烯效唑和多效唑是一類抑制植物生長的調節(jié)劑,廣泛應用于農產生產中�，F有研究表明,長期使用及濫用烯效唑和多效唑,將會對人類健康造成一定影響。因此,發(fā)展食品中烯效唑和多效唑殘留檢測新技術,對保障食品品質安全具有重要的現實意義。本文研究制備了抗烯效唑單克隆抗體,在此基礎上,研究構建了食品中烯效唑免疫分析新方法;結合本實驗室前期獲得的抗多效唑單克隆抗體,研究構建了食品中多效唑免疫分析新方法。應用所建立的分析方法對食品中的烯效唑、多效唑進行檢測,取得了較好的效果。其主要研究成果如下:1.運用琥珀酸酐法制備烯效唑半抗原,并通過N-羥基琥珀酰亞胺活性酯法將半抗原分別與牛血清蛋白和卵清蛋白偶聯,進而制備新的、有效的烯效唑免疫原和檢測原。采用質譜、紅外光譜、紫外吸收光譜、核磁氫譜、高效液相色譜、MALDI-TOF/MS等多種分析技術對所制備的烯效唑半抗原及人工抗原的結構進行鑒定,同時將所制備的免疫原對小鼠進行免疫,以探究其免疫原性。結果表明,烯效唑人工抗原合成成功,免疫原和檢測原的偶聯比分別為21.8:1和6.0:1,且所免疫的小鼠能產生相應的應答,效價可達到80000,IC50=105.63 ng/mL... 

【文章來源】：南昌大學江西省211工程院校

【文章頁數】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．２?ＥＤＣ法合成烯效唑免疫抗原??．．

?第２章烯效唑人工抗原的合成及鑒定???等體積混合，每孔加入１００?ｐＬ，３７?°Ｃ顯色７?ｍｉｎ。??（６）終止：用排槍在每孔快速加入５０ｐＬ２ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４終止顯色，然后在??４５０?ｎｍ波長處用酶標儀讀取ＯＤ值，繪制標準曲線并得到半抑制濃度。??２．３結果與討論??２．３．１烯效唑半抗原的液相色譜分析??將所制備的烯效唑半抗原進行液相色譜分析，其分析條件如下：色譜柱：??ＥｄｉｐｓｅＸＤＢ－Ｃ１８?（２５０ｍｍｘ４．６ｍｍ，５ｐｍ）；流動相：乙腈：甲醇：甲酸（Ｖ／Ｖ／Ｖ）??＝３５：２０：４５；?ｐＨ：４．３８；柱溫：３０°Ｃ；流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ；進樣量：ｌＯｊｉＬ；檢測??波長：２４５?ｎｍ。由圖２．３可知，所制備的半抗原產物內含有很少量的原料烯效唑，??半抗原所占峰面積之比為９３．４４％，表明此方法合成的半抗原純度較高，己達到??９０％以上。??３５０?［?ｂ??３００?－?（１??２５０?－?丨??ｓ?２００?－?＼??１?１５０?－?＼??１００?－?＼??５０?－?ａ?＼??〇?．???Ａ．—??．?Ｉ?．?Ｉ?．?Ｉ?．?ｉ?．?ｉ?．?Ｉ?．?Ｉ?．?Ｉ??－５?０?５?１０?１５?２０?２５?３０?３５??ｔｉｍｅ?（ｍｉｎ）??圖２．３烯效唑半抗原的高效液相色譜分離圖??ａ．稀效卩坐；ｂ．稀效卩坐半抗原??２．３．２烯效唑半抗原的鑒定??（１）紅外光譜分析??由圖２．４可知，烯效唑及其半抗原紅外光譜有相似之處，７７０．７?ｃｍ—１處為Ａｒ－Ｈ??１３??

