近些年來,絲綢的起源和傳播得到了越來越多的研究學(xué)者關(guān)注,然而這一直是考古學(xué)界的一個未解之謎。蠶絲在種類上可以分為桑蠶絲、柞蠶絲、蓖麻蠶絲和栗蠶絲等,不同種類的蠶絲具有不同的結(jié)構(gòu)和性能,以不同蠶絲為原料經(jīng)過一系列工藝流程得到的絲綢樣品也具有不同的形貌和結(jié)構(gòu),分析不同蠶絲種屬以及不同文物樣種屬鑒定對研究絲綢的起源和傳播具有重要意義。本論文通過采用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法分析現(xiàn)代蠶絲樣品,獲得不同種屬蠶絲的標志性蛋白,建立基于蛋白質(zhì)組學(xué)分析蠶絲種屬鑒定的方法;通過分析不同蠶絲的氨基酸序列,選取特征肽段作為半抗原,偶聯(lián)載體蛋白以獲得具有免疫原性的完全抗原,通過動物免疫的方法制備抗體,建立基于免疫學(xué)原理的蠶絲種屬鑒定方法;在此基礎(chǔ)上繼續(xù)分析老化樣品,從免疫學(xué)的角度研究樣品老化機理,為古代絲綢鑒定的研究提供理論基礎(chǔ)。首先,采用銅乙二胺溶液提取不同蠶絲中的絲素蛋白,使用溶液內(nèi)酶切的方法將蛋白酶解,利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分析酶解之后的蛋白質(zhì),獲得不同種屬蠶絲的標志性蛋白。桑蠶絲標志性蛋白:編碼為P05790和P21828的蛋白;柞蠶絲標志性蛋白:編碼為O76786的蛋白;蓖麻蠶絲的標志性蛋白:編碼為A0A... 

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 絲綢文物概況
    1.3 絲綢類文物鑒定方法
    1.4 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)介紹
        1.4.1 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)簡介
        1.4.2 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的應(yīng)用
    1.5 免疫學(xué)檢測技術(shù)介紹
        1.5.1 免疫學(xué)技術(shù)簡介
        1.5.2 免疫學(xué)技術(shù)的應(yīng)用
    1.6 課題的提出和意義
    1.7 研究技術(shù)路線、難點與創(chuàng)新點
        1.7.1 研究技術(shù)路線
        1.7.2 技術(shù)難點
        1.7.3 技術(shù)創(chuàng)新點
第二章 基于蛋白質(zhì)組學(xué)方法的絲綢文物分析鑒定研究
    2.1 實驗試劑及儀器
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗儀器
    2.2 實驗材料
        2.2.1 文物樣品
        2.2.2 溶液的配制
        2.2.3 實驗材料的制備
    2.3 實驗步驟
        2.3.1 樣品的處理
        2.3.2 LC-MS/MS 質(zhì)譜分析
        2.3.3 數(shù)據(jù)庫檢索分析
    2.4 實驗材料表征及測試
        2.4.1 表觀形貌的表征
        2.4.2 化學(xué)結(jié)構(gòu)的表征
    2.5 結(jié)果與討論
        2.5.1 表觀形貌結(jié)果分析
        2.5.2 化學(xué)結(jié)構(gòu)結(jié)果分析
        2.5.3 LC-MS/MS 結(jié)果分析
        2.5.4 蠶絲標志性蛋白的選擇
        2.5.5 絲綢文物樣的種屬鑒定
    2.6 本章小結(jié)
第三章 基于免疫學(xué)方法的絲綢文物分析鑒定研究
    3.1 實驗試劑與儀器
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 實驗儀器
    3.2 實驗材料
        3.2.1 樣品的介紹
        3.2.2 溶液的配制
        3.2.3 實驗材料的制備
    3.3 實驗步驟
        3.3.1 抗原的制備
        3.3.2 抗體的制備
        3.3.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和免疫印跡測試
        3.3.4 酶聯(lián)免疫測試
    3.4 實驗材料表征及測試
        3.4.1 聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)電泳
        3.4.2 抗體特異性檢測
    3.5 結(jié)果討論與分析
        3.5.1 SDS-PAGE 電泳結(jié)果
        3.5.2 抗體的特異性檢測
        3.5.3 酶聯(lián)免疫檢測結(jié)果
            3.5.3.1 間接酶聯(lián)免疫對抗體最佳稀釋倍數(shù)的選擇
            3.5.3.2 間接酶聯(lián)免疫對絲素蛋白的交叉鑒定
            3.5.3.3 間接酶聯(lián)免疫對文物樣品的種屬鑒定
    3.6 本章小結(jié)
第四章 基于免疫學(xué)方法的蠶絲老化分析鑒定研究
    4.1 實驗試劑及儀器
        4.1.1 實驗試劑
        4.1.2 實驗儀器
    4.2 實驗材料
        4.2.2 溶液的配制
        4.2.3 實驗材料的制備
    4.3 實驗步驟
        4.3.1 樣品的制備
        4.3.2 抗原的制備
        4.3.3 抗體的制備
        4.3.4 間接酶聯(lián)免疫測試步驟
        4.3.5 聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和免疫印跡檢測步驟
    4.4 實驗材料表征及測試
        4.4.1 化學(xué)結(jié)構(gòu)表征
        4.4.2 氨基酸分析
        4.4.3 分子量表征
    4.5 結(jié)果討論與分析
        4.5.1 化學(xué)結(jié)構(gòu)分析
        4.5.2 氨基酸分析
        4.5.3 分子量變化分析
        4.5.4 間接酶聯(lián)免疫檢測結(jié)果分析
            4.5.4.1 抗原抗體最佳結(jié)合條件的選擇
            4.5.4.2 間接ELISA檢測結(jié)果
        4.5.5 免疫印跡檢測結(jié)果分析
    4.6 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
附：攻讀碩士期間取得與學(xué)位論文直接相關(guān)的成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3727238