基于本實(shí)驗(yàn)室前期報(bào)道的丁香醇提取物（alcohol extract of clove,AEC）顯著抑制脂肪酸合成酶（FASN）表達(dá),能夠改善小鼠肥胖的研究結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探索了丁香醇提取物抑制FASN表達(dá)及肥胖的關(guān)鍵活性成分。結(jié)果主要如下:（1）初步發(fā)現(xiàn)丁香醇提取物中的齊墩果酸（oleanolic acid,OA）發(fā)揮了抑制FASN蛋白表達(dá)的作用。首先采用硅膠柱層析法初步分離丁香醇提取物得到7種組分,細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)以及蛋白免疫印跡法發(fā)現(xiàn)組分5和6具有抑制前列腺癌細(xì)胞（LNCaP）增殖及FASN蛋白表達(dá)的作用。合并兩個(gè)生物活性組分再一次進(jìn)行硅膠柱分離得到3種組分（A、B、C）,經(jīng)液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）分析發(fā)現(xiàn)含有91.36%齊墩果酸的組分B具有抑制LNCaP增殖及FASN蛋白表達(dá)的作用。（2）丁香醇提取物中的齊墩果酸發(fā)揮了抑制LNCaP細(xì)胞生長(zhǎng)、OP9細(xì)胞成脂分化,以及FASN蛋白表達(dá)的作用。細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)齊墩果酸顯著抑制LNCaP細(xì)胞生長(zhǎng)且具有劑量依賴(lài)性,其IC₅₀值約為40μM,共同添加棕櫚酸時(shí)細(xì)胞活力顯著恢復(fù)。蛋白免疫印跡法結(jié)果表明,40μM齊墩果酸、...

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

細(xì)胞培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞LNCaP培養(yǎng)于含有10%FBS的1640培養(yǎng)基，小鼠骨髓基質(zhì)養(yǎng)于含有20%FBS的MEM-α培養(yǎng)基，且培養(yǎng)基中均添加了100μg/mL青鏈設(shè)置為37°C、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞貼壁密度大于80%時(shí)即可于生物安全柜內(nèi)吸掉....

圖3-2丁香醇提物初步分離組分對(duì)LNCaP細(xì)胞增殖和FASN蛋白表達(dá)的影響Fig.3-2Effectsoffractionsafterfirst-separatedofthealcoholextractofcloveonFASNprote....

步分離組分對(duì)LNCaP細(xì)胞增殖和afterfirst-separatedofthealcoholexssionandproliferationofLNCaPcel：control-對(duì)照組，AEC-丁香醇提離再一次經(jīng)過(guò)硅膠柱分離，如圖、B、C，其中組分A....

本文編號(hào)：4011217