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溫度、鹽度及干露對(duì)寬礁膜配子體早期生長(zhǎng)、發(fā)育的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-10-10 02:13
   寬礁膜(Monostroma latissimum)是一種可食用的大型經(jīng)濟(jì)綠藻,具有較高的經(jīng)濟(jì)及生態(tài)價(jià)值。寬礁膜的生活史為異型世代交替,經(jīng)歷微觀囊狀孢子體時(shí)期和宏觀葉狀配子體兩個(gè)時(shí)期,其中葉狀配子體為人工栽培的主要對(duì)象。本實(shí)驗(yàn)以南海海域優(yōu)勢(shì)綠藻——寬礁膜為研究材料,觀察其游孢子發(fā)生以及配子體的形成,并研究了溫度、鹽度、干露等環(huán)境因子對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育的影響,以期探明其形態(tài)建成和早期發(fā)育的適宜條件,為今后開展全人工栽培提供理論依據(jù)。本研究從2018年4月至9月在室內(nèi)完成了寬礁膜孢子體的人工繁育,并以此作為本次實(shí)驗(yàn)游孢子材料。實(shí)驗(yàn)過程中運(yùn)用Nikon Eclipse Ti-E倒置熒光顯微鏡分別在40倍、100倍、200倍、400倍光鏡及1000倍油鏡下,記錄游孢子從固著萌發(fā)到幼葉狀配子體形成的動(dòng)態(tài)變化,并運(yùn)用實(shí)驗(yàn)生態(tài)學(xué)及形態(tài)學(xué)方法,設(shè)置不同的溫度(15、20、25、30℃)、鹽度(10、15、20、25、30、35、40)和日干露時(shí)間(對(duì)照、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 h)梯度,對(duì)固著游孢子進(jìn)行培育,具體結(jié)果如下:1、寬礁膜游孢子的早期發(fā)生與幼配子體發(fā)育觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:寬礁膜配子體早期發(fā)育經(jīng)過游孢子萌發(fā)、細(xì)胞分裂、單列絲狀體形成、假根形成、葉狀體形成等五個(gè)生長(zhǎng)階段。剛釋放的游孢子細(xì)胞呈梨形或橢圓形,具四根鞭毛,在放散后前0-3 h運(yùn)動(dòng)能力最強(qiáng),6 h后基本失去活力,鞭毛消失;剛固著的游孢子呈圓形或橢圓形,直徑2.994±0.292μm,并有一紅色眼點(diǎn)。游孢子固著后1-5 d為萌發(fā)期,主要進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)積累及體積增大;第5 d開始第一次分裂,形成上下兩個(gè)細(xì)胞,其中靠近基部細(xì)胞隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),逐漸向下延伸形成假根細(xì)胞;頂部細(xì)胞則繼續(xù)單向分裂,形成單列絲狀體,后經(jīng)過橫縱交替分裂擴(kuò)展形成葉狀體苗;寬礁膜配子體生長(zhǎng)為散生長(zhǎng)方式,無固定的生長(zhǎng)點(diǎn),藻體各部位細(xì)胞分裂速度依次為頂部中部基部。2、溫度、鹽度對(duì)寬礁膜配子體早期生長(zhǎng)及發(fā)育的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:不同溫度培養(yǎng)條件下,在游孢子萌發(fā)和單列絲狀體形成階段(1~13 d),以20℃組配子體生長(zhǎng)速度最快,平均相對(duì)生長(zhǎng)率達(dá)16.7%,顯著高于其它溫度組(P0.05),隨后從第15 d開始(此時(shí)主要進(jìn)行幼葉狀體的生長(zhǎng)),15℃組相對(duì)生長(zhǎng)率顯著上升,并顯著高于其它組(P0.05),且游孢子粘連現(xiàn)象發(fā)生較多。30℃組培養(yǎng)初期與15℃、25℃相對(duì)生長(zhǎng)率差異不顯著,但培養(yǎng)后期生長(zhǎng)受到抑制,主要與高溫引起的污損生物附著有關(guān),且此時(shí)葉狀體顏色發(fā)黃。低鹽度組(10)寬礁膜游孢子不能正常萌發(fā),但隨著鹽度的升高,葉狀體發(fā)育趨于正常,藻體顏色從低鹽度狀態(tài)下發(fā)白、發(fā)黃變成淺綠或深綠,細(xì)胞間排列由稀疏逐漸變得緊密,其日相對(duì)生長(zhǎng)速率在鹽度為30時(shí)達(dá)到最大值,為12.76%,葉面積相對(duì)生長(zhǎng)率為17.64%。隨著鹽度的繼續(xù)升高,寬礁膜葉狀體細(xì)胞間隙更小,葉狀體生長(zhǎng)速率下降,但其藻體發(fā)育顏色最深。此外高鹽度條件下(40)游孢子不萌發(fā)的比例較高,具體表現(xiàn)為休眠狀態(tài),只完成細(xì)胞增大,不分裂。3、干露對(duì)寬礁膜配子體生長(zhǎng)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:隨著日干露時(shí)間增長(zhǎng)其相對(duì)生長(zhǎng)率呈先上升后下降的趨勢(shì),在日干露1.0 h達(dá)到最大值,為10.87%。同時(shí),隨著干露時(shí)間的延長(zhǎng),寬礁膜幼配子體葉綠素含量整體呈下降趨勢(shì),葉綠素a與葉綠素b比值(chl-a/chl-b)差異不顯著,平均為0.472;短時(shí)間干露(0.5、1.0 h)對(duì)抗氧化酶活性(如超氧化物歧化酶SOD、過氧化氫酶CAT)影響不明顯,隨著干露時(shí)間延長(zhǎng)抗氧化酶活性持續(xù)上升,在干露6.0 h過氧化氫酶活性開始下降;此外,隨著干露時(shí)間的延長(zhǎng),藻體內(nèi)脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)也呈現(xiàn)一定的變化趨勢(shì),其中可溶性蛋白含量在干露0.5、1.0 h與對(duì)照組差異顯著,并呈下降趨勢(shì),干露2.0 h后蛋白質(zhì)含量開始回升;脯氨酸含量變化趨勢(shì)與可溶性蛋白較為接近,在干露0.5和1.0 h與對(duì)照組差異顯著并低于對(duì)照組,隨著干露時(shí)間延長(zhǎng)脯氨酸含量與對(duì)照組差異不顯著(P0.05),但較對(duì)照組含量較高;可溶性糖變化趨勢(shì)與生長(zhǎng)趨勢(shì)呈負(fù)相關(guān),其含量隨時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì),當(dāng)干露0.5、1.0、2.0 h時(shí)與對(duì)照組差異不顯著,干露3.0 h后差異顯著,從開始的7.5 mg/g上升到14.8mg/g,此時(shí)寬礁膜生長(zhǎng)已開始受抑制,說明不同節(jié)律干露可溶性糖含量變化與配子體生長(zhǎng)規(guī)律相一致。在干露5.0 h時(shí)可溶性糖含量出現(xiàn)低值,與對(duì)照組差異不顯著。
【學(xué)位單位】:廣東海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:Q945
【部分圖文】:

寬礁膜,配子體,孢子體,葉狀


圖 1-1 寬礁膜葉狀配子體(A)與囊狀孢子體(B)Fig.1-1 Thalloid Gametophyte (A) and Cystic Sporozoites (B) of M. latissimum寬礁膜是典型的異型世代交替生活史[21,22],即大型葉片狀配子體(n)和微小球狀孢子體(2n)的兩種世代交替[22-24](如圖 1-1)。在我國(guó)南部,其大型葉狀配子體出現(xiàn)在每年 12 月至 5 月間(水溫在 18-25 ℃),其中,3-4 月為生長(zhǎng)繁盛期,配子囊成熟后放散配子(n),并進(jìn)行雌雄配子結(jié)合形成合子(2n),進(jìn)入微小球狀孢子體階段,附著在附著基質(zhì)上,以孢子囊的方式度過高溫夏季,初秋時(shí)開始成熟;

游孢子,寬礁膜,配子,孢子囊


廣東海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文一端較粗,綠色,仍具有分裂能力,分裂速度較慢,分裂的細(xì)胞構(gòu)成幼配子體基部,一般在幼葉狀體時(shí)期開始后伸出假根絲,集結(jié)形成固著器。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),假根絲細(xì)胞具有全能性,可再發(fā)育成獨(dú)立葉狀體。謝恩義[29]等描述了游孢子發(fā)育過程中存在聚集現(xiàn)象,可形成多個(gè)葉片和假根,陳美琴[51]在研究江蘺早期發(fā)育時(shí)曾指出釋放附著的孢子密度較大時(shí),相互靠近的孢子容易聚集共同形成盤狀固著器,這與本研究觀察結(jié)果相似,這種現(xiàn)象有助于增加幼體對(duì)附著基質(zhì)的需求和固著強(qiáng)度,在進(jìn)行海區(qū)栽培時(shí)不易脫苗。

寬礁膜,配子體,早期發(fā)育,細(xì)胞苗


圖 2-2 寬礁膜配子體的早期發(fā)育(Ⅰ)A. 游孢子萌發(fā)(10×100 倍油鏡)1.游孢子固著第 1 d;2.固著第 2 d;3.固著第 3 d;4.固著第 4 d;5.固著第 5 d;B.葉狀體發(fā)育:6-8.單列絲狀體苗,分別為 2 細(xì)胞苗、4 細(xì)胞苗、7 細(xì)胞苗;9-11.多列細(xì)胞苗;12.幼配子體;C.假根細(xì)胞:13.基部細(xì)胞;14.完整假根細(xì)胞。Fig.2-2 The Development and Growth of M. latissimum’s Gametocytes(Ⅰ)A. Development of M. latissimum zoospores (10×100 times the oil mirror) 1. Attaching on the 1std; 2. Attaching on the2ndd; 3. Attaching on the 3rdd; 4. Attaching on the 4thd; 5. Attaching on the 5thd; B. Development of thaulls: 6-8.Single filamentous with 2 Cells germling, 4 cells germling, 7 cells germling; 9-11. Multiple filamentous germlings; 12.Young M. latissimum gametocyte; C. Rhizoid cells: 13. Basal cell; 14. Whole rhizoid cell

【相似文獻(xiàn)】

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