【摘要】：過氧亞硝酸根陰離子(ONOO-)是一種短壽命的內(nèi)源性活性物質(zhì),在許多生理和病理過程中起著重要作用。在這項(xiàng)工作中,我們合成了基于苯并噻唑衍生的花菁結(jié)構(gòu)的近紅外熒光探針Cy-SN,用于測(cè)定過氧亞硝酸根陰離子(ONOO-。設(shè)計(jì)的探針通過氧化裂解共軛的碳碳雙鍵與ONOO-特異性反應(yīng)并產(chǎn)生非熒光產(chǎn)物。同時(shí),與ONOO-反應(yīng)后,探針在630 nm處的特征吸收大大降低,伴隨著從亮藍(lán)色到綠色黃色的劇烈顏色變化,呈現(xiàn)出明顯的可視化特性。我們研究并證明了探針能夠以劑量反應(yīng)方式用于測(cè)量ONOCT并且具有低至26 nM的檢測(cè)限。此外,我們通過共聚焦熒光顯微鏡將探針Cy-SN應(yīng)用于活細(xì)胞中內(nèi)源性O(shè)NOO-的成像,其顯示出良好的細(xì)胞滲透性和低細(xì)胞毒性。探針Cy-SN用于外源ONOC-比色檢測(cè)和內(nèi)源熒光成像的成功應(yīng)用表明其在生物分析中具有巨大的應(yīng)用潛力。第一章,主要介紹了過氧亞硝酸根陰離子的性質(zhì),及其在細(xì)胞內(nèi)與其合成相關(guān)的一氧化氮和超氧陰離子自由基的性質(zhì),及其相互作用。分析檢測(cè)過氧亞硝酸根陰離子的方法,包括分光光度法、化學(xué)發(fā)光法、電子自旋共振法、電化學(xué)分析法和熒光光譜法。在熒光光譜法里介紹了用于檢測(cè)過氧亞硝酸根陰離子的有機(jī)熒光探針,包括熒光素類、羅丹明類、氟硼熒(BODIPY)類及花菁類等。第二章,我們?cè)O(shè)計(jì)合成了一種新型的基于花菁結(jié)構(gòu)Cy5并修飾有苯并噻唑基團(tuán)的有機(jī)分子熒光探針Cy-SN,在這不跟我們介紹了詳細(xì)和合成步驟并通過質(zhì)譜和核磁氫譜對(duì)其進(jìn)行表征。我們研究了該探針的光譜性質(zhì),不同pH條件下熒光探針Cy-SN的熒光強(qiáng)度及其對(duì)過氧亞硝酸根陰離子的響應(yīng)能力,熒光探針Cy-SN對(duì)不同濃度ONOO-的光譜檢測(cè),并得到該探針對(duì)ONOC-的檢測(cè)限為26 nM。除此之外,我們還探究了該探針Cy-SN對(duì)ONOC-的選擇性,及其檢測(cè)機(jī)理。最后,我們將該探針用于活細(xì)胞中內(nèi)源及外源性O(shè)NOC-的檢測(cè),并對(duì)其進(jìn)行熒光成像,該探針表現(xiàn)出低細(xì)胞毒性和良好的細(xì)胞成像性能。因此具有良好的應(yīng)用前景。
【圖文】：

華北電力大學(xué)碩士學(xué)位論文逡逑之一是它與二氧化碳（Ｃ0２）的反應(yīng)，與碳酸氫鹽（ｈｃｏ３ｏ平衡［２７］，同時(shí)形成‘ｎｏ２逡逑和Ｃ０３‘＿自由基（產(chǎn)率３５％），這兩種高度氧化的物質(zhì)，可以反過來導(dǎo)致生物分子逡逑的氧化損傷［２８］。需要考慮的一個(gè)重要方面是過氧亞硝酸陰離子可以作為水相中（如逡逑硫醇，金屬蛋白和二氧化碳）的氧化中間產(chǎn)物。非常重要的是，ＯＮＯＯＨ可以自由逡逑地透過膜發(fā)生反應(yīng)，并且二級(jí)自由基與疏水脂質(zhì)和蛋白質(zhì)反應(yīng)，如圖１－２所示［２９］。逡逑Ａ邐Ｒａｄｉｅａｆ邋ｒｅ？ｃｔ？？ｗ逡逑ｔｒｍｍ邋ｒｓｆｔａｔｉｃｒｓ逡逑

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本文編號(hào)：2697708