發(fā)布時(shí)間：2021-11-20 12:30

　　發(fā)酵豆乳的主要成分是豆乳和益生菌,它兼?zhèn)浯蠖购鸵嫔谋＝∽饔�。本研究在單因素試�?yàn)的基礎(chǔ)上,通過響應(yīng)面法優(yōu)化益生菌發(fā)酵豆乳的工藝流程,同時(shí)比較有無豆皮發(fā)酵豆乳在理化指標(biāo)、抗氧化能力及儲存穩(wěn)定性等方面的異同。由于發(fā)酵豆乳中益生菌的比例對產(chǎn)品風(fēng)味和品質(zhì)有很大程度的影響,本研究進(jìn)一步建立了快速檢測發(fā)酵豆乳中兩種益生菌(植物乳桿菌Lactobacillus plantarum H₆、副干酪乳桿菌Lactobacillus paracasei Y₁₂)比例的實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real time polymerase chain reaction RT-RCR）法。此方法根據(jù)植物乳桿菌、副干酪乳桿菌保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物與探針,對建立的RT-PCR法進(jìn)行特異性、靈敏度、重復(fù)性驗(yàn)證,最后結(jié)果與國標(biāo)法進(jìn)行比較。為驗(yàn)證發(fā)酵豆乳預(yù)防高血脂癥的效果,本研究進(jìn)一步進(jìn)行了小鼠實(shí)驗(yàn)。將C57BL/6小鼠隨機(jī)分為高脂飲食組、正常組、益生菌干預(yù)組、發(fā)酵豆乳干預(yù)組,飼喂8周。通過檢測小鼠體重改變、內(nèi)臟脂肪變化、體內(nèi)脂質(zhì)水平和肝臟指標(biāo)變化、肝臟細(xì)胞形態(tài)、腸道菌群等方面判斷... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

有豆皮(a)(c)和無豆皮(b)(d)發(fā)酵豆乳密封保存1d(a)(b)及21d(c)(d)的外觀比較

22皿。稀釋液移入平皿后，將冷卻至48℃的(man,rogosaandSharpMRS)瓊脂培養(yǎng)基傾注入平皿約15mL，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。36℃±1℃厭氧培養(yǎng)72h±2h。從樣品稀釋到平板傾注要求在15min內(nèi)完成。稀釋液的制備：液體樣品應(yīng)先將其充分搖勻后以無菌吸管吸取樣品25mL放入裝有225mL生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中，充分振搖，制成1:10的樣品勻液。同理可用此方法繼續(xù)稀釋。2.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.4.1引物設(shè)計(jì)表2-7為兩種乳酸菌的引物，利用此引物對對應(yīng)的DNA進(jìn)行常規(guī)PCR擴(kuò)增均出現(xiàn)明顯條帶(圖2-1）。表2-7植物乳桿菌和副干酪乳桿菌的引物Table2-7PrimersofL.plantarumandL.paracasei目的基因引物5’-3’LactobacillusplantarumL.plantarum-RAGGTGTTATCCCCCGCTTCTL.plantarum-FTTACATTTGAGTGAGTGGCGAACTLactobacillusparacaseiL.paracasei-FTCCGGGAACTGCTCAGCL.paracasei-RTGTTTCACGAACAGGTG圖2-1兩株乳酸菌DNA的PCR擴(kuò)增凝膠電泳圖Fig2-1GelelectrophoresisofPCRamplificationofDNAoftwolacticacidbacteriastrains2.4.2實(shí)時(shí)熒光定量方法特異性的研究以標(biāo)準(zhǔn)菌株的引物對標(biāo)準(zhǔn)菌株及其他9株乳酸菌進(jìn)行PCR試驗(yàn)，對得出的PCR產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖2-2所示，只有標(biāo)準(zhǔn)菌株出現(xiàn)明顯條帶，其余菌株均無明顯條帶。圖2-3為兩種標(biāo)準(zhǔn)菌株引物的特異性的結(jié)果，圖中出現(xiàn)明顯擴(kuò)增，含有標(biāo)準(zhǔn)菌株的豆乳也出現(xiàn)了擴(kuò)增但與標(biāo)準(zhǔn)菌株不相似，同時(shí)兩種菌株的熔解曲線（圖2-4）都只出現(xiàn)了單峰，表明兩種引物的特異性高[36]。

23圖2-2標(biāo)準(zhǔn)菌株及9菌乳酸菌DNA的PCR凝膠電泳圖。1為鼠李糖乳桿菌(Y1)，2為嗜酸乳桿菌(Y2)，3為羅伊氏乳桿菌(Y15)，4為德氏乳桿菌(Y18)，5為清酒乳桿菌(K5)，6為類腸膜魏斯氏菌(K6)，7為發(fā)酵乳桿菌(F5)，8為腸膜明串珠菌(F6)，9為沙克乳酸桿菌(E7)，10為植物乳桿菌(H6)，11為副干酪乳桿菌(Y12)Fig.2-2PCRgelelectrophoresisofstandardstrainand9strainlacticacidbacteriaDNA.1isLactobacillusrhamnosus(Y1),2isLactobacillusacidophilus(Y2),3isLactobacillusreuteri(Y15),4isLactobacillusdelbrueckii(Y18),5isLactobacillussake(K5),6isWeissellaenteritidis(K6),7isLactobacillusfermentans(F5),8isLeuconostocenterica(F6),9isLactobacillusshack(E7),10isLactobacillusplantarum(H6),11isLactobacillusparacasei(Y12).AB圖2-3植物乳桿菌A、副干酪乳桿菌B實(shí)時(shí)熒光定量PCR的擴(kuò)增曲線Fig2-3AmplificationcurvesofLactobacillusplantarumAandLactobacillusparacaseiBreal-timefluorescencequantitativePCR

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3507328