基于群體感應(yīng)系統(tǒng)分析殺鮭氣單胞菌與熒光假單胞菌的共培養(yǎng)研究
發(fā)布時間:2022-12-11 15:34
水產(chǎn)品腐敗是一個相對復(fù)雜的過程,而微生物的生長代謝被認(rèn)為是導(dǎo)致水產(chǎn)品發(fā)生腐敗變質(zhì)的重要因素。研究表明,大多數(shù)水產(chǎn)品致腐菌通過分泌N-;呓z氨酸內(nèi)酯類(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)信號分子參與致腐因子的表達(dá),該過程受群體感應(yīng)系統(tǒng)的調(diào)控。因此,基于群體感應(yīng)系統(tǒng)探究水產(chǎn)品腐敗菌的致腐機(jī)制及靶向調(diào)控為水產(chǎn)品保鮮提供了新策略。目前相關(guān)方面的基礎(chǔ)研究也在逐漸增多,但相對來說更注重于菌株分離、致腐因子調(diào)控及抑制劑開發(fā)等方面,對于菌群間相互作用及種間群體感應(yīng)的研究較少。因此,本文以水產(chǎn)品致腐菌殺鮭氣單胞菌和熒光假單胞菌為主要研究對象,基于群體感應(yīng)系統(tǒng)分析共培養(yǎng)條件下兩菌株間的相互作用,同時對單菌及共培養(yǎng)時菌株的揮發(fā)性有機(jī)化合物進(jìn)行了測定。主要結(jié)論如下:1.首先從冷藏腐敗海鱸魚中分離得到殺鮭氣單胞菌CS12,采用生物報告菌法及GC-MS檢測可知CS12具有群體感應(yīng)現(xiàn)象,主要分泌C6-HSL;對殺鮭氣單胞菌CS12與水產(chǎn)品其它致腐菌間的相互作用進(jìn)行了分析,結(jié)果表明共存體系中菌密度和產(chǎn)AHLs能力均受到抑制,AHLs的分泌存在密度依賴,熒光假單胞菌...
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 細(xì)菌群體感應(yīng)
1.2 細(xì)菌群體感應(yīng)與水產(chǎn)品腐敗
1.2.1 微生物與水產(chǎn)品腐敗變質(zhì)
1.2.2 水產(chǎn)品腐敗菌群體感應(yīng)研究進(jìn)展
1.2.2.1 殺鮭氣單胞菌與群體感應(yīng)
1.2.2.2 熒光假單胞菌與群體感應(yīng)
1.3 細(xì)菌種間相互作用
1.3.1 微生物共培養(yǎng)
1.3.2 種間群體感應(yīng)
1.4 細(xì)菌揮發(fā)性有機(jī)化合物
1.5 研究目的意義及主要內(nèi)容
1.5.1 研究目的意義
1.5.2 研究內(nèi)容
第二章 海鱸魚源殺鮭氣單胞菌CS12的群體感應(yīng)現(xiàn)象及與水產(chǎn)優(yōu)勢腐敗菌的共培養(yǎng)研究
2.1 前言
2.2 主要材料與儀器
2.2.1 材料、菌株及培養(yǎng)條件
2.2.2 主要試劑
2.2.3 主要儀器
2.3 方法
2.3.1 細(xì)菌分離、鑒定
2.3.2 生物報告菌法檢測AHLs活性
2.3.3 GC-MS定性檢測AHLs種類
2.3.4 單菌和共培養(yǎng)菌株生長情況及產(chǎn)信號分子能力檢測
2.3.5 數(shù)據(jù)分析
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 16SrRNA檢測與系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
2.4.2 菌株CS12的AHLs活性檢測
2.4.2.1 生物報告菌法檢測
2.4.2.2 GC-MS檢測
2.4.3 單菌及共培養(yǎng)生長情況及產(chǎn)AHLs能力測定
2.5 小結(jié)
第三章 共存體系中殺鮭氣單胞菌CS12 與熒光假單胞菌PF03 的相互作用研究
3.1 前言
3.2 主要材料與儀器
3.2.1 菌株及培養(yǎng)條件
3.2.2 主要試劑
3.2.3 主要儀器
3.3 方法
3.3.1 菌株活化培養(yǎng)
3.3.2 生長動力學(xué)曲線及pH測定
3.3.3 單菌及共培養(yǎng)BS和 CFS中 AHLs分泌情況
3.3.4 不同接種比例共培養(yǎng)菌株的生長、群集、泳動及AHLs活性檢測
3.3.5 單菌及共培養(yǎng)菌株的電子鼻測定
3.3.6 數(shù)據(jù)分析
