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森林草莓FvPHO1;H9基因克隆與功能分析

發(fā)布時間:2020-10-27 10:16
   植物PHO1基因編碼磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,在植物磷運(yùn)輸過程中發(fā)揮著重要作用。本研究以森林草莓為試材,通過PCR技術(shù)從森林草莓中分離克隆出FvPHO1;H9基因并分析其表達(dá)特性,并通過RNAi技術(shù)分析了FvPHO1;H9基因功能。主要結(jié)果如下:1.從森林草莓中分離克隆出FvPHO1;H9基因,FvPHO1;H9基因的CDS堿基序列共有2289 bp,所編碼磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白共含有762個氨基酸。FvPHO1;H9蛋白中含有SPX和EXS結(jié)構(gòu)域。2.克隆出約2 kb的FvPHO1;H9基因啟動子區(qū)域,序列分析表明FvPHO1;H9基因啟動子中存在CAAT、TATA、光響應(yīng)元件、激素響應(yīng)元件、逆境脅迫響應(yīng)元件等多種順式作用元件。3.利用qRT-PCR技術(shù)分析驗(yàn)證了FvPHO1;H9基因表達(dá)特性。FvPHO1;H9具有組織器官表達(dá)特異性,在花和葉柄中表達(dá)量高,而在幼葉、老葉、根中表達(dá)量低,在果實(shí)發(fā)育的過程中果實(shí)內(nèi)FvPHO1;H9基因表達(dá)量不斷升高。低Pi脅迫顯著上調(diào)森林草莓根和葉中FvPHO1;H9基因的表達(dá)量,干旱脅迫和低溫脅迫顯著上調(diào)FvPHO1;H9基因的表達(dá)量,而赤霉素和生長素處理可以上調(diào)FvPHO1;H9基因表達(dá)量,但是效果不顯著。4.FvPHO1;H9基因沉默的草莓植株的根、葉片、果實(shí)的磷含量均顯著下降。FvPHO1;H9基因沉默影響了草莓植株的生長發(fā)育,表現(xiàn)為株高顯著降低、冠徑和葉片顯著變小,光合作用效率下降,此外FvPHO1;H9基因沉默的草莓果實(shí)的重量和可溶性糖含量均顯著下降。
【學(xué)位單位】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:Q943.2;S668.4
【部分圖文】:

營養(yǎng)液,草莓,中磷,葉片


3 結(jié)果與分析濃度對森林草莓生長和 FvPHO1;H9 基因表達(dá)的影響濃度對森林草莓葉片磷含量的影響研究營養(yǎng)液中磷肥濃度對森林草莓葉片中磷含量的影響,配制 KH2mM、0.1mM、1mM、10mM 的 Hoagland 營養(yǎng)液,用以澆灌森林草理 21d 后測定草莓葉片中的磷含量。結(jié)果如圖 1 所示,隨著營養(yǎng)液高,草莓葉片的磷含量也不斷升高,且不同處理間存在顯著性差異。O4的營養(yǎng)液澆灌,草莓葉片中的磷含量最低,為 310.53μg·g-1,僅僅O4的營養(yǎng)液處理的四分之一。

草莓,磷肥,森林,濃度


22圖 2 磷肥濃度對森林草莓形態(tài)的影響A:從正面觀察草莓形態(tài);B:從俯視角度觀察草莓形態(tài)Fig.2 Phenotypic of strawberries treated with different concentrations of KH2PO4A: Observation of strawberry morphology from the front; B: Observation of strawberry morphology from above測定由不同濃度磷的營養(yǎng)液澆灌的‘Ruegen’草莓植株的葉柄長度,結(jié)果如圖 3B 所示,隨著營養(yǎng)液中磷濃度的不斷升高,‘Rugen’草莓的葉柄長度呈現(xiàn)出先增加后減少的趨勢。施用磷濃度為 1mM 的營養(yǎng)液,草莓的葉柄長度最長,當(dāng)營養(yǎng)液中磷的濃度達(dá)到 10mM,草莓的葉柄長度最短。可見,營養(yǎng)液中適當(dāng)增加磷肥濃度可以促進(jìn)草莓植株葉柄的伸長,但是磷肥濃度過高反而抑制草莓植株葉柄的伸長。

磷肥,草莓,森林,濃度


2圖 3 磷肥濃度對森林草莓表型的影響A:株高的測定;B:葉柄長度的測定;C:冠徑的測定;D:葉長的測定;E:葉寬的測定Fig. 3 Effect of phosphate concentration on phenotype of forest strawberryA:Measurement of plant height; B:Measurement of petiole length; C:Measurement of crown diameter; D:Measurement of leaf length; E:Measurement of leaf width
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