?第２章烯效唑人工抗原的合成及鑒定???面外彎曲振動吸收峰，２９６８．４?ｃｍ—１處為Ｃ－Ｈ伸縮振動吸收峰，１６９０．５、１５０１．５、??１４３０．２?ｃｍ—１處為雜環(huán)雙鍵骨架及苯環(huán)伸縮振動吸收峰。但兩者的譜圖之間也有不??同之處，反應后烯效唑中３４２１．０?ｃｍ＿１處Ｏ－Ｈ伸縮振動吸收峰減弱，酯基特征顯??現，１１２７．３?ｃｍ“處為Ｃ－Ｏ－Ｃ單鍵伸縮振動吸收峰，尤其是１７２８．２４?ｃｎｆ１處的Ｃ?＝??０的伸縮振動吸收峰。表明烯效唑中的羥基與玻珀酸酐形成了酯，即半抗原產物。??閨?ＶＩ＃１，??１７２８．２４?１１２７．３??Ｑ?Ｉ?Ｉ?■?Ｉ?．?Ｉ?■?Ｉ?．?Ｉ?■?Ｉ?．?Ｉ?．?Ｉ?．??４０００?３５００?３０００?２５００?２０００?１５００?１０００?５００??Ｗａｖｅｎｕｍｂｅｒ?（ｃｍ＂?＾）??圖２．４烯效唑（ａ）及其半抗原（ｂ）的紅外光譜圖??（２）核磁共振分析???Ｍｉｌ?，?，?１?１?ｌｉ??＊７－?＂－ｒ?－ｒ?＊ｒ??ｓ〇?Ｏｓ?ｒｆ?〇Ｃ?ｒ＾ｌ?Ｏ??Ｏｎ?ＯＣ?Ｏ?Ｏ?？?ｒｒ??ｏ?ｏ?ｒｆ?ｏ?＾?“??１５?１３?１１?９８７６５４３２１０??ｎ?（ｐｐｍ）??圖２．５烯效唑的核磁共振圖譜??１４??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]QuEChERS-LC-MS/MS法測定果蔬中4種植物生長調節(jié)劑殘留[J]. 周純潔,趙博,黃思瑜,吳丹,鄧美林.  食品工業(yè). 2019(09)
[2]丁香酚半抗原及人工抗原的合成與鑒定[J]. 解超男,韓剛,劉歡,李芹,吳立冬,李晉成.  食品安全質量檢測學報. 2018(22)
[3]Effects of paclobutrazol on biomass production in relation to resistance to lodging and pod shattering in Brassica napus L.[J]. KUAI Jie,LI Xiao-yong,YANG Yang,ZHOU Guang-sheng.  Journal of Integrative Agriculture. 2017(11)
[4]QuEChERS-超高效液相色譜-串聯質譜法同時測定櫻桃中的7種植物生長調節(jié)劑[J]. 魏玉霞,任武潔,郭虹,楊玉竹,雷凱,王建國,王芳.  現代預防醫(yī)學. 2017(12)
[5]氯吡脲人工抗原的合成與鑒定[J]. 肖石妹,鄢愛平,肖芳,萬益群,郭嵐.  食品科學. 2016(21)
[6]多效唑人工抗原的合成與鑒定[J]. 王曉芬,鄢愛平,譚婷,毛雪金,劉俊俊,郭嵐,萬益群.  食品科學. 2016(07)
[7]高效液相色譜法同時測定果蔬中5種植物生長調節(jié)劑殘留[J]. 邵金良,樊建麟,林濤,楊東順,鄒艷虹,王麗,劉宏程.  食品安全質量檢測學報. 2015(08)
[8]植物生長調節(jié)劑的研究與應用[J]. 裴海榮,李偉,張蕾,武磊,郭宗端.  山東農業(yè)科學. 2015(07)
[9]氣相色譜-串聯質譜法測定土壤中多效唑農藥殘留[J]. 王娟,胡西洲.  安徽農業(yè)科學. 2015(18)
[10]GC/ECD測定葡萄中多效唑和烯效唑的殘留[J]. 徐國鋒,聶繼云,李靜,李海飛,閆震.  農藥. 2014(10)

碩士論文
[1]多種植物生長調節(jié)劑的色譜—串聯質譜檢測技術研究[D]. 姜楠.吉林大學 2016
[2]烯唑醇和烯效唑酶聯免疫分析方法研究[D]. 江小雪.南京農業(yè)大學 2010
[3]天然水中9種三唑類農藥的檢測方法及其非生物降解研究[D]. 游明華.廈門大學 2008



本文編號：3626926