黃酒歷史文化悠久,是世界三大發(fā)酵酒之一,其風(fēng)味獨特、酒精度低且營養(yǎng)價值高,廣受消費者喜愛。黃酒發(fā)酵過程中的微生物群落由麥曲含有的微生物與酒藥中的酵母菌組成,經(jīng)多菌種協(xié)調(diào)發(fā)酵,使得黃酒微生物群落結(jié)構(gòu)與風(fēng)味物質(zhì)組成復(fù)雜。黃酒酵母主導(dǎo)乙醇發(fā)酵且代謝產(chǎn)生多種風(fēng)味物質(zhì),但黃酒酵母對發(fā)酵微生物群落影響尚不清楚,酵母菌種變化對基因功能、風(fēng)味物質(zhì)的影響有待研究。本課題利用宏基因組方法,研究黃酒酵母菌株對黃酒發(fā)酵微生物組成與黃酒風(fēng)味物質(zhì)的影響,主要研究內(nèi)容如下:（1）優(yōu)化了針對擁有復(fù)雜體系的麥曲與黃酒發(fā)酵液中微生物總DNA的提取方法,最終發(fā)現(xiàn)改進(jìn)后的SDS-CTAB法提高了總DNA提取效率,減少了體系中非微生物成分干擾,對后續(xù)黃酒發(fā)酵微生物的高通量測序提供了良好基礎(chǔ)。（2）基于真菌內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS1）與細(xì)菌的16S rRNA基因擴(kuò)增子高通量測序分析（Amplicon sequencing）,在三株黃酒酵母菌株（YJSH1,N85,XZ11）各自作用下,黃酒發(fā)酵過程中真菌變化趨勢相同,糖化發(fā)酵階段真菌主要來自麥曲中的Aspergillus,發(fā)酵中后期Saccharomyces成為優(yōu)勢真菌。細(xì)菌種類繁多... 

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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第1章 緒論
    1.1 黃酒的簡介
    1.2 黃酒微生物群落的研究進(jìn)展
        1.2.1 麥曲中微生物群落研究進(jìn)展
        1.2.2 黃酒發(fā)酵過程中微生物群落的研究進(jìn)展
        1.2.3 黃酒微生物群落的研究方法
    1.3 黃酒風(fēng)味物質(zhì)的研究
    1.4 課題的研究意義與主要內(nèi)容
        1.4.1 本課題的研究意義和創(chuàng)新點
        1.4.2 本課題的主要內(nèi)容
第2章 黃酒麥曲總DNA的提取方法優(yōu)化
    2.1 材料與儀器
        2.1.1 材料
        2.1.2 儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 樣品預(yù)處理
        2.2.2 總DNA的提取方法與純化
        2.2.3 總DNA提取質(zhì)量的檢測
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 總DNA提取方法的電泳結(jié)果比較
        2.3.2 總DNA提取方法的DNA濃度與純度比較
        2.3.3 總DNA提取方法的PCR結(jié)果比較比較
        2.3.4 總DNA提取方法的測序結(jié)果比較
        2.3.5 細(xì)菌與真菌Alpha多樣性
        2.3.6 不同方法提取麥曲DNA的菌群結(jié)構(gòu)
    2.4 本章小結(jié)
第3章 黃酒發(fā)酵過程中微生物群落結(jié)構(gòu)組成與代謝變化
    3.1 材料與儀器
    3.2 黃酒發(fā)酵與總DNA提取
        3.2.1 黃酒的釀造與取樣
        3.2.2 黃酒發(fā)酵過程中微生物總DNA的提取
    3.3 黃酒細(xì)菌16S rRNA基因和真菌ITS1擴(kuò)增分析
        3.3.1 PCR擴(kuò)增
        3.3.2 Illumina Miseq測序與分析
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 黃酒發(fā)酵過程中總DNA的提取結(jié)果
        3.4.2 黃酒發(fā)酵過程中細(xì)菌的菌群結(jié)構(gòu)與動態(tài)變化
            3.4.2.1 基于細(xì)菌門水平的菌群結(jié)構(gòu)與動態(tài)變化
            3.4.2.2 基于細(xì)菌屬水平的菌群結(jié)構(gòu)與動態(tài)變化
        3.4.3 真菌的菌群結(jié)構(gòu)與動態(tài)變化
        3.4.4 細(xì)菌與真菌菌群間差異比較
        3.4.5 KEGG代謝通路分析
    3.5 本章小結(jié)
第4章 黃酒酵母菌株對黃酒的風(fēng)味物質(zhì)的影響
    4.1 材料與儀器
        4.1.1 樣品采集
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 黃酒中基本理化指標(biāo)的測定
        4.2.2 黃酒中揮發(fā)性物質(zhì)的測定
        4.2.3 黃酒中有機酸的測定
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 黃酒中酒精度、總酸與總糖的測定結(jié)果
        4.3.2 黃酒中揮發(fā)性物質(zhì)的測定結(jié)果
        4.3.3 黃酒中有機酸的測定結(jié)果
    4.4 本章小結(jié)
第5章 宏基因組測序探究不同黃酒中微生物組成與基因功能
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料與儀器
        5.1.2 宏基因組測序與數(shù)據(jù)分析方法
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 宏基因組測序數(shù)據(jù)概括
        5.2.2 不同種類黃酒中細(xì)菌與真菌結(jié)構(gòu)組成分析
            5.2.2.1 微生物菌群組成結(jié)構(gòu)
            5.2.2.2 微生物在種水平差異比較
        5.2.3 微生物基因功能分析
            5.2.3.1 EggNOG數(shù)據(jù)庫功能注釋
            5.2.3.2 CAZy數(shù)據(jù)庫功能注釋
            5.2.3.3 KEGG數(shù)據(jù)庫后功能注釋
    5.3 本章小結(jié)
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3730925