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 生長動力學(xué)曲線測定及生化鑒定
3.4.2 菌株P(guān)F03 及共培養(yǎng)菌株BS、CFS中 AHLs活性驗證
3.4.3 單菌及共培養(yǎng)菌株的生長情況及運動活性分析
3.4.4 單菌及共培養(yǎng)菌株AHLs分泌情況
3.4.5 單菌及共培養(yǎng)菌株揮發(fā)性氣味分析
3.5 小結(jié)
第四章 熒光假單胞菌CFS及乙酸乙酯粗提液對殺鮭氣單胞菌CS12 的抑制作用研究
4.1 前言
4.2 主要材料與儀器
4.2.1 菌株及培養(yǎng)條件
4.2.2 主要試劑
4.2.3 主要儀器
4.3 方法
4.3.1 PF03-CFS及粗提液中AHLs活性檢測
4.3.2 PF03-CFS及粗提液對CS12 生長情況的影響
4.3.3 PF03 乙酸乙酯粗提液的抑菌活性檢測
4.3.4 PF03 及共培養(yǎng)乙酸乙酯粗提液對CS12 的抑菌作用
4.3.5 數(shù)據(jù)分析
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 PF03的CFS及粗提液中AHLs活性檢測
4.4.2 PF03的CFS及乙酸乙酯粗提液對CS12 生長情況的影響
4.4.3 PF03 乙酸乙酯粗提液的抑菌性分析
4.4.4 PF03 及共培養(yǎng)乙酸乙酯粗提液對CS12 的抑菌性分析
4.5 小結(jié)
第五章 頂空-固相微萃取技術(shù)分析熒光假單胞菌與殺鮭氣單胞菌共培養(yǎng)揮發(fā)性成分研究
5.1 前言
5.2 主要材料與儀器
5.2.1 菌株及培養(yǎng)條件
5.2.2 主要試劑與儀器
5.3 方法
5.3.1 電子鼻測定
5.3.2 HS-SPME-GC-MS分析細(xì)菌VOCs
5.3.2.1 待測樣品的制備
5.3.2.2 頂空揮發(fā)性成分的萃取
5.3.2.3 GC-MS聯(lián)用條件
5.3.3 數(shù)據(jù)分析
5.4 結(jié)果與討論
5.4.1 電子鼻檢測結(jié)果分析
5.4.2 單菌及共培養(yǎng)菌株揮發(fā)性成分分析
5.4.3 PF03 乙酸乙酯粗提液對菌株CS12 揮發(fā)性成分的影響
5.5 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論、創(chuàng)新點和展望
6.1 結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點
6.3 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表論文情況
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]吲哚——種間及跨界信號分子新成員[J]. 曲媛媛,戴春曉,張旭旺,馬橋. 生物工程學(xué)報. 2019(11)
[2]綠原酸對熒光假單胞菌群體感應(yīng)現(xiàn)象及其腐敗特性的抑制作用[J]. 王虹懿,吳海虹,張新笑,劉芳,孫芝蘭,諸永志,王道營,徐為民,彭景. 食品工業(yè)科技. 2020(07)
[3]大鯢源殺鮭氣單胞菌的分離鑒定及藥敏試驗[J]. 鄭松坤,高書偉,李聲平,陳夢飛,王俊維,牛樹輝,李中軍,高小蟬. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2019(11)
[4]新型氰化物中毒解毒劑二甲基三硫研究進(jìn)展[J]. 陳旭,佘仁東,陸榮柱,李芳,王強(qiáng),壽勇明,張葉,王蘇華. 毒理學(xué)雜志. 2019(01)
[5]群體感應(yīng)AHLs對大菱鲆體內(nèi)溫和氣單胞菌致腐能力的影響[J]. 李婷婷,馬艷,崔方超,勵建榮. 中國食品學(xué)報. 2019(01)
[6]富馬酸鈉對熒光假單胞菌群體感應(yīng)現(xiàn)象及其腐敗活性的抑制作用[J]. 孫曉佳,李婷婷,赫彬彬,梅永超,王當(dāng)豐,謝晶,勵建榮. 食品科學(xué). 2019(11)
[7]蜂房哈夫尼亞菌對粘質(zhì)沙雷氏菌群體感應(yīng)信號分子產(chǎn)生與生物被膜形成的調(diào)控[J]. 李婷婷,高娜娜,于海鳳,國競文,王當(dāng)豐,勵建榮,黃建聯(lián). 食品科學(xué). 2019(06)
[8]6-姜酚協(xié)同超高壓處理對冷藏海鱸魚品質(zhì)的影響[J]. 蔡路昀,馬帥,曹愛玲,張宇昊,畢曉敏,勵建榮. 中國食品學(xué)報. 2017(11)
[9]拮抗內(nèi)生芽孢桿菌BEB17分離鑒定及其揮發(fā)性物質(zhì)抑菌活性分析[J]. 陳奕鵬,楊揚,桑建偉,蔡吉苗,徐春華,黃貴修. 植物病理學(xué)報. 2018(04)
[10]大黃魚源氣單胞菌的分離鑒定及致腐表型[J]. 葛陽楊,朱軍莉,劉麗,任奕婧. 水產(chǎn)學(xué)報. 2017(06)
博士論文
[1]對蝦生物保鮮與其熟制品保藏技術(shù)的研究[D]. 曹榮.中國海洋大學(xué) 2009
本文編號:3719039
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 細(xì)菌群體感應(yīng)
1.2 細(xì)菌群體感應(yīng)與水產(chǎn)品腐敗
1.2.1 微生物與水產(chǎn)品腐敗變質(zhì)
1.2.2 水產(chǎn)品腐敗菌群體感應(yīng)研究進(jìn)展
1.2.2.1 殺鮭氣單胞菌與群體感應(yīng)
1.2.2.2 熒光假單胞菌與群體感應(yīng)
1.3 細(xì)菌種間相互作用
1.3.1 微生物共培養(yǎng)
1.3.2 種間群體感應(yīng)
1.4 細(xì)菌揮發(fā)性有機(jī)化合物
1.5 研究目的意義及主要內(nèi)容
1.5.1 研究目的意義
1.5.2 研究內(nèi)容
第二章 海鱸魚源殺鮭氣單胞菌CS12的群體感應(yīng)現(xiàn)象及與水產(chǎn)優(yōu)勢腐敗菌的共培養(yǎng)研究
2.1 前言
2.2 主要材料與儀器
2.2.1 材料、菌株及培養(yǎng)條件
2.2.2 主要試劑
2.2.3 主要儀器
2.3 方法
2.3.1 細(xì)菌分離、鑒定
2.3.2 生物報告菌法檢測AHLs活性
2.3.3 GC-MS定性檢測AHLs種類
2.3.4 單菌和共培養(yǎng)菌株生長情況及產(chǎn)信號分子能力檢測
2.3.5 數(shù)據(jù)分析
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 16SrRNA檢測與系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
2.4.2 菌株CS12的AHLs活性檢測
2.4.2.1 生物報告菌法檢測
2.4.2.2 GC-MS檢測
2.4.3 單菌及共培養(yǎng)生長情況及產(chǎn)AHLs能力測定
2.5 小結(jié)
第三章 共存體系中殺鮭氣單胞菌CS12 與熒光假單胞菌PF03 的相互作用研究
3.1 前言
3.2 主要材料與儀器
3.2.1 菌株及培養(yǎng)條件
3.2.2 主要試劑
3.2.3 主要儀器
3.3 方法
3.3.1 菌株活化培養(yǎng)
3.3.2 生長動力學(xué)曲線及pH測定
3.3.3 單菌及共培養(yǎng)BS和 CFS中 AHLs分泌情況
3.3.4 不同接種比例共培養(yǎng)菌株的生長、群集、泳動及AHLs活性檢測
3.3.5 單菌及共培養(yǎng)菌株的電子鼻測定
3.3.6 數(shù)據(jù)分析
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 生長動力學(xué)曲線測定及生化鑒定
3.4.2 菌株P(guān)F03 及共培養(yǎng)菌株BS、CFS中 AHLs活性驗證
3.4.3 單菌及共培養(yǎng)菌株的生長情況及運動活性分析
3.4.4 單菌及共培養(yǎng)菌株AHLs分泌情況
3.4.5 單菌及共培養(yǎng)菌株揮發(fā)性氣味分析
3.5 小結(jié)
第四章 熒光假單胞菌CFS及乙酸乙酯粗提液對殺鮭氣單胞菌CS12 的抑制作用研究
4.1 前言
4.2 主要材料與儀器
4.2.1 菌株及培養(yǎng)條件
4.2.2 主要試劑
4.2.3 主要儀器
4.3 方法
4.3.1 PF03-CFS及粗提液中AHLs活性檢測
4.3.2 PF03-CFS及粗提液對CS12 生長情況的影響
4.3.3 PF03 乙酸乙酯粗提液的抑菌活性檢測
4.3.4 PF03 及共培養(yǎng)乙酸乙酯粗提液對CS12 的抑菌作用
4.3.5 數(shù)據(jù)分析
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 PF03的CFS及粗提液中AHLs活性檢測
4.4.2 PF03的CFS及乙酸乙酯粗提液對CS12 生長情況的影響
4.4.3 PF03 乙酸乙酯粗提液的抑菌性分析
4.4.4 PF03 及共培養(yǎng)乙酸乙酯粗提液對CS12 的抑菌性分析
4.5 小結(jié)
第五章 頂空-固相微萃取技術(shù)分析熒光假單胞菌與殺鮭氣單胞菌共培養(yǎng)揮發(fā)性成分研究
5.1 前言
5.2 主要材料與儀器
5.2.1 菌株及培養(yǎng)條件
5.2.2 主要試劑與儀器
5.3 方法
5.3.1 電子鼻測定
5.3.2 HS-SPME-GC-MS分析細(xì)菌VOCs
5.3.2.1 待測樣品的制備
5.3.2.2 頂空揮發(fā)性成分的萃取
5.3.2.3 GC-MS聯(lián)用條件
5.3.3 數(shù)據(jù)分析
5.4 結(jié)果與討論
5.4.1 電子鼻檢測結(jié)果分析
5.4.2 單菌及共培養(yǎng)菌株揮發(fā)性成分分析
5.4.3 PF03 乙酸乙酯粗提液對菌株CS12 揮發(fā)性成分的影響
5.5 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論、創(chuàng)新點和展望
6.1 結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點
6.3 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間發(fā)表論文情況
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]吲哚——種間及跨界信號分子新成員[J]. 曲媛媛,戴春曉,張旭旺,馬橋. 生物工程學(xué)報. 2019(11)
[2]綠原酸對熒光假單胞菌群體感應(yīng)現(xiàn)象及其腐敗特性的抑制作用[J]. 王虹懿,吳海虹,張新笑,劉芳,孫芝蘭,諸永志,王道營,徐為民,彭景. 食品工業(yè)科技. 2020(07)
[3]大鯢源殺鮭氣單胞菌的分離鑒定及藥敏試驗[J]. 鄭松坤,高書偉,李聲平,陳夢飛,王俊維,牛樹輝,李中軍,高小蟬. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2019(11)
[4]新型氰化物中毒解毒劑二甲基三硫研究進(jìn)展[J]. 陳旭,佘仁東,陸榮柱,李芳,王強(qiáng),壽勇明,張葉,王蘇華. 毒理學(xué)雜志. 2019(01)
[5]群體感應(yīng)AHLs對大菱鲆體內(nèi)溫和氣單胞菌致腐能力的影響[J]. 李婷婷,馬艷,崔方超,勵建榮. 中國食品學(xué)報. 2019(01)
[6]富馬酸鈉對熒光假單胞菌群體感應(yīng)現(xiàn)象及其腐敗活性的抑制作用[J]. 孫曉佳,李婷婷,赫彬彬,梅永超,王當(dāng)豐,謝晶,勵建榮. 食品科學(xué). 2019(11)
[7]蜂房哈夫尼亞菌對粘質(zhì)沙雷氏菌群體感應(yīng)信號分子產(chǎn)生與生物被膜形成的調(diào)控[J]. 李婷婷,高娜娜,于海鳳,國競文,王當(dāng)豐,勵建榮,黃建聯(lián). 食品科學(xué). 2019(06)
[8]6-姜酚協(xié)同超高壓處理對冷藏海鱸魚品質(zhì)的影響[J]. 蔡路昀,馬帥,曹愛玲,張宇昊,畢曉敏,勵建榮. 中國食品學(xué)報. 2017(11)
[9]拮抗內(nèi)生芽孢桿菌BEB17分離鑒定及其揮發(fā)性物質(zhì)抑菌活性分析[J]. 陳奕鵬,楊揚,桑建偉,蔡吉苗,徐春華,黃貴修. 植物病理學(xué)報. 2018(04)
[10]大黃魚源氣單胞菌的分離鑒定及致腐表型[J]. 葛陽楊,朱軍莉,劉麗,任奕婧. 水產(chǎn)學(xué)報. 2017(06)
博士論文
[1]對蝦生物保鮮與其熟制品保藏技術(shù)的研究[D]. 曹榮.中國海洋大學(xué) 2009
本文編號:3719039
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