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慈姑多糖的制備、結(jié)構(gòu)表征及其生物活性研究

發(fā)布時(shí)間:2024-04-11 03:36
  慈姑(Sagittaria sagittifoliaL.)為澤瀉科(Alismataceae)慈姑屬多年生水生草本植物,其地下球莖為可食部位,亦稱(chēng)茨菇。多糖是慈姑的主要活性成分之一,但關(guān)于慈姑多糖的研究甚少,嚴(yán)重阻礙了慈姑多糖資源的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用;诖,本文利用超聲輔助提取慈姑粗多糖后,經(jīng)分級(jí)醇沉、柱層析分離獲得慈姑均一多糖,并對(duì)其化學(xué)結(jié)構(gòu)、鏈構(gòu)象及其生物活性進(jìn)行研究。通過(guò)本論文的研究可為慈姑多糖超聲-醇沉高效制備技術(shù)的研究奠定理論基礎(chǔ)和依據(jù),開(kāi)發(fā)高活性慈姑多糖健康產(chǎn)品以提高國(guó)民健康水平,具有重要的理論價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:(1)慈姑多糖的超聲輔助提取工藝優(yōu)化在考察提取溫度、超聲時(shí)間、超聲功率和液料比四個(gè)因素的基礎(chǔ)上,利用響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化出慈姑多糖的最佳提取參數(shù)為:超聲功率120W、提取溫度85℃;提取時(shí)間15 min;液料比43 mL/g,該條件下慈姑多糖提取得率為34.78%,與常規(guī)熱水提取法相比,其提取得率提高了約168%。結(jié)果表明,超聲輔助提取能顯著提高慈姑多糖的提取效率,是適宜慈姑多糖提取的有效方法。(2)慈姑多糖的分級(jí)醇沉和活性的篩選將慈姑多糖粗提物進(jìn)行初步分...

【文章頁(yè)數(shù)】:90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 慈姑簡(jiǎn)介
        1.1.1 慈姑的外觀及產(chǎn)地
        1.1.2 慈姑的營(yíng)養(yǎng)成分
        1.1.3 慈姑的藥理作用
    1.2 慈姑多糖的研究進(jìn)展
    1.3 植物多糖的研究概況
        1.3.1 植物多糖提取方法
        1.3.2 植物多糖分離和純化
        1.3.3 植物多糖純度和分子量測(cè)量
        1.3.4 植物多糖的結(jié)構(gòu)鑒定
        1.3.5 植物多糖的生物活性研究
    1.4 本論文的研究意義和主要內(nèi)容
        1.4.1 本課題的研究意義
        1.4.2 主要研究?jī)?nèi)容
    1.5 技術(shù)路線
第二章 慈姑多糖的超聲輔助提取工藝優(yōu)化
    引言
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        2.1.2 主要儀器和設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 慈姑原料的預(yù)處理及基本含量測(cè)定
        2.2.2 多糖含量的測(cè)定
        2.2.3 超聲輔助提取慈姑多糖的單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.2.4 超聲輔助提取慈姑多糖的響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 傳統(tǒng)熱水提取慈姑多糖
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 慈姑原料基本含量及葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3.2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
        2.3.3 模型分析
        2.3.4 響應(yīng)面分析
        2.3.5 預(yù)測(cè)模型的驗(yàn)證和最佳條件的確定
        2.3.6 與傳統(tǒng)熱水提取方法的比較
    2.4 本章小結(jié)
第三章 慈姑多糖的分級(jí)醇沉和活性篩選
    引言
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        3.1.2 主要儀器和設(shè)備
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 慈姑多糖的分級(jí)醇沉
        3.2.2 SPUs的化學(xué)含量和得率測(cè)定
        3.2.3 單糖組成測(cè)定
        3.2.4 分子量測(cè)定
        3.2.5 紫外光譜測(cè)定
        3.2.6 紅外光譜測(cè)定
        3.2.7 DPPH·清除率的測(cè)定
        3.2.8 ABTS+·清除率的測(cè)定
        3.2.9 ·OH清除率的測(cè)定
        3.2.10 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代和凍存
        3.2.11 巨噬細(xì)胞增殖活性實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 各化學(xué)成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.3.2 SPUs的化學(xué)成分含量
        3.3.3 SPUs的單糖組成
        3.3.4 SPUs的分子量
        3.3.5 SPUs的特征骨架和官能團(tuán)
        3.3.6 SPUs對(duì)DPPH·的清除能力
        3.3.7 SPUs對(duì)ABTS+·的清除能力
        3.3.8 SPUs對(duì)·OH的清除能力
        3.3.9 SPUs促進(jìn)巨噬細(xì)胞增殖活性分析
        3.3.10 SPUs的結(jié)構(gòu)與抗氧化活性的相關(guān)性分析
    3.4 本章小結(jié)
第四章 均一組分SPU70的制備及其結(jié)構(gòu)表征
    引言
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        4.1.2 主要儀器和設(shè)備
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 DEAE-52柱層析分離純化
        4.2.2 Sephadex G-50柱層析純化
        4.2.3 SPU70-W1多糖含量和得率的測(cè)定
        4.2.4 SPU70-W1的純度鑒定和相對(duì)分子量測(cè)定
        4.2.5 SPU70-W1的單糖組成
        4.2.6 部分酸水解
        4.2.7 高碘酸氧化
        4.2.8 Smith降解
        4.2.9 紫外光譜掃描
        4.2.10 紅外光譜測(cè)定
        4.2.11 剛果紅測(cè)定
        4.2.12 掃描電鏡觀測(cè)
        4.2.13 原子力顯微鏡觀測(cè)
        4.2.14 核磁共振分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 DEAE-52柱層析分離
        4.3.2 Sephadex G-50凝膠柱層析純化
        4.3.3 多糖均一性及分子量
        4.3.4 單糖組成
        4.3.5 主鏈和支鏈組成
        4.3.6 高碘酸氧化確定糖苷鍵類(lèi)型
        4.3.7 Smith降解進(jìn)一步確定糖苷鍵的類(lèi)型
        4.3.8 多糖骨架及構(gòu)型
        4.3.9 多糖鏈構(gòu)象
        4.3.10 表面形貌
        4.3.11 形態(tài)和尺寸及力學(xué)特性
        4.3.12 糖單元的連接模式
    4.4 本章小結(jié)
第五章 SPU70-W1的免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤活性的初步研究
    引言
    5.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        5.1.2 主要儀器和設(shè)備
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代和凍存
        5.2.2 巨噬細(xì)胞細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        5.2.3 巨噬細(xì)胞吞噬中性紅能力實(shí)驗(yàn)
        5.2.4 巨噬細(xì)胞釋放NO的測(cè)定
        5.2.5 Western-blot法檢測(cè)蛋白的表達(dá)
        5.2.6 SPU70-W1對(duì)肝癌細(xì)胞的體外抑制作用
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 SPU70-W1對(duì)巨噬細(xì)胞增殖活性的影響
        5.3.2 SPU70-W1對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬中性紅能力的影響
        5.3.3 SPU70-W1對(duì)巨噬細(xì)胞釋放NO的影響
        5.3.4 SPU70-W1對(duì)巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子的影響
        5.3.5 SPU70-W1對(duì)肝癌細(xì)胞的抗增殖作用
    5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3950815

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