【摘要】：云南石梓(Gmelina arborefa)為馬鞭草科石梓屬的半落葉喬木。該種目前處于稀有狀態(tài),為國家二級保護植物,藥用和經(jīng)濟價值都很高。國內(nèi)外研究者曾報道過該植物的化學(xué)成分,至今還未見關(guān)于石梓屬植物內(nèi)生真菌的研究報道。本論文以云南石梓為研究對象,從其根、莖、葉中分離得到66株真菌。依據(jù)ITS序列相似性比對和系統(tǒng)發(fā)育分析,將菌株歸屬為擬莖點霉、毛霉、根毛霉、鐮刀菌、枝孢、木霉、毛殼菌、毛雙孢、曲霉、擬盤多毛孢、炭疽菌、黃絲曲霉和Amorocoelophoma這13個屬,其中擬莖點霉、鐮刀菌和毛霉為優(yōu)勢類群。在66株內(nèi)生真菌的化學(xué)篩選和抗菌活性篩選的基礎(chǔ)上,本論文優(yōu)選出菌株WB151開展進一步的分子鑒定和化學(xué)研究。通過多基因聯(lián)合分析構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,將菌株WB151鑒定為Amorosiaceae科Amorocoelophonma屬。該屬確立于2019年2月,目前還未見該屬真菌在次級代謝產(chǎn)物方面的研究報道。本文利用PDB培養(yǎng)基對菌株WB151進行發(fā)酵培養(yǎng),使用溶劑提取獲得粗提物。經(jīng)過多種柱色譜分離純化后獲得16個單體化合物。利用波譜學(xué)和光譜學(xué)分析,包括NMR、MS以及比旋光度,鑒定了化合物的結(jié)構(gòu),其中有3個為新化合物,分別命名為amorogenin A(1),amorogenin B(5),amorogenin C(7),新化合物1經(jīng)X-單晶衍射分析確定絕對構(gòu)型。其余13個已知化合物分別為massarigenin D(2),massarilactone E(3),massarilactone G(4),7-hydroxy-3,5-dimethyl-isochromen-l-one(6),enalin A(8),massariphenone(9),α-acetylorcinol(10),2,3-dihydroxy-4-methyl-benzaldehyde(11),3-hydroxy-4-methyl-benzaldehyde(12),3,5-dihydroxy-benzaldehyde(13),2,3-dihydroxy-6-methyl-benzoic acid(14),ergosterol(15),cerebroside B(16)。化合物11和14為新的天然產(chǎn)物,化合物12首次從微生物中分離得到。研究表明,菌株WB151次級代謝產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)類型主要包括內(nèi)酯類、異香豆素類和酚類化合物。新化合物1和已知化合物2-3擁有少見的2-氧雜螺[4,5]癸烷-1,7二酮骨架。新化合物5和已知化合物6為異香豆素,化合物7-14為酚類化合物�？咕钚詫嶒烇@示,化合物4對白色念珠菌和傷寒沙門氏菌有較強的抑制活性,初步推測在具有類似結(jié)構(gòu)的化合物1-4中,五元內(nèi)酯環(huán)的開環(huán)有可能會增強該系列化合物的抗菌活性。本論文首次開展了石梓屬植物內(nèi)生真菌及其抗菌活性的研究,并從其中一株內(nèi)生真菌Amorocoelophoma sp.WB151中獲得了3個新化合物、2個新天然產(chǎn)物和1個抗菌活性較好的化合物,為今后從云南石梓內(nèi)生真菌中發(fā)現(xiàn)種類更豐富的活性新物質(zhì)提供研究了一定的研究基礎(chǔ)。 【學(xué)位授予單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：Q949.32

