多糖是一類高分子碳水化合物,具有廣泛的生物活性,近年來逐漸成為食品和醫(yī)療行業(yè)的研究熱點。一些研究發(fā)現(xiàn)微生物胞外多糖具有良好的抗氧化活性和成膜性,因而被廣泛應用于果蔬保鮮領(lǐng)域。強雄腐霉（Pythium arrhenomanes）是一類腐生性真菌,屬腐霉科、腐霉屬。目前關(guān)于腐霉代謝產(chǎn)物的研究大多集中在二十碳五烯酸的提取,而關(guān)于腐霉胞外多糖的研究還未見報道。本研究以強雄腐霉HA-09為研究對象,對其胞外多糖進行分離純化和一級結(jié)構(gòu)解析,探索其在天然抗氧化劑、微生物源果蔬保鮮制劑等方面的應用價值,為強雄腐霉胞外多糖的進一步開發(fā)利用提供理論和技術(shù)支持。1.強雄腐霉胞外多糖的提取純化工藝利用醇沉法從強雄腐霉發(fā)酵液中提取得到粗多糖（Crude PEPS）,產(chǎn)量為7.33 g/L。菌絲與多糖的干重比為3.18 g/7.33 g。強雄腐霉粗多糖中總糖含量為83.62%,蛋白質(zhì)含量為6.89%。對強雄腐霉粗多糖進行分級純化,共得到三種純化組分:PEPS-1、PEPS-2和PEPS-3。2.強雄腐霉胞外多糖的結(jié)構(gòu)鑒定一級結(jié)構(gòu)解析結(jié)果表明,三種純化組分均具有較高的純度,不含蛋白質(zhì)等雜質(zhì);純化組分均由鼠李糖和葡萄... 

【文章來源】：淮陰工學院江蘇省

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

葡萄糖標準曲線

淮陰工學院碩士學位論文第13頁回歸方程為：Y=1.1154X-0.0059（R2=0.995），其中Y為吸光度值，X為葡萄糖濃度（mg/mL）；牛血清蛋白標準曲線見圖2-2，回歸方程為：Y=0.0138X-0.002（R2=0.996），其中Y為吸光度值，X為牛血清蛋白濃度（μg/mL），