本實(shí)驗(yàn)以紫花蕓豆蛋白為研究對(duì)象,通過(guò)單一酶水解情況篩選出水解效果較高的兩種酶,以水解度為參照指標(biāo),進(jìn)行雙酶混合水解實(shí)驗(yàn),采用單因素結(jié)合響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,獲得最優(yōu)的水解條件,以期獲得更優(yōu)的水解效果和抗氧化活性,通過(guò)大孔樹脂技術(shù)進(jìn)行分離純化,獲得純度較高的活性肽,采用反相高效液相色譜和一級(jí)質(zhì)譜技術(shù)分析DPPH清除率以及一級(jí)結(jié)構(gòu),從而確定最佳的純化工藝,最后探究外界條件（pH、溫度、NaCl和模擬胃腸消化）對(duì)紫花蕓豆肽抗氧化活性的影響。結(jié)果如下:1、紫花蕓豆酶解產(chǎn)物的酶解制備實(shí)驗(yàn)。通過(guò)對(duì)紫花蕓豆蛋白的單酶水解情況,篩選出水解效果最佳的兩種酶為中性蛋白酶和堿性蛋白酶,進(jìn)行雙酶同步復(fù)合水解實(shí)驗(yàn),采用單因素結(jié)合正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化雙酶同步水解工藝,獲得最佳水解條件為:溫度55℃、pH為10、堿性蛋白酶:中性蛋白酶=1:2、混合酶添加量5 mL、酶解時(shí)間為3 h,在此條件下測(cè)得紫花蕓豆蛋白水解度為42.2%且具有較好的抗氧化活性。2、紫花蕓豆酶解產(chǎn)物的分離制備實(shí)驗(yàn)。本研究通過(guò)對(duì)不同型號(hào)的大孔吸附樹脂進(jìn)行靜態(tài)吸附能力及動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)得出以下結(jié)論:最佳大孔吸附樹脂型號(hào)XAD-7HP,在此基礎(chǔ)上對(duì)大孔樹脂吸附... 

