近年來,食品添加劑相關(guān)安全事件頻繁出現(xiàn)在公眾的視野之中,因此,引發(fā)了消費者對于食品安全的擔(dān)憂;同時,消費者的飲食觀念也從過去的溫飽發(fā)展到如今的綠色健康。其中,中國政府和法律已明文禁止使用危害人體健康的添加物,但仍有一些食品生產(chǎn)經(jīng)營者通過在火鍋底料中添加罌粟殼來謀取個人利益。本研究以罌粟殼有效成分嗎啡為實驗檢測對象,區(qū)別于傳統(tǒng)的色譜法、光譜法以及電泳法,建立了快速檢測火鍋底料中罌粟殼主成分的免疫側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l方法,以保證人類健康和社會穩(wěn)定。膠體金免疫側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l嗎啡檢測方法的建立,是基于抗原抗體特異性識別原理、免疫競爭機制和側(cè)向?qū)游龇椒▽岱冗M行試紙檢測,并進行特異性和靈敏度測試。當(dāng)待測樣品中存在目標(biāo)物時,嗎啡優(yōu)先與金標(biāo)偶聯(lián)物結(jié)合,導(dǎo)致檢測線顯色被削弱或消失�；疱伒琢辖�(jīng)過簡單的預(yù)處理,在最優(yōu)實驗條件下,可在10 min內(nèi)實現(xiàn)嗎啡檢測,裸眼檢測靈敏度為5 ppb,標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.1-5 ppb范圍內(nèi)線性良好。在普通膠體金免疫側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l的基礎(chǔ)上,通過兩條檢測線濃度差異,實現(xiàn)對火鍋底料中嗎啡半定量檢測。在最優(yōu)實驗條件下,10 min便可完成嗎啡檢測,裸眼檢測靈敏度為5 ppb,在1-30 ... 

【文章來源】：合肥工業(yè)大學(xué)安徽省211工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

免疫側(cè)向?qū)游龇ㄈ矍璋窓z測原理示意圖

十種不同發(fā)射顏色的CdSe@ZnSQDsFig1.2TendistinguishableemissioncolorsofZnS-cappedCdSeQDs

第二章膠體金免疫側(cè)向?qū)游鰡岱葯z測方法建立7第二章膠體金免疫側(cè)向?qū)游鰡岱葯z測方法建立2.1膠體金免疫側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l嗎啡檢測原理由于嗎啡為小分子化學(xué)物質(zhì)，因此膠體金免疫側(cè)向?qū)游鰡岱葯z測方法的建立，是基于抗原抗體特異性識別原理和免疫競爭機制對嗎啡進行試紙檢測，并進行特異性和靈敏度測試。檢測原理如下圖2.1所示：圖2.1膠體金免疫側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l嗎啡檢測原理示意圖Fig2.1SchematicillustrationoftheGNP-labelingLFSforMOPdetermination膠體金免疫側(cè)向?qū)游鰡岱葯z測試紙條從左到右依次為樣品墊、金標(biāo)墊、NC膜和吸水墊，將待測溶液滴加到樣品墊上，在毛細(xì)管力作用下沿膜向吸水墊方向移動。將膠體金納米粒子與嗎啡單克隆抗體進行偶聯(lián)后滴加在金標(biāo)墊上，嗎啡包被原和羊抗鼠二抗分別噴涂在NC膜上作為試紙條的檢測線和控制線，而金標(biāo)偶聯(lián)物可在T線和C線所在位置聚集觀察。嗎啡分子作為目標(biāo)分析物，作用等同于嗎啡包被原，均可以與嗎啡抗體進行結(jié)合，由于二者不能同時與嗎啡抗體進行反應(yīng)，而嗎啡分子的結(jié)合能力要強于嗎啡包被原，從而形成競爭作用，通過目測NC膜上T線和C線所在區(qū)域的顯色情況對樣品溶液中目標(biāo)物含量進行檢測。使用該方法開發(fā)的試紙條進行檢測時，將樣品溶液滴加在樣品墊處，若待檢樣品中不含目標(biāo)物嗎啡分子，通過金標(biāo)偶聯(lián)物/嗎啡包被原和金標(biāo)偶聯(lián)物/羊抗鼠二抗的特異性識別，將抗體標(biāo)記的膠體金納米粒子分別固定在T線和C線上，使T線和C線處出現(xiàn)顯色明顯的紅色條帶，表明結(jié)果為陰性。相反，當(dāng)樣品中含有目標(biāo)物時，毛細(xì)管作用力首先驅(qū)動樣品溶液進入金標(biāo)墊，與金標(biāo)偶聯(lián)物結(jié)合反應(yīng)形成GNP-antibody-mop，而嗎啡抗體上只有一個特異性結(jié)合位點，通過競爭反應(yīng)效


本文編號：3612776