【圖文】：

Ｆｉｇ邋２．１邋Ｎｕｍｂｅｒｓ邋ｏｆ邋ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ邋ｆｒｏｍ邋Ｇｍｅｌｉｎａ邋ａｒｂｏｒｅａ邋ｉｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｍｅｄｉｕｍ逡逑雖然總體上使用ＰＤＡ培養(yǎng)基分離得到的內(nèi)生真菌數(shù)量最多，但不同部位的內(nèi)逡逑生真菌對培養(yǎng)基的選擇還是有一定的差異性。如圖２．２所示，莖和葉中的內(nèi)生真菌逡逑在改良ＭＲＳ培養(yǎng)基中獲得的數(shù)量最多；而根皮中的內(nèi)生真菌則適合用ＷＡ培養(yǎng)基逡逑培養(yǎng)；根木質(zhì)部中的內(nèi)生真菌在ＰＤＡ培養(yǎng)基中生長得最好。莖和根木質(zhì)部中的內(nèi)逡逑生真菌在四種培養(yǎng)基上都能生長；利用改良ＭＲＳ培養(yǎng)基未從根皮中獲得內(nèi)生真菌；逡逑葉片在ＣＭＡ培養(yǎng)基中未培養(yǎng)出內(nèi)生真菌。逡逑莖邋Ｓｉｚｚ？逡逑■改良ＭＲＳ逡逑木邐ＣＭＡ逡逑葉邋ｉｚｚｓｉｉｒ？？？逡逑０邐５邐１０邐１５逡逑圖２．２不同培養(yǎng)基條件下云南石梓各部位分離得到內(nèi)生真菌的數(shù)量逡逑Ｆｉｇ邋２．２邋Ｎｕｍｂｅｒｓ邋ｏｆ邋ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ邋ｆｕｎｇｉ邋ｉｓｏｌａｔｅｄ邋ｆｒｏｍ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｐａｒｔｓ邋ｏｆ邋Ｇｍｅｌｉｎａ邋ａｒｂｏｒｅａ邋ｉｎ逡逑ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｍｅｄｉｕｍ逡逑１４逡逑

３．２不同植物部位內(nèi)生真菌的數(shù)量分布逡逑分離得到的６６株內(nèi)生真菌來源于云南石梓的根、葉和莖。其中，對根的分離逡逑又分為根皮和根木質(zhì)部兩個部位。從圖２．３所示的分離結(jié)果來看，根木質(zhì)部中分離逡逑得到的內(nèi)生真菌數(shù)量最多，有３０株，占總數(shù)的４６％；葉和莖次之，分別有１６和逡逑１２株，占總數(shù)的２４％和１８％：另外，還從根皮中分離得到８株，占總數(shù)的１２°／。。逡逑４６％邐￥邋■根木質(zhì)部逡逑２４0／0邐＾邐？逡逑圖２．３云南石梓不同部位內(nèi)生真菌的數(shù)量分布逡逑Ｆｉｇ邋２．３邋Ｎｕｍｂｅｒｓ邋ｏｆ邋ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ邋ｆｕｎｇｉ邋ｉｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｐａｒｔｓ邋ｏｆ邋Ｇｍｅｌｉｎａ邋ａｒｂｏｒｅａ逡逑通過對云南石梓不同部位內(nèi)生真菌的分離研宄，發(fā)現(xiàn)植物不同組織部位內(nèi)生逡逑真菌的種類和分離頻率各不相同，各部位分離頻率順序為．？根＞葉＞邋莖，而根部主逡逑要是木質(zhì)部分離得到的內(nèi)生真菌較多。逡逑３．３云南石梓內(nèi)生真菌的優(yōu)勢類群逡逑依據(jù)ｒｒｓ序列相似性比對和系統(tǒng)發(fā)育分析，所分離得到的菌株歸屬為擬莖點逡逑霉、毛霉、根毛霉、鐮刀菌、枝孢、木霉、毛殼菌、毛雙孢、曲霉、擬盤多毛孢、逡逑炭疽菌、黃絲曲霉和Ｊｗｏｒｏｃｏｅ／ｏｐ／ｊｏｗａ這１３個屬。內(nèi)生真菌的種類及分離部位的逡逑數(shù)量分布如表２．４所不，擬蓮點霉屬（／Ｖｚｏｍｏ／ｗｚ’５）、鐮刀屬（Ｆｗｓａｒ／ｗｗ）和毛霉屬逡逑為云南石梓內(nèi)生真菌的優(yōu)勢類群。其中擬莖點霉屬和毛霉屬是葉中的優(yōu)勢逡逑類群

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 王利勤;呂建國;張煥清;歐陽靖麗;張曉青;;云南石梓花揮發(fā)性成分分析[J];香料香精化妝品;2010年03期

2 郭良棟;內(nèi)生真菌研究進展[J];菌物系統(tǒng);2001年01期

3 張玲琪,谷，

本文編號：2712029