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果醋釀造用優(yōu)良醋酸菌的選育及其特性研究

發(fā)布時間:2024-05-13 06:34
  果醋在我國發(fā)展歷史悠久,多以各種水果為原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵成果酒后經(jīng)醋酸菌等微生物共同發(fā)酵獲得,其富含醋酸、黃酮等活性物質(zhì),可起到提高免疫力、抗氧化、降三高等保健作用。我國是果蔬生產(chǎn)大國,相比品種多樣的水果種類,我國在果蔬釀造工藝和釀造用優(yōu)良菌株開發(fā)等方面與歐美國家相比仍有差距。本文主要從果醋釀造用醋酸菌的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化、ARTP誘變醋酸菌的改良和南豐蜜桔果醋釀造四個方面進行研究。主要研究結(jié)果如下:以南豐蜜桔陳釀果醋為樣本,采用平板分離和定性篩選的方法,分離獲得優(yōu)勢菌株NF-171、NF-172。基于菌株形態(tài)和16S r DNA序列分析鑒定為巴氏醋桿菌屬(Acetobacter pasteurianus)。搖瓶發(fā)酵結(jié)果顯示,菌株A.pasteurianus NF-171、NF-172均可穩(wěn)定產(chǎn)醋酸,濃度可達(dá)36.13 g/L和33.63 g/L,且均可耐受42℃高溫和13%的乙醇。其中菌株A.pasteurianus NF-171對高溫的耐受比A.pasteurianus NF-172更優(yōu),在40℃發(fā)酵可產(chǎn)醋酸31.65 g/L;但是菌株A.pasteurianus NF-172對乙醇...

【文章頁數(shù)】:62 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2.1碳酸鈣平板篩選及顯微鏡結(jié)果

圖2.1碳酸鈣平板篩選及顯微鏡結(jié)果

在分離和富集過程中,培養(yǎng)24小時后觀察到有規(guī)則和不規(guī)則的凸起菌落,呈白色或灰白色,其中在碳酸鈣平板上溶解的鈣透明圈是篩選的基本特征,但是,由于某些產(chǎn)乳酸菌也具有相同的溶解碳酸鈣的特征,所以還需要用氯化鐵煮沸實驗、顯微形態(tài)觀察等方法,對菌株進行二次篩選。從自然發(fā)酵的南豐蜜桔陳釀果醋....


圖2.2菌株的PCR擴增圖

圖2.2菌株的PCR擴增圖

對挑選的6株可以產(chǎn)醋酸的菌株DNA提取,PCR擴增后序列分析結(jié)果如圖2.2、圖2.3所示。由圖2.2可知,對不同樣品中篩選出的可以產(chǎn)醋酸的6株菌進行DNA提取,PCR擴增后,1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測菌株純度顯示:電泳圖有清晰的條帶,且均只顯示一條帶,說明所示菌株的PCR擴增成功,....


圖2.3基于16SrDNA基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹。

圖2.3基于16SrDNA基因序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹。

由圖2.2可知,對不同樣品中篩選出的可以產(chǎn)醋酸的6株菌進行DNA提取,PCR擴增后,1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測菌株純度顯示:電泳圖有清晰的條帶,且均只顯示一條帶,說明所示菌株的PCR擴增成功,為純種菌株,沒有雜菌污染。且其片段堿基數(shù)與對照菌所示相同,大小約在1000-2000bp....


圖2.43株菌株的產(chǎn)酸曲線

圖2.43株菌株的產(chǎn)酸曲線

菌株生長曲線的測定,一般可分為三種方法,即測量總菌數(shù)的比濁法和干重法,測量活菌數(shù)的平板計數(shù)法。本實驗采用的是利用比濁法(OD600)測量發(fā)酵液中的總菌數(shù)。結(jié)果如圖2.4所示。采用0.05mol/L的NaOH滴定,測得發(fā)酵液中的醋酸含量,結(jié)果如圖2.4所示。從三株菌的產(chǎn)酸曲線可....



本文編號:3972526

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