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 蕓豆
        1.1.1 蕓豆概述
        1.1.2 蕓豆的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值
        1.1.3 蕓豆蛋白的加工現(xiàn)狀
        1.1.4 蕓豆蛋白肽
    1.2 氧化應(yīng)激與機(jī)體健康
    1.3 食源性抗氧化肽的研究現(xiàn)狀
        1.3.1 動(dòng)物源性抗氧化肽
        1.3.2 植物源性抗氧化肽
        1.3.3 抗氧化肽的制備、分離與純化
        1.3.4 抗氧化肽活性評(píng)價(jià)的標(biāo)準(zhǔn)
        1.3.5 抗氧化肽的研究前景
    1.4 抗氧化肽結(jié)構(gòu)和功能研究進(jìn)展
    1.5 課題的研究背景及意義
    1.6 本課題的研究?jī)?nèi)容
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 紫花蕓豆蛋白的提取
        2.2.2 紫花蕓豆酶解產(chǎn)物的制備
        2.2.3 蛋白酶的選擇
        2.2.4 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.2.5 響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 紫花蕓豆酶解產(chǎn)物抗氧化能力的測(cè)定
        2.2.7 大孔樹脂的預(yù)處理
        2.2.8 大孔樹脂對(duì)蕓豆蛋白酶解產(chǎn)物的靜態(tài)吸附試驗(yàn)
        2.2.9 大孔吸附樹脂動(dòng)態(tài)吸附和解吸蕓豆酶解產(chǎn)物試驗(yàn)
        2.2.10 紫花蕓豆抗氧化肽反相高效液相色譜檢測(cè)
        2.2.11 紫花蕓豆抗氧化肽氨基酸序列測(cè)定
        2.2.12 紫花蕓豆抗氧化肽溶解性的測(cè)定
        2.2.13 紫花蕓豆抗氧化肽熱穩(wěn)定性的測(cè)定
        2.2.14 pH對(duì)紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性的影響
        2.2.15 NaCl對(duì)紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性的影響
        2.2.16 消化對(duì)紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性的影響
    2.3 數(shù)據(jù)處理方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 復(fù)合酶法制取紫花蕓豆抗氧化肽的研究
        3.1.1 最佳蛋白酶的篩選
        3.1.2 單因素試驗(yàn)
        3.1.3 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.1.4 蕓豆蛋白肽抗氧化性測(cè)定
    3.2 大孔吸附樹脂吸附分離高活性紫花蕓豆抗氧化肽及其一級(jí)結(jié)構(gòu)、二級(jí)結(jié)構(gòu)的研究
        3.2.1 最佳樹脂的篩選
        3.2.2 不同pH值的蕓豆蛋白水解物靜態(tài)吸附曲線
        3.2.3 靜態(tài)解吸實(shí)驗(yàn)及解吸劑的選擇
        3.2.4 大孔樹脂動(dòng)態(tài)吸附與解吸實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 反向高效液相色譜分析
        3.2.6 紫花蕓豆抗氧化肽氨基酸序列測(cè)定
    3.3 高活性紫花蕓豆抗氧化肽穩(wěn)定性的研究
        3.3.1 紫花蕓豆抗氧化肽溶解性測(cè)定
        3.3.2 溫度對(duì)紫花蕓豆抗氧化肽抗氧化活性的影響
        3.3.3 pH對(duì)紫花蕓豆抗氧化肽抗氧化能力的影響
        3.3.4 鈉離子對(duì)紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性影響
        3.3.5 體外模擬消化對(duì)紫花蕓豆抗氧化肽的抗氧化活性影響
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
項(xiàng)目資助情況
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]棉粕寡肽發(fā)酵制備及其生物活性和營(yíng)養(yǎng)特性研究[D]. 劉建成.石河子大學(xué) 2018
[2]玉米多肽制備技術(shù)及其抗氧化和抗炎活性的研究[D]. 梁秋芳.江蘇大學(xué) 2018
[3]歐李仁多肽的制備及其功能活性的研究[D]. 張玲.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]鰱魚魚肉蛋白抗氧化肽的制備及其糖基化產(chǎn)物功能特性的研究[D]. 尤娟.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[5]鰱魚魚鱗膠原蛋白肽的制備及其抗氧化活性的研究[D]. 陳日春.福建農(nóng)林大學(xué) 2013
[6]泥鰍蛋白抗氧化肽的分離純化及抗疲勞、抗癌功效研究[D]. 游麗君.華南理工大學(xué) 2010

碩士論文
[1]馬鮫魚魚骨生物活性肽的提取與應(yīng)用[D]. 張寶林.華僑大學(xué) 2018
[2]米渣酶解肽制備與生理活性及其對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響[D]. 楊亞強(qiáng).南昌大學(xué) 2018
[3]綠豆蛋白酶解物的制備及其對(duì)NCTC1469細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用[D]. 杜夢(mèng)霞.南昌大學(xué) 2018
[4]羊血漿蛋白肽抗氧化功能評(píng)價(jià)與應(yīng)用[D]. 吳立國(guó).中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[5]葉瓜參提取物的酶法制備及其抗衰老活性研究[D]. 楊坤.華南理工大學(xué) 2018
[6]PEG修飾黑蕓豆蛋白改善其功能特性及降低凝集素致敏性的研究[D]. 何錢.合肥工業(yè)大學(xué) 2018
[7]蛋清蛋白抗氧化肽的酶法制備、微膠囊化及生物活性評(píng)價(jià)[D]. 鄭穎.南昌大學(xué) 2017
[8]南極磷蝦共生微生物的篩選及其抗氧化多肽的發(fā)酵制備和活性研究[D]. 梁方方.青島科技大學(xué) 2017
[9]棉籽蛋白及其功能性多肽的制備與特性研究[D]. 寧程茜.武漢輕工大學(xué) 2016
[10]蕓豆生育特性及蛋白組分功能特性研究[D]. 侯夏樂(lè).西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015



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