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藻紅蛋白的新分析特性研究及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2023-03-04 12:04
  藻紅蛋白(R-phycoerythrin,R-PE)是一種從海藻中提取出來的天然、無毒、穩(wěn)定、水溶性的捕光色素蛋白。R-PE具有保守、相對(duì)穩(wěn)定的結(jié)構(gòu);具有明亮的光致發(fā)光、良好的生物相容性和較高的pH穩(wěn)定性;具有高吸光系數(shù)、高熒光量子產(chǎn)率、大的斯托克斯位移等優(yōu)良的光學(xué)性能。這些優(yōu)異的性能使R-PE在生物分析和生物醫(yī)學(xué)中作為模型蛋白和熒光標(biāo)記方面具有廣闊的應(yīng)用前景。R-PE與脫氧核糖核酸(DNA)之間具有與生俱來的親和力,它可以通過非共價(jià)靜電相互作用、氫鍵和疏水相互作用與DNA進(jìn)行非特異性結(jié)合,因此,探索R-PE與DNA之間的非共價(jià)相互作用,將有助于拓展R-PE作為DNA傳感分析工具的應(yīng)用。然而,據(jù)我們所知,R-PE-DNA的非共價(jià)相互作用至今鮮有報(bào)道。除此以外,R-PE表面含有豐富的氨基酸殘基,有研究表明,醫(yī)用消毒劑中的主要成分鄰苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)與氨基在一定條件下可以發(fā)生衍生化反應(yīng),衍生產(chǎn)物的熒光強(qiáng)弱變化可以反映OPA濃度的大小。由此,基于R-PE優(yōu)良的光學(xué)性質(zhì)以及表面含有豐富氨基酸殘基的雙重特性,本論文構(gòu)建了一種新型的用于OPA檢測(cè)的比率型熒光探針。...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 藻紅蛋白的概述
        1.2.1 藻紅蛋白的分類
        1.2.2 R-藻紅蛋白的空間結(jié)構(gòu)
        1.2.3 R-藻紅蛋白的色素分子和能量傳遞
        1.2.4 R-藻紅蛋白的理化及光譜特性
    1.3 藻紅蛋白的應(yīng)用
        1.3.1 在食品、化妝品等工業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.3.2 在醫(yī)學(xué)保健領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.3.3 在腫瘤光動(dòng)力學(xué)治療方面的應(yīng)用
        1.3.4 作為熒光探針的應(yīng)用
        1.3.5 在能量傳遞方面的應(yīng)用
    1.4 本論文的選題意義及主要研究內(nèi)容
第二章 基于陽離子聚合物介導(dǎo)的R-藻紅蛋白與DNA非共價(jià)相互作用的DNA傳感器的構(gòu)建及應(yīng)用
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        2.2.2 R-PE溶液的制備
        2.2.3 R-PE的表征
        2.2.4 DNA傳感器的條件優(yōu)化
        2.2.5 陽離子聚合物PDADMAC的介導(dǎo)
        2.2.6 熒光壽命分析
        2.2.7 DNA靶目標(biāo)的檢測(cè)
        2.2.8 實(shí)際樣品的檢測(cè)
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        2.3.2 R-PE的表征結(jié)果分析
        2.3.3 DNA傳感器的可行性分析
        2.3.4 傳感器的最優(yōu)條件選擇
        2.3.5 PDADMAC的介導(dǎo)結(jié)果分析
        2.3.6 反應(yīng)機(jī)理的驗(yàn)證與分析
        2.3.7 靶目標(biāo)的檢測(cè)及靈敏度
        2.3.8 DNA傳感器的選擇性
        2.3.9 實(shí)際樣品的檢測(cè)結(jié)果
    2.4 本章小結(jié)
第三章 R-藻紅蛋白與鄰苯二甲醛衍生法比率型熒光探針的構(gòu)建及應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        3.2.2 溶液的配制
        3.2.3 紫外-可見吸收光譜
        3.2.4 熒光光譜
        3.2.5 探針的條件優(yōu)化
        3.2.6 選擇性實(shí)驗(yàn)
        3.2.7 實(shí)際樣品的檢測(cè)
        3.2.8 比色檢測(cè)
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        3.3.2 紫外-可見吸收光譜分析
        3.3.3 探針與OPA反應(yīng)的激發(fā)與發(fā)射光譜分析
        3.3.4 探針的最優(yōu)條件選擇
        3.3.5 反應(yīng)動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
        3.3.6 探針的靈敏度分析
        3.3.7 探針的選擇性分析
        3.3.8 實(shí)際樣品的檢測(cè)
        3.3.9 比色型探針的實(shí)用意義
    3.4 本章小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào):3754259

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