發(fā)布時間：2020-10-12 18:51

　　 干旱脅迫是當前全球面對的重要環(huán)境問題之一,全世界土地面積中,約34%的區(qū)域處于干旱和半干旱狀態(tài),在中國這一比例接近50%,水分的缺乏直接影響作物產(chǎn)量的提升。所以改良和提高植物品種的抗旱性顯得更加迫切和重要,而植物抗旱機理的研究則是研究植物前提和基礎(chǔ)。黃麻,是重要的長纖維作物之一,麻紡工業(yè)的重要原料。因為麻類纖維植物的適應性強,不與糧、棉等主要農(nóng)作物爭地;并且纖維產(chǎn)量高、纖維品質(zhì)各具特色能夠適應多種用途的要求,所以其發(fā)展?jié)摿κ志薮�。本研究以篩選抗旱性不同的黃麻品種為前提,探討不同基因型黃麻在室內(nèi)模擬干旱脅迫條件下滲透調(diào)節(jié)、活性氧代謝的變化。通過對黃麻抗逆基因的研究,可為黃麻的育種提供基因資源和理論指導。主要研究結(jié)果如下:1.為篩選黃麻耐旱種質(zhì)資源,本研究選用146份黃麻品種為材料,采用盆栽進行干旱脅迫試驗,按照脅迫后葉子的萎蔫程度及復水后葉子的恢復情況進行比對,選出耐旱性較強黃麻品種11份、耐旱性較弱的黃麻種質(zhì)材料30份,為后續(xù)研究提供基礎(chǔ)。選取耐旱性較強品種IJO20號、179(1)及耐旱性較弱品種179(7)、和字4號作為后續(xù)滲透調(diào)節(jié)、活性氧代謝測定的實驗材料。2.使用PEG6000溶液模擬干旱脅迫,測定了 IJO20號、179(1)、179(7)、和字4號4個黃麻基因型葉片的相對含水量、脯氨酸、可溶性糖、丙二醛含量以及超氧物歧化酶、過氧化物酶、過氧化氫酶的活性以研究黃麻在干旱脅迫下滲透調(diào)節(jié)及活性氧代謝的變化。參試黃麻基因型旺長期處理葉片中可溶性糖、游離脯氨酸含量、過氧化物酶活性隨干旱脅迫時間的進行而增加,且耐旱性較強的品種變化幅度大;丙二醛含量隨脅迫進行而增加,耐旱性較弱的品種179(7)、和字4號的增加幅度較大;其中葉片相對含水量則降低,且耐旱性較弱的品種降低幅度大;超氧物歧化酶活性的變化趨勢則是先降低后升高;過氧化氫酶活力則是先上升后下降。3.SnRK2家族成員在應答植物抗逆脅迫中發(fā)揮作用,本研究中使用篩選出的耐旱性較強黃麻品種IJO20號作為實驗材料,使用同源克隆和RACE技術(shù),從黃麻中克隆出同源的SnRK2,CDS長1579bp,編碼350個氨基酸。推測編碼的蛋白質(zhì)的分子式為C3736H6248N1218O1572S217,相對分子量大約為31.6KD,預測pI值為5.48,半衰期約為100h,其不穩(wěn)定指數(shù)為39.09,屬穩(wěn)定性蛋白質(zhì),該蛋白含正電荷殘基(Arg+Lys)27個,負電荷殘基(Asp+Glu)37個,總平均疏水指數(shù)為-0.215,脂溶性指數(shù)為89.10,預測顯示該蛋白為脂溶性蛋白。利用熒光定量PCR分析黃麻在干旱脅迫下,隨著時間的變化,CcSnRK2基因表達量升高后又下降。說明CcSnRK2基因在黃麻面對干旱脅迫時發(fā)揮著一定的作用。
【學位單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2015
【中圖分類】：S563.4;S423
【部分圖文】：

（Ｆｕｊｉｔａ，?Ｙｏｓｈｉｄａ?ｃｔ?ａｌ．?２０１２）??圖１－２植物脫水脅迫反應巾調(diào)控ＡＢＲＥ介導的轉(zhuǎn)錄因子的ＡＲＥＢ／ＡＢＦ－ＳｎＲＫ２途徑??Ｆｉｇ?１?－２?Ｔｈｅ?ＡＲＥＢ／ＡＢＦ－ＳｎＲＫ２?ｐａｔｈｗａｙ?ｔｈａｔ?ｃｏｎｔｒｏｌｓ?ＡＢＲＥ－ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ??ｉｎ?ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ?ｓｔｒｅｓｓ?ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ?ｉｎ?ｐｌａｎｔｓ??最近的研究表明，在植物生理抗逆性ＳｎＲＫ２家族成員發(fā)揮重要作用，每個激酶的??對逆境脅迫的響應不同的模式：ＳｎＲＫ２可以被ＡＢＡ及干旱脅迫等逆境產(chǎn)生應答，??自身磷酸化調(diào)控活性，但是具體的調(diào)控機制并沒有被完全搞清楚。在檢測ＳｎＲＩＣ２??過程中發(fā)現(xiàn)其底物主要是堿性亮氨酸拉鏈（Ｂａｓｉｃ?ｌｅｕｃｉｎｅ?ｚｉｐｐｅｒ，ｂＺＩＰ）轉(zhuǎn)錄因子［９３］。??稻ＳＡＰＫ４基因轉(zhuǎn)入不耐鹽的品種中后，轉(zhuǎn)基因株系植株比野生型葉片無明顯改變??上述實驗表明ＳｎＲＫ２家族成員，是植物抗性密切相關(guān)，提高植物的抗逆性是ＳｎＲＫ２??的過度表達的主要原因［９５］。ＳｎＲＫ２成員，有些成員沒有激活ＡＢＡ誘導的應力信號。??綜合的研究結(jié)果，提出ＳｎＲＫ２的信號轉(zhuǎn)導通路可能包括的兩個過程，一是信號觸??放的內(nèi)源ＡＢＡ，?ＡＢＡ激活ＳｎＲＫ２，活化后的ＳｎＲＫ２可以進一步磷酸化下游ＡＲＥＢ??

電泳檢測后，采用生工ＤＮＡ純化回收試劑盒進行膠回收。??目的片段與克隆載體的連接：??將膠回收純化后的目的基因片段與克隆載體ＰＭＤ１９－Ｔ?（圖２－１）連接，體系如下??ＰＭＤ１９－Ｔ?０?單??Ｓｏｌｕｔｉｏｎ?Ｉ?５．０＾ｉＬ??目的基因?４．２ｊｉＬ??Ｔｏｔａｌ?ｖｏｌｕｍｅ?ｌＯｆｉＬ??混勻后低速離心，４°Ｃ保溫過夜。??１７??

．．ｇｔｃｇａｃｇａｔＴ?ａｔｃｔｃ？ａｇａ．．．??ｃａｇｅ?ｔ?ｇｃ?ｌａ?Ｔｔａｇａｇａｒｃｔ．．?（＾＇Ｃｌｏｎｉｎｇ?Ｓｌｔ＜??圖２－ｌｐＭＤ?１９－Ｔ載體圖譜??Ｆｉｇ．２－ｌ?Ｖｅｃｔｏｒ?ｍａｐ?ｏｆ?ｐＭＤ?１９－Ｔ??連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細胞：??１）
【參考文獻】

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本文編號：2838137