慈姑(Sagittaria sagittifoliaL.)為澤瀉科(Alismataceae)慈姑屬多年生水生草本植物,其地下球莖為可食部位,亦稱茨菇。多糖是慈姑的主要活性成分之一,但關于慈姑多糖的研究甚少,嚴重阻礙了慈姑多糖資源的開發(fā)和應用�；诖�,本文利用超聲輔助提取慈姑粗多糖后,經分級醇沉、柱層析分離獲得慈姑均一多糖,并對其化學結構、鏈構象及其生物活性進行研究。通過本論文的研究可為慈姑多糖超聲-醇沉高效制備技術的研究奠定理論基礎和依據,開發(fā)高活性慈姑多糖健康產品以提高國民健康水平,具有重要的理論價值和現(xiàn)實意義。主要研究內容和結果如下:(1)慈姑多糖的超聲輔助提取工藝優(yōu)化在考察提取溫度、超聲時間、超聲功率和液料比四個因素的基礎上,利用響應面試驗優(yōu)化出慈姑多糖的最佳提取參數(shù)為:超聲功率120W、提取溫度85℃;提取時間15 min;液料比43 mL/g,該條件下慈姑多糖提取得率為34.78%,與常規(guī)熱水提取法相比,其提取得率提高了約168%。結果表明,超聲輔助提取能顯著提高慈姑多糖的提取效率,是適宜慈姑多糖提取的有效方法。(2)慈姑多糖的分級醇沉和活性的篩選將慈姑多糖粗提物進行初步分...

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 慈姑簡介
        1.1.1 慈姑的外觀及產地
        1.1.2 慈姑的營養(yǎng)成分
        1.1.3 慈姑的藥理作用
    1.2 慈姑多糖的研究進展
    1.3 植物多糖的研究概況
        1.3.1 植物多糖提取方法
        1.3.2 植物多糖分離和純化
        1.3.3 植物多糖純度和分子量測量
        1.3.4 植物多糖的結構鑒定
        1.3.5 植物多糖的生物活性研究
    1.4 本論文的研究意義和主要內容
        1.4.1 本課題的研究意義
        1.4.2 主要研究內容
    1.5 技術路線
第二章 慈姑多糖的超聲輔助提取工藝優(yōu)化
    引言
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗材料和試劑
        2.1.2 主要儀器和設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 慈姑原料的預處理及基本含量測定
        2.2.2 多糖含量的測定
        2.2.3 超聲輔助提取慈姑多糖的單因素實驗設計
        2.2.4 超聲輔助提取慈姑多糖的響應面分析實驗
        2.2.5 傳統(tǒng)熱水提取慈姑多糖
    2.3 結果與分析
        2.3.1 慈姑原料基本含量及葡萄糖標準曲線
        2.3.2 單因素實驗結果分析
        2.3.3 模型分析
        2.3.4 響應面分析
        2.3.5 預測模型的驗證和最佳條件的確定
        2.3.6 與傳統(tǒng)熱水提取方法的比較
    2.4 本章小結
第三章 慈姑多糖的分級醇沉和活性篩選
    引言
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗材料和試劑
        3.1.2 主要儀器和設備
    3.2 實驗方法
        3.2.1 慈姑多糖的分級醇沉
        3.2.2 SPUs的化學含量和得率測定
        3.2.3 單糖組成測定
        3.2.4 分子量測定
        3.2.5 紫外光譜測定
        3.2.6 紅外光譜測定
        3.2.7 DPPH·清除率的測定
        3.2.8 ABTS⁺·清除率的測定
        3.2.9 ·OH清除率的測定
        3.2.10 細胞的復蘇、傳代和凍存
        3.2.11 巨噬細胞增殖活性實驗
    3.3 結果與分析
        3.3.1 各化學成分的標準曲線
        3.3.2 SPUs的化學成分含量
        3.3.3 SPUs的單糖組成
        3.3.4 SPUs的分子量
        3.3.5 SPUs的特征骨架和官能團
        3.3.6 SPUs對DPPH·的清除能力
        3.3.7 SPUs對ABTS⁺·的清除能力
        3.3.8 SPUs對·OH的清除能力
        3.3.9 SPUs促進巨噬細胞增殖活性分析
        3.3.10 SPUs的結構與抗氧化活性的相關性分析
    3.4 本章小結
第四章 均一組分SPU70的制備及其結構表征
    引言
    4.1 實驗材料
        4.1.1 實驗材料和試劑
        4.1.2 主要儀器和設備
    4.2 實驗方法
        4.2.1 DEAE-52柱層析分離純化
        4.2.2 Sephadex G-50柱層析純化
        4.2.3 SPU70-W1多糖含量和得率的測定
        4.2.4 SPU70-W1的純度鑒定和相對分子量測定
        4.2.5 SPU70-W1的單糖組成
        4.2.6 部分酸水解
        4.2.7 高碘酸氧化
        4.2.8 Smith降解
        4.2.9 紫外光譜掃描
        4.2.10 紅外光譜測定
        4.2.11 剛果紅測定
        4.2.12 掃描電鏡觀測
        4.2.13 原子力顯微鏡觀測
        4.2.14 核磁共振分析
    4.3 結果與分析
        4.3.1 DEAE-52柱層析分離
        4.3.2 Sephadex G-50凝膠柱層析純化
        4.3.3 多糖均一性及分子量
        4.3.4 單糖組成
        4.3.5 主鏈和支鏈組成
        4.3.6 高碘酸氧化確定糖苷鍵類型
        4.3.7 Smith降解進一步確定糖苷鍵的類型
        4.3.8 多糖骨架及構型
        4.3.9 多糖鏈構象
        4.3.10 表面形貌
        4.3.11 形態(tài)和尺寸及力學特性
        4.3.12 糖單元的連接模式
    4.4 本章小結
第五章 SPU70-W1的免疫調節(jié)和抗腫瘤活性的初步研究
    引言
    5.1 實驗材料
        5.1.1 實驗材料和試劑
        5.1.2 主要儀器和設備
    5.2 實驗方法
        5.2.1 細胞的復蘇、傳代和凍存
        5.2.2 巨噬細胞細胞毒性實驗
        5.2.3 巨噬細胞吞噬中性紅能力實驗
        5.2.4 巨噬細胞釋放NO的測定
        5.2.5 Western-blot法檢測蛋白的表達
        5.2.6 SPU70-W1對肝癌細胞的體外抑制作用
    5.3 結果與分析
        5.3.1 SPU70-W1對巨噬細胞增殖活性的影響
        5.3.2 SPU70-W1對巨噬細胞吞噬中性紅能力的影響
        5.3.3 SPU70-W1對巨噬細胞釋放NO的影響
        5.3.4 SPU70-W1對巨噬細胞分泌炎癥因子的影響
        5.3.5 SPU70-W1對肝癌細胞的抗增殖作用
    5.4 本章小結
第六章 結論與展望
    6.1 結論
    6.2 創(chuàng)新點
    6.3 展望
參考文獻
致謝
在學期間發(fā)表的學術論文



本文編號：3950815