478