發(fā)布時(shí)間：2023-10-22 12:29

　　青藏高原環(huán)境條件極端,具體表現(xiàn)為強(qiáng)紫外、低氧等,但在此極端條件下的發(fā)酵牦牛奶中確蘊(yùn)藏著豐富的乳酸菌資源。本試驗(yàn)材料來源于2012年和2013年在青藏高原祁連青東高山盆地針葉林、草原區(qū),羌塘高原湖盆高寒草原區(qū)、果洛那曲高原山地高寒灌叢草甸區(qū),藏南高山谷地灌叢草原區(qū)和藏東高山深谷針葉林區(qū)等5個(gè)生態(tài)地理區(qū)采集的牦牛酸奶樣品,共55個(gè)地區(qū),241份牦牛酸奶樣品中分離的乳酸菌。試驗(yàn)將2012年和2013年牦牛酸奶樣品中分離的乳酸菌進(jìn)行純化、16S rRNA基因序列測定,共鑒定乳酸菌1912株,建立了青藏高原發(fā)酵牦牛乳最大的乳酸菌種質(zhì)資源庫之一,并對青藏高原發(fā)酵牦牛乳中乳酸菌的多樣性及其抗氧化性能進(jìn)行了研究。本試驗(yàn)利用16S rRNA基因序列測定共鑒定乳酸菌1912株,隸屬于7個(gè)屬,28個(gè)種或亞種。其中乳桿菌屬(Lactobacillus)有1017株,占所分離菌株的53.19%;片球菌屬(Pediococcus)為617株,占比32.27%;腸球菌屬(Enterococcus)和明串珠菌屬(Leuconostoc)分別為244和27株,占比12.76%和1.41%;鏈球菌屬(Streptococ...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 青藏高原傳統(tǒng)發(fā)酵牦牛乳概述
    1.2 乳酸菌的多樣性
        1.2.1 乳酸菌概述和分類
        1.2.2 傳統(tǒng)發(fā)酵牦牛乳的微生物組成及多樣性
    1.3 乳酸菌的抗氧化作用
        1.3.1 自由基定義及危害
        1.3.2 天然抗氧化劑
        1.3.3 乳酸菌的抗氧化活性研究現(xiàn)狀
    1.4 立題背景與意義
    1.5 研究內(nèi)容
    1.6 技術(shù)路線
第二章 傳統(tǒng)發(fā)酵牦牛酸奶乳酸菌多樣性研究
    2.1 引言
    2.2 材料與儀器
        2.2.1 試驗(yàn)菌株
        2.2.2 主要儀器及試劑
        2.2.3 培養(yǎng)基
    2.3 試驗(yàn)方法
        2.3.1 乳酸菌菌種的純化與保存
        2.3.2 乳酸菌總DNA的提取
        2.3.3 乳酸菌16srRNA基因序列擴(kuò)增
        2.3.4 序列比對
        2.3.5 Species-specific PCR
        2.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析
    2.4 試驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 青藏高原傳統(tǒng)發(fā)酵牦牛乳中菌株的純化保存
        2.4.2 青藏高原傳統(tǒng)發(fā)酵牦牛乳中乳酸菌的多樣性
        2.4.3 不同生態(tài)區(qū)乳酸菌的多樣性分析(種水平)
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第三章 青藏高原牦牛酸奶中高抗氧化乳酸菌的篩選
    3.1 引言
    3.2 材料與儀器
        3.2.1 試驗(yàn)菌株
        3.2.2 主要儀器及試劑
        3.2.3 培養(yǎng)基及緩沖液
    3.3 試驗(yàn)方法
        3.3.1 乳酸菌H₂O₂耐受能力的測定
        3.3.2 乳酸菌菌體細(xì)胞、無細(xì)胞提取物和發(fā)酵上清液的制備
        3.3.3 乳酸菌DPPH自由基清除能力的測定
        3.3.4 乳酸菌OH自由基清除能力的測定
        3.3.5 乳酸菌O2
-清除能力的測定
        3.3.6 乳酸菌還原能力的測定
        3.3.7 乳酸菌總抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定
        3.3.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析
    3.4 試驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 乳酸菌H₂O₂耐受能力的測定
        3.4.2 乳酸菌DPPH自由基清除能力的測定
        3.4.3 乳酸菌OH自由基清除能力的測定
        3.4.4 乳酸菌對O2
-清除能力的測定
        3.4.5 乳酸菌還原能力的測定
        3.4.6 乳酸菌發(fā)酵上清液總抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定
    3.5 討論
    3.6 本章小結(jié)
第四章 高抗氧化特性乳酸菌體外益生特性的研究
    4.1 引言
    4.2 材料與儀器
        4.2.1 試驗(yàn)菌株
        4.2.2 主要儀器及試劑
        4.2.3 培養(yǎng)基及緩沖液
    4.3 試驗(yàn)方法
        4.3.1 耐酸性試驗(yàn)
        4.3.2 疏水性試驗(yàn)
        4.3.3 耐膽鹽試驗(yàn)
        4.3.4 模擬胃液試驗(yàn)
        4.3.5 模擬腸液試驗(yàn)
        4.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析
    4.4 試驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 耐酸性試驗(yàn)結(jié)果
        4.4.2 疏水性試驗(yàn)結(jié)果
        4.4.3 耐膽鹽試驗(yàn)結(jié)果
        4.4.4 模擬胃液試驗(yàn)結(jié)果
        4.4.5 模擬腸液試驗(yàn)結(jié)果
    4.5 討論
    4.6 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：3856520

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