【摘要】：抗生素的長期濫用,使細(xì)菌的耐藥性不斷增強(qiáng),加劇了抗生素抗性基因的傳播和擴(kuò)散。研究表明,重金屬和抗生素存在協(xié)同選擇作用。在重金屬污染嚴(yán)重的區(qū)域,即使沒有抗生素的存在,也發(fā)現(xiàn)了抗生素抗性基因。硼作為一種在環(huán)境中廣泛分布的半金屬元素,其與抗生素是否存在協(xié)同選擇作用還未有相關(guān)報道。本實驗測定了 8株噬冷菌(Algoriphagus)的生長曲線,選取其中7株菌進(jìn)行了抗生素和硼的最小抑菌濃度測定。并對耐藥噬冷菌(Algoriphagus resistens NH1T),海洋噬冷菌(Algoriphagus marinus am2T),耐硼噬冷菌(Alboriphagus boritolerans JCM 118970T)是否存在硼和抗生素協(xié)同選擇進(jìn)行了研究,結(jié)果表明:硼為10mmol/L時,經(jīng)過30代的代際培養(yǎng),海洋噬冷菌、耐硼噬冷菌沒有硼與抗生素的抗性協(xié)同選擇,但耐藥噬冷菌對氧氟沙星的抗性與硼有明顯的協(xié)同選擇,硼脅迫后耐藥噬冷菌對氧氟沙星的最小抑菌濃度提高了4倍。耐藥噬冷菌代際培養(yǎng)后的轉(zhuǎn)錄組測序,篩選出351個差異基因(上調(diào)基因351個,下調(diào)基因237個),可能為耐藥噬冷菌對氧氟沙星脅迫的應(yīng)答基因；篩選出135個差異基因(其中上調(diào)基因48個,下調(diào)基因87個),可能為耐藥噬冷菌硼脅迫代際培養(yǎng)中的差異基因;篩選出115個差異基因(上調(diào)基因98個,下調(diào)基因1 7個),可能為耐藥噬冷菌對硼脅迫的應(yīng)答基因;篩選出10個可能與硼和抗生素協(xié)同選擇的基因,基因編號分別為AS141 RS04315、AS141 RS04360、AS141_RS04375、、AS141_RS04380、、AS141_RS11640、、AS141_RS11660、AS141 RS12925、、AS141 RS15695、、AS141 RS21740、、AS141 RS22360。本論文完成了三株新菌的多相分類。菌株N3T,分離自中國云南省的撫仙湖,革蘭氏陰性,無運動性,桿狀,紅色。異養(yǎng),兼性厭氧,氧化酶陽性,過氧化氫酶陰性。最適生長溫度30℃(生長范圍4-45℃),最適pH 7.0-8.0(生長范圍6.5-9.5)。基于16S rRNA基因序列的系統(tǒng)發(fā)育分析表明,菌株N3T與Algoriphagus aquaeductus的相似性為97.4%,Algoriphagus shivajiensis為 97.3%,Algoriphagus alkaliphilus為 97.2%。DNA G +C 含量為 43.9mol%,醌為 MK-7,主要脂肪酸是 iso-C15:o,summed feature 9(10-methyl C16:o and/or iso-C17:1ω9c),summed feature 3(C16:1ω6c)6c/C16:1ω7c)和iso-C16:0。主要極性脂為磷脂酰膽堿(PC),磷脂酰乙醇胺(PE),未鑒定的糖脂(GL),兩種未鑒定的磷脂(PL1,PL2),兩種未鑒定的氨基脂(AL1,AL2)和四種未鑒定的脂質(zhì)(L1,L2,L3,L4)。根據(jù)形態(tài)學(xué),生理學(xué)和分子學(xué)特性以及系統(tǒng)發(fā)育的特性,確認(rèn)菌株N3T為Algoriphag為 屬的新種,其名稱為Algoriphagus lacus sp.nov.。模式菌株是N3T(= KCTC 62622T= MCCC 1H00308T)。菌株F3105LT和B3213T分離自榮成海參池,均為革蘭氏陰性,桿狀,兼性厭氧菌。16S rRNA基因和系統(tǒng)發(fā)育分析表明,屬于Aliidiomarina屬。分別命名為快生別樣海源菌(Aliidiomarina celeris),模式菌株為F3105T(=MCCC 1H00223T=KCTC 52891T);海沉積物別樣海源菌(Aliidiomarina marininisedimenarium),模式菌株為B3213T(=MCCC 1H00321T= KCTC 62446T)。
【圖文】：

逡逑環(huán)境中的重金屬污染，在沒有抗生素的條件下，，也會誘導(dǎo)微生物產(chǎn)生抗生素逡逑抗性ｆ７，８］，這一現(xiàn)象被稱為抗生素和重金屬抗性的協(xié)同選擇［２９］（圖１－１）�？茖W(xué)家逡逑發(fā)現(xiàn)重金屬抗性和抗生素抗性有同時出現(xiàn)的趨勢［３］，土壤中多種抗生素抗性基因逡逑與重金屬含量有顯著正相關(guān)關(guān)系［３（）］，在微宇宙實驗條件下，病原菌逡逑聲／ｃａｒ在鎘誘導(dǎo)下產(chǎn)生了氨節(jié)西林抗性ｆ３１］。逡逑３逡逑

邐Ｔｉｍｅ邋（ｈ）逡逑圖２－１邋Ａ肢７Ｗ？ｃｏ／ｃｒＸＡＹ３２０９Ｔ的生長曲線邐圖２－２邋Ａ邐ａｍ２Ｔ的生長曲線逡逑Ｆｉｇ．２－１邋Ｇｒｏｗｔｈ邋ｃｕｒｖｅ邋ｏｆ邋Ａ．ｍａｒｉｎｃｏｌａ邋ＸＡＹ３２０９７邐Ｆｉｇ．２－２邋Ｇｒｏｗｔｈ邋ｃｕｒｖｅ邋ｏｆ邋Ａ．邋ｍａｒｉｎｕｓ邋ａｍ２Ｔ逡逑１２逡逑
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：Q93

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本文編號：2624102