海藻糖是一種非還原性雙糖,脅迫條件下可作為應(yīng)激保護(hù)劑,對(duì)蛋白質(zhì)和生物膜起到保護(hù)作用。海藻糖含量的升高能夠增強(qiáng)植物對(duì)各種非生物脅迫的耐受性,具有保存生物活力的特殊功能。海藻糖-6-磷酸合酶（Tps）與海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶（Tpp）是海藻糖代謝途徑中的關(guān)鍵酶,Tps和Tpp基因的表達(dá)豐度直接影響海藻糖的合成和植物的抗逆性。檸條錦雞兒（Caragana korshinskii.Kom）主要分布在內(nèi)蒙古西部地區(qū),是優(yōu)良的固沙植物和水土保持植物,具有廣泛的適應(yīng)性和很強(qiáng)的抗逆性,是荒漠和荒漠草原地帶的優(yōu)良灌木飼料。因此研究檸條錦雞兒海藻糖-6-磷酸合酶基因（CkTPS）和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因（CkTPP）的表達(dá)調(diào)控機(jī)理及在應(yīng)對(duì)非生物脅迫中發(fā)揮的作用具有重要意義。本研究在前期克隆CkTPS和CkTPP基因序列的基礎(chǔ)上,分析了CkTPS和CkTPP的表達(dá)特性和功能。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果表明CkTPS和CkTPP在檸條錦雞兒的根、莖、葉中均表達(dá),在根中的表達(dá)量均高于莖和葉,并且其表達(dá)受PEG-模擬干旱脅迫的誘導(dǎo)。利用基因組步移法克隆了CkTPS啟動(dòng)子序列,順式作用元件預(yù)測(cè)結(jié)果顯示,該基因的... 

【文章來(lái)源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

pORER1-Pro.CkTPS::GUS融合表達(dá)載體的構(gòu)建策略

內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文 CkTPS 和 CkTPP 基因在不同組織中的表達(dá)，分別提取一月齡，進(jìn)行 Real time Q-PCR 檢測(cè)。結(jié)果表明，TPS 和 TPP 基因在者在根中的表達(dá)量均高于莖和葉，在莖中的表達(dá)量最低（圖 2.2下 CkTPS 和 CkTPP 的表達(dá)分析 time Q-PCR 技術(shù)分析 PEG 處理下 CkTPS 和 CkTPP 的表達(dá)量， TPS 和 TPP 的表達(dá)。在 PEG 處理下，TPS 基因的表達(dá)量隨著 7d 時(shí)達(dá)到峰值；TPP 基因的表達(dá)量表現(xiàn)為先上升后下降，在處，在處理 7d 時(shí)其表達(dá)量低于對(duì)照組。以上結(jié)果表明，TPS 基因當(dāng) PEG 脅迫超過(guò)一定限度時(shí)，TPS 基因仍可持續(xù)應(yīng)答；TPP 基，但是當(dāng) PEG 脅迫超過(guò)一定限度時(shí)，TPP 基因不能繼續(xù)應(yīng)答（

圖 2.3 PEG 模擬干旱脅迫條件下 CkTPS 和 CkTPP 基因的表達(dá)不同小寫(xiě)字母代表 P< 0.05Fig. 2.3 Expression level of the TPS and TPP under PEG treatment因啟動(dòng)子的克隆及順式作用元件預(yù)測(cè)雞兒基因組 DNA 為模板，通過(guò)兩次染色體步移，分別得到 442A、B）,在擴(kuò)增序列的 5’端設(shè)計(jì)正向引物 pCkTPS-F，在 CkTPS CkTPS-R 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，得到 1101bp 的序列（圖 2.4C）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]紫菜遺傳多樣性分析及其6-磷酸海藻糖合成酶基因轉(zhuǎn)化水稻的研究[D]. 喬利仙.中國(guó)海洋大學(xué) 2007

碩士論文
[1]檸條錦雞兒海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因的表達(dá)特性和功能分析[D]. 劉文雅.內(nèi)蒙古大學(xué) 2018
[2]檸條錦雞兒海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因的克隆及特性分析[D]. 趙天濟(jì).內(nèi)蒙古大學(xué) 2016
[3]巴西橡膠樹(shù)6—磷酸海藻糖合成酶基因的克隆、表達(dá)分析及其功能驗(yàn)證[D]. 周斌輝.海南大學(xué) 2013



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