【摘要】：高密度培養(yǎng)研究是發(fā)酵劑制備過程中極其重要的一步,對發(fā)酵制品的工業(yè)化生產(chǎn)具有重要的理論和實(shí)際意義。本文以一株具有優(yōu)良發(fā)酵特性的LactococcuS lactis subsp.lactis BL19(IMAU11919)為研究對象,采用單因素篩選試驗(yàn)、復(fù)配試驗(yàn)和響應(yīng)面設(shè)計(jì),對其增菌培養(yǎng)基配方、靜態(tài)培養(yǎng)條件以及高密度發(fā)酵工藝進(jìn)行研究,得出如下結(jié)論:(1)以M17培養(yǎng)基為基礎(chǔ),L.1actis subsp.1actis BL19經(jīng)過碳源、氮源、碳氮總量及比例、緩沖鹽、微量元素和生長因子的篩選,得到L.lactis subsp.lactis BL19的最適培養(yǎng)基為:海藻糖5.10 g/L、蔗糖15.31 g/L、酵母蛋白胨14.79 g/L、酵母浸粉 44.38 g/L、磷酸二氫鉀 19.63 g/L、氫氧化鈉 4.04 g/L、MgSO4·7H200.20 g/L、VB2 0.50 g/L。(2)L.lactis subsp.lactis BL19的最佳靜態(tài)培養(yǎng)條件為:初始pH值7.7、接種量1%,30℃培養(yǎng)5-6 h達(dá)到最大菌體密度,活菌數(shù)可達(dá)(8.03±0.59)×109 CFU/mL,較優(yōu)化前提高了 2.67 倍(優(yōu)化前(3.00±0.51)×109 CFU/mL)。(3)利用篩選得到的最佳培養(yǎng)基配方進(jìn)行5L發(fā)酵罐的小試研究,得到最佳的高密度培養(yǎng)工藝為:恒pH值5.5、中和劑為質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%的NH3·H2O)。在發(fā)酵罐中菌體生長速度快、菌體密度顯著提高,活菌數(shù)可達(dá)(1.82±1.01)×1010CFU/mL,較高密度培養(yǎng)之前(3.00土0.51)×109 CFU/mL提高了 6.07倍,同時(shí)每升培養(yǎng)基節(jié)約成本68%。本研究通過對L.lactis subsp.lactis BL19進(jìn)行高密度培養(yǎng)研究,得到了其低成本、高活菌數(shù)的制備工藝,為L.lactissubsp.lactis BL19微生態(tài)制劑的工業(yè)化生產(chǎn)及應(yīng)用提供了理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：TS201.3
【圖文】：

Ｚ．邋／ａｃＯ邋ｓｕｂｓｐ．邋／ａｃｔｏ邋ＢＬ１９的活菌數(shù)均高于單一氮源；酵母浸粉與酵母配比為３：１時(shí)，Ｌ．邋／ａｃｔｏ邋ｓｕｂｓｐ．邋ＢＬ１９對兩種氮源的利用率最強(qiáng)，活４．４０±０．５６）邋ｘｌ0９ＣＦＵ／ｍＬ，較優(yōu)化前在Ｍ１７培養(yǎng)基中發(fā)酵提高了邋１．４８倍，酵母浸粉和酵母蛋白胨以３：１的復(fù)配方法作為氮源進(jìn)行下一步研究。逡逑３邋Ａ．邋／ａｃｔ７ｓ邋ｓｕｂｓｐ．邋／ａｃｔ／＇ｓ邋ＢＬ１９培養(yǎng)基碳氮總量及比例優(yōu)化逡逑碳源和氮源是微生物所需營養(yǎng)和能量的主要物質(zhì)來源，兩者的添加總量生物的生長有重要的影響？。有研究表明［８＇＿８２］，當(dāng)碳源物質(zhì)和氮源物質(zhì)會使菌體本身的生長繁殖旺盛，導(dǎo)致產(chǎn)生大量代謝廢物，從而抑制菌體造成菌體提前衰老自溶；當(dāng)碳源物質(zhì)和氦源物質(zhì)比例過高時(shí)，菌體的營用于合成積累代謝產(chǎn)物。逡逑在以上試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，對碳氮總量及比例進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化，選取的圍為１？１４％，選取的碳氮比例分別為１：１、１：２、１：３、２：１和３：１，試驗(yàn)結(jié)＾邋‘ＳＴ級比３：１—碳氮比２：１—＾碳Ｅ比—碳氮比丨：２￣？—碳氛比１：３逡逑

圖５不同微量元素對Ｚ＊．邋／l挘悖簦簀澹螅酰猓螅穡澹幔悖媯簀澹攏蹋保溝撓跋戾義希疲椋紓靛澹裕瑁邋澹澹媯媯澹悖翦澹錚駑澹洌椋媯媯澹潁澹睿翦澹簦穡澹簀澹幔睿溴澹悖錚睿悖澹睿簦潁幔簦椋錚鑠澹錚駑澹簦潁幔悖邋澹澹歟澹恚澹睿簦簀澹錚鑠澹紓潁錚麇澹錚駑澹蹋澹歟幔悖簦椋簀澹螅酰猓螅穡澹歟幔悖簦椋簀澹攏蹋保瑰義嫌賞跡悼芍�，分别添紮淹ｎ穴｀崜�(dān)齲玻啊ⅲ疲澹玻ǎ

本文編號：2802217