發(fā)布時間：2020-12-11 18:41

　　異種體細胞核移植（inter-specific somatic cell nuclear transfer,iSCNT）胚胎易出現(xiàn)發(fā)育阻滯現(xiàn)象,線粒體功能異�？赡苁菍е耰SCNT合子基因組激活（Zygotic genome activation,ZGA）失敗的重要原因。本研究對8-cell期牛-牛同種與羊-牛異種克隆胚胎RNA-Seq測序分析發(fā)現(xiàn),在異種克隆胚胎中,與線粒體功能相關基因表達出現(xiàn)異常,如線粒體融合基因Mfn1和Mfn2、線粒體核糖體大亞基基因Mrpl48、線粒體外膜基因Tomm40、線粒體內膜基因Timm22和Timm23,以及線粒體促凋亡基因Caspase-2等。RT-qPCR結果顯示,Mfn1、Mfn2、Timm22、Timm23、Tomm40和Mrpl48在異種克隆胚胎的表達量顯著低于同種克隆胚胎,Caspase-2表達量顯著高于同種克隆胚胎。同種克隆胚胎中的Tomm40、Timm22、Timm23和Mrpl48的表達量分別是異種克隆胚胎的15.38、11.01、9.38和2.61倍。蛋白免疫熒光分析發(fā)現(xiàn),鈉/鉀離子轉運蛋白ATP1B3、線粒體融合蛋白MFN1和MF... 

【文章來源】：內蒙古大學內蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

牛、小鼠IVF及NT胚胎發(fā)育率

內蒙古大學 碩士學位論文常胚胎發(fā)育過程的一系列表觀修飾變化，如染色質的重構、組蛋白的替換、組蛋白的 H3K9 和 H3K27 等修飾和 DNA 甲基化等重編程修飾。這些重要的生物學事件都需要在 ZGA 之前完成。如果這些重編程過程發(fā)生異常，都會導致重構胚胎的 ZGA 失敗，進而影響重構胚的發(fā)運命運。圖 1.2 為 SCNT 胚胎在早期發(fā)育過程中發(fā)生的重編程分子機制，表觀遺傳障礙可能是導致 SCNT 胚胎效率低下的重要原因[27]。

圖 2.1 體外發(fā)育的克隆胚胎A：羊-牛異種克隆 8-cell 胚胎；B：牛-牛同種克隆 8-cell 胚胎；C：牛-牛同種克隆囊胚Figure2.1 Photograph of in vitro development of SCNT embryos.A: O-B inter-species cloned 8-cell embryos, B: B-B intra-species cloned 8-cell embryos, C: B-Bintra-species cloned blastocyst.表 2.1 同種、異種克隆胚胎發(fā)育情況統(tǒng)計Table 2.1 Statistics of the development of intra-/inter-species cloned embryos.組別Groups胚胎數(shù)Embryos融合胚胎Fusion embryos2-cell 胚胎2-cell embryos8-cell 胚胎8-cell Embryos桑椹胚Morulae囊胚Blastocyst牛-牛 339 272 (80.2)a213 (78.3)a179 (65.8)a118 (43.4)a58 (27.2)a羊-牛 307 249 (81.1)a186 (74.7)a126 (63.3)a3 (1.2)b0b注：同一縱行的不同小寫字母差異顯著（P<0.05）

【參考文獻】：
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本文編號：2911033