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分支酶修飾蠟質(zhì)大米淀粉結(jié)構(gòu)與性質(zhì)研究

發(fā)布時(shí)間:2022-04-18 21:05
  淀粉改性能改善大多數(shù)天然淀粉不溶于冷水、糊化后易老化、低溫發(fā)生凝沉等不足,在食品工業(yè)中有廣泛的應(yīng)用。其制備途徑包括物理改性、化學(xué)改性和酶法改性。其中,酶法反應(yīng)效率高、反應(yīng)條件溫和且產(chǎn)物環(huán)保,適于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用。分支酶具有斷裂α-1,4-糖苷鍵和形成α-1,6-糖苷鍵的水解轉(zhuǎn)苷催化特性,是修飾改性淀粉的一種重要的酶類。本課題利用分支酶對(duì)蠟質(zhì)大米淀粉進(jìn)行修飾改性,并對(duì)得到的酶改性淀粉進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,在此基礎(chǔ)上,以β-胡蘿卜素為例考察該酶改性淀粉在營(yíng)養(yǎng)素載運(yùn)方面的應(yīng)用,主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:首先,本課題利用基因工程獲得來(lái)源于Bacillus stearothermophilus的分支酶基因片段,將其連接到pET-22b(+)載體上,構(gòu)建得到重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒在大腸桿菌E.coli BL21中經(jīng)異丙基-β-D-硫代半乳糖糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組分支酶,經(jīng)測(cè)定,該蛋白酶相對(duì)分子質(zhì)量為70 kDa,最適溫度為75℃且具有良好的熱穩(wěn)定性,最適pH為7.0,在pH 6.0~9.5均保持穩(wěn)定。其次,利用分支酶對(duì)蠟質(zhì)大米淀粉進(jìn)行修飾改性。對(duì)改性淀粉的結(jié)構(gòu)分析,表明經(jīng)分支酶處理后,一方面蠟質(zhì)大米... 

【文章頁(yè)數(shù)】:58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 改性淀粉研究
        1.1.1 改性淀粉研究概述
        1.1.2 酶改性淀粉常用酶分類及α-淀粉酶家族
    1.2 分支酶研究
        1.2.1 分支酶的來(lái)源
        1.2.2 分支酶的三維結(jié)構(gòu)
        1.2.3 分支酶的催化機(jī)理
        1.2.4 分支酶在淀粉改性方面的應(yīng)用
    1.3 多糖結(jié)構(gòu)與構(gòu)象分析
        1.3.1 高碘酸氧化和Smith降解法分析
        1.3.2 多糖相對(duì)分子質(zhì)量及分布測(cè)定
        1.3.3 多糖鏈長(zhǎng)分布的測(cè)定
        1.3.4 多糖糖苷鍵構(gòu)型的測(cè)定
        1.3.5 多糖構(gòu)象的測(cè)定
    1.4 課題研究背景及意義
    1.5 課題主要研究?jī)?nèi)容
2 材料與方法
    2.1 主要材料與試劑
    2.2 主要儀器與設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 重組分支酶的制備
        2.3.2 重組分支酶的酶學(xué)性質(zhì)分析
        2.3.3 酶改性淀粉的制備與結(jié)構(gòu)分析
        2.3.4 酶改性淀粉的特性研究
        2.3.5 分支環(huán)狀特征結(jié)構(gòu)的制備及分離純化
        2.3.6 分支環(huán)狀特征結(jié)構(gòu)解析與模擬
        2.3.7 分支環(huán)狀特征結(jié)構(gòu)的特性研究
        2.3.8 酶改性淀粉在營(yíng)養(yǎng)素保護(hù)上的應(yīng)用
3 結(jié)果與討論
    3.1 重組分支酶酶學(xué)性質(zhì)
        3.1.1 重組分支酶的表達(dá)與分離
        3.1.2 溫度和pH對(duì)重組分支酶活的影響
    3.2 酶改性淀粉結(jié)構(gòu)分析
        3.2.1 酶催化進(jìn)程中底物結(jié)構(gòu)分析
        3.2.2 酶改性淀粉結(jié)構(gòu)分析
        3.2.3 酶改性淀粉的基本性質(zhì)
    3.3 環(huán)狀分支特征結(jié)構(gòu)的制備與分析
        3.3.1 分支環(huán)狀結(jié)構(gòu)的制備
        3.3.2 分支環(huán)狀結(jié)構(gòu)的分離純化
        3.3.3 分支環(huán)狀結(jié)構(gòu)的解析
        3.3.4 分支環(huán)狀結(jié)構(gòu)的分子模擬
        3.3.5 分支環(huán)狀結(jié)構(gòu)特性分析
    3.4 酶改性淀粉的應(yīng)用
        3.4.1 包合物的基本性質(zhì)
        3.4.2 包合物的特性表征
        3.4.3 包合物的穩(wěn)定性分析
主要結(jié)論與展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄:作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]預(yù)糊化淀粉制備、性質(zhì)及其在食品工業(yè)中應(yīng)用[J]. 呂瑩果,郭玉,高學(xué)梅.  糧食與油脂. 2012(07)
[2]高效排阻色譜-多角度激光散射分析淀粉分子特征[J]. 繆銘,張濤,江波.  食品科學(xué). 2009(21)

博士論文
[1]豬苓菌核多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定和溶液構(gòu)象研究[D]. 何鵬飛.浙江工業(yè)大學(xué) 2016
[2]發(fā)酵靈芝多糖對(duì)肝癌細(xì)胞的抑制及其與血清蛋白的分子對(duì)接模擬[D]. 沈潔.江南大學(xué) 2014
[3]軟化類芽孢桿菌α-環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶在大腸桿菌中的表達(dá)及其產(chǎn)物特異性分析[D]. 李兆豐.江南大學(xué) 2009

碩士論文
[1]淀粉的高支化修飾及其產(chǎn)物的消化性能研究[D]. 任俊彥.江南大學(xué) 2018



本文編號(hào):3646365

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