由于世衛(wèi)組織有關(guān)禁止煙草煙霧在公共場所擴(kuò)散等限制和禁令,使以口含煙為主要代表的無煙化煙草開始飛速發(fā)展和普及,口含煙是一類不產(chǎn)生煙霧,不會產(chǎn)生二手煙危害的產(chǎn)品。因口含煙是直接放入口中吸食,不經(jīng)過煙草燃燒高溫釋放過程,這就對口含煙原料的品質(zhì)有了較高的要求。采用合適的工藝手段提高口含煙煙草原料質(zhì)量,能有效提高口含煙品質(zhì)。本實驗采用高通量測序技術(shù)分析大理紅大CL314和玉溪K326煙葉微生物菌群構(gòu)成,結(jié)合初步發(fā)酵選擇合適煙草品種,并對課題組篩選出的解淀粉芽孢桿菌GUHP86和GZU03進(jìn)行高密度培養(yǎng)工藝和真空冷凍干燥保護(hù)劑優(yōu)化,再應(yīng)用到煙葉進(jìn)行發(fā)酵,為進(jìn)一步的工業(yè)化提供試驗依據(jù)。研究結(jié)果如下:（1）采用高通量測序技術(shù)對大理紅大CL314和玉溪K326進(jìn)行微生物細(xì)菌多樣性檢測。發(fā)現(xiàn)大理紅大CL314和玉溪K326煙葉中,主要菌群都為為微小桿菌屬、不動桿菌屬和假單胞菌屬,但玉溪K326煙葉中假單胞菌屬占比更高,而假單胞菌屬大部分為有害菌,結(jié)合初步發(fā)酵實驗,選擇大理紅大CL314煙葉為原料進(jìn)行下一步研究。（2）選擇解淀粉芽孢桿菌GUHP86和GZU03為實驗菌種,通過單因素、PB和Box-Benhn... 

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 口含煙
        1.1.1 口含煙概述
        1.1.2 口含煙發(fā)展現(xiàn)狀
    1.2 煙葉表面微生物
        1.2.1 煙葉表面微生物概述
        1.2.2 煙葉表面微生物檢測分析
    1.3 微生物發(fā)酵劑
        1.3.1 微生物發(fā)酵劑概述
        1.3.2 解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵劑現(xiàn)狀及存在問題
    1.4 微生物技術(shù)在煙草發(fā)酵中的應(yīng)用
        1.4.1 煙草發(fā)酵
        1.4.2 微生物發(fā)酵技術(shù)
    1.5 立題背景與主要研究意義
        1.5.1 立題背景及意義
        1.5.2 主要研究內(nèi)容
第二章 煙葉表面微生物的高通量測序分析
    2.1 引言
    2.2 實驗材料
    2.3 實驗方法
    2.4 數(shù)據(jù)處理
        2.4.1 數(shù)據(jù)過濾及Tags拼接
        2.4.2 Tags豐度統(tǒng)計
    2.5 OTU分析
        2.5.1 OTU聚類
        2.5.2 OTU比較分析
    2.6 物種分類分析
        2.6.1 物種注釋
        2.6.2 物種分類樹
        2.6.3 物種分布堆疊圖分析
        2.6.4 物種分類熱圖分析
    2.7 Alpha多樣性分析
        2.7.1 Alpha多樣性指數(shù)統(tǒng)計
        2.7.2 物種稀釋曲線
        2.7.3 Shannon曲線
        2.7.4 Rank Abundance曲線
    2.8 菌群結(jié)構(gòu)分析
    2.9 高通量與初步發(fā)酵分析
    2.10 本章小結(jié)
第三章 煙葉增香菌株高密度培養(yǎng)條件及產(chǎn)酶研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 儀器與試劑
        3.1.2 方法
            3.1.2.1 高密度培養(yǎng)
            3.1.2.2 單因素、PB和響應(yīng)面試驗
            3.1.2.3 指標(biāo)檢測
            3.1.2.4 數(shù)據(jù)處理
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 培養(yǎng)溫度對生物量和蛋白酶的影響
        3.2.2 培養(yǎng)時間對生物量和蛋白酶的影響
        3.2.3 接種量對生物量和蛋白酶的影響
        3.2.4 初始pH對生物量和蛋白酶的影響
        3.2.5 裝液量對生物量和蛋白酶的影響
        3.2.6 培養(yǎng)基成分對生物量和蛋白酶的影響
        3.2.7 PB實驗
        3.2.8 響應(yīng)面實驗設(shè)計及分析
        3.2.9 驗證實驗
    3.3 本章小結(jié)
第四章 解淀粉芽孢桿菌GUHP86和GZU03 發(fā)酵劑制備
    4.1 材料與方法
        4.1.1 菌種及試劑
        4.1.2 儀器
        4.1.3 方法
        4.1.4 檢測指標(biāo)
        4.1.5 數(shù)據(jù)處理
    4.2 結(jié)果與討論
        4.2.1 不同保護(hù)劑對發(fā)酵劑存活率及水分含量的影響
        4.2.2 保護(hù)劑濃度對發(fā)酵劑存活率及水分含量的影響
        4.2.3 BBD響應(yīng)面實驗設(shè)計
        4.2.4 驗證實驗
        4.2.5 粒徑檢測分析
    4.3 本章小結(jié)
第五章 復(fù)合菌種發(fā)酵煙葉產(chǎn)酶及揮發(fā)性風(fēng)味研究
    5.1 材料與方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 儀器和設(shè)備
        5.1.3 實驗試劑
    5.2 方法
        5.2.1 培養(yǎng)基和有糖鹽溶液配制
        5.2.2 煙葉發(fā)酵
        5.2.3 煙葉發(fā)酵單因素實驗
        5.2.4 煙葉發(fā)酵Plackett-Burman實驗設(shè)計
        5.2.5 煙葉發(fā)酵Central Composite Design優(yōu)化設(shè)計
        5.2.6 感官評價
        5.2.7 酶活力測定
        5.2.8 GC-MS檢測揮發(fā)性風(fēng)味
    5.3 數(shù)據(jù)處理
    5.4 結(jié)果與分析
        5.4.1 單菌種接種量對發(fā)酵煙葉品質(zhì)及蛋白酶活力的影響
        5.4.2 復(fù)合菌種接種比例對發(fā)酵煙葉品質(zhì)及蛋白酶活力的影響
        5.4.3 葡萄糖添加量對發(fā)酵煙葉品質(zhì)的影響
        5.4.4 大豆蛋白添加量對發(fā)酵煙葉品質(zhì)的影響
        5.4.5 水分含量對發(fā)酵煙葉品質(zhì)的影響
        5.4.6 Plackett-Burman試驗結(jié)果
        5.4.7 Central Composite Design實驗結(jié)果
        5.4.8 最優(yōu)工藝條件確定與模型驗證
        5.4.9 GC-MS檢測揮發(fā)性風(fēng)味
    5.5 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 研究結(jié)論
    6.2 主要創(chuàng)新點(diǎn)
    6.3 研究展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
圖版


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[8]維吉尼亞霉素發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化[D]. 高遠(yuǎn).天津大學(xué) 2011



本文編號：3719032