發(fā)布時間：2022-10-10 11:47

　　本實驗以紫花蕓豆蛋白為研究對象,通過單一酶水解情況篩選出水解效果較高的兩種酶,以水解度為參照指標,進行雙酶混合水解實驗,采用單因素結合響應面實驗進行數(shù)據(jù)分析,獲得最優(yōu)的水解條件,以期獲得更優(yōu)的水解效果和抗氧化活性,通過大孔樹脂技術進行分離純化,獲得純度較高的活性肽,采用反相高效液相色譜和一級質譜技術分析DPPH清除率以及一級結構,從而確定最佳的純化工藝,最后探究外界條件（pH、溫度、NaCl和模擬胃腸消化）對紫花蕓豆肽抗氧化活性的影響。結果如下:1、紫花蕓豆酶解產物的酶解制備實驗。通過對紫花蕓豆蛋白的單酶水解情況,篩選出水解效果最佳的兩種酶為中性蛋白酶和堿性蛋白酶,進行雙酶同步復合水解實驗,采用單因素結合正交實驗優(yōu)化雙酶同步水解工藝,獲得最佳水解條件為:溫度55℃、pH為10、堿性蛋白酶:中性蛋白酶=1:2、混合酶添加量5 mL、酶解時間為3 h,在此條件下測得紫花蕓豆蛋白水解度為42.2%且具有較好的抗氧化活性。2、紫花蕓豆酶解產物的分離制備實驗。本研究通過對不同型號的大孔吸附樹脂進行靜態(tài)吸附能力及動態(tài)吸附試驗得出以下結論:最佳大孔吸附樹脂型號XAD-7HP,在此基礎上對大孔樹脂吸附... 

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻綜述
    1.1 蕓豆
        1.1.1 蕓豆概述
        1.1.2 蕓豆的營養(yǎng)價值
        1.1.3 蕓豆蛋白的加工現(xiàn)狀
        1.1.4 蕓豆蛋白肽
    1.2 氧化應激與機體健康
    1.3 食源性抗氧化肽的研究現(xiàn)狀
        1.3.1 動物源性抗氧化肽
        1.3.2 植物源性抗氧化肽
        1.3.3 抗氧化肽的制備、分離與純化
        1.3.4 抗氧化肽活性評價的標準
        1.3.5 抗氧化肽的研究前景
    1.4 抗氧化肽結構和功能研究進展
    1.5 課題的研究背景及意義
    1.6 本課題的研究內容
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器設備
    2.2 方法
        2.2.1 紫花蕓豆蛋白的提取
        2.2.2 紫花蕓豆酶解產物的制備
        2.2.3 蛋白酶的選擇
        2.2.4 單因素實驗設計
        2.2.5 響應面分析實驗
        2.2.6 紫花蕓豆酶解產物抗氧化能力的測定
        2.2.7 大孔樹脂的預處理
        2.2.8 大孔樹脂對蕓豆蛋白酶解產物的靜態(tài)吸附試驗
        2.2.9 大孔吸附樹脂動態(tài)吸附和解吸蕓豆酶解產物試驗
        2.2.10 紫花蕓豆抗氧化肽反相高效液相色譜檢測
        2.2.11 紫花蕓豆抗氧化肽氨基酸序列測定
        2.2.12 紫花蕓豆抗氧化肽溶解性的測定
        2.2.13 紫花蕓豆抗氧化肽熱穩(wěn)定性的測定
        2.2.14 pH對紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性的影響
        2.2.15 NaCl對紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性的影響
        2.2.16 消化對紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性的影響
    2.3 數(shù)據(jù)處理方法
3 結果與分析
    3.1 復合酶法制取紫花蕓豆抗氧化肽的研究
        3.1.1 最佳蛋白酶的篩選
        3.1.2 單因素試驗
        3.1.3 響應面試驗結果與分析
        3.1.4 蕓豆蛋白肽抗氧化性測定
    3.2 大孔吸附樹脂吸附分離高活性紫花蕓豆抗氧化肽及其一級結構、二級結構的研究
        3.2.1 最佳樹脂的篩選
        3.2.2 不同pH值的蕓豆蛋白水解物靜態(tài)吸附曲線
        3.2.3 靜態(tài)解吸實驗及解吸劑的選擇
        3.2.4 大孔樹脂動態(tài)吸附與解吸實驗
        3.2.5 反向高效液相色譜分析
        3.2.6 紫花蕓豆抗氧化肽氨基酸序列測定
    3.3 高活性紫花蕓豆抗氧化肽穩(wěn)定性的研究
        3.3.1 紫花蕓豆抗氧化肽溶解性測定
        3.3.2 溫度對紫花蕓豆抗氧化肽抗氧化活性的影響
        3.3.3 pH對紫花蕓豆抗氧化肽抗氧化能力的影響
        3.3.4 鈉離子對紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性影響
        3.3.5 體外模擬消化對紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性影響
4 討論
5 結論
參考文獻
致謝
項目資助情況
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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[5]鰱魚魚鱗膠原蛋白肽的制備及其抗氧化活性的研究[D]. 陳日春.福建農林大學 2013
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碩士論文
[1]馬鮫魚魚骨生物活性肽的提取與應用[D]. 張寶林.華僑大學 2018
[2]米渣酶解肽制備與生理活性及其對斷奶仔豬生長性能的影響[D]. 楊亞強.南昌大學 2018
[3]綠豆蛋白酶解物的制備及其對NCTC1469細胞氧化損傷的保護作用[D]. 杜夢霞.南昌大學 2018
[4]羊血漿蛋白肽抗氧化功能評價與應用[D]. 吳立國.中國農業(yè)科學院 2018
[5]葉瓜參提取物的酶法制備及其抗衰老活性研究[D]. 楊坤.華南理工大學 2018
[6]PEG修飾黑蕓豆蛋白改善其功能特性及降低凝集素致敏性的研究[D]. 何錢.合肥工業(yè)大學 2018
[7]蛋清蛋白抗氧化肽的酶法制備、微膠囊化及生物活性評價[D]. 鄭穎.南昌大學 2017
[8]南極磷蝦共生微生物的篩選及其抗氧化多肽的發(fā)酵制備和活性研究[D]. 梁方方.青島科技大學 2017
[9]棉籽蛋白及其功能性多肽的制備與特性研究[D]. 寧程茜.武漢輕工大學 2016
[10]蕓豆生育特性及蛋白組分功能特性研究[D]. 侯夏樂.西北農林科技大學 2015



本文編號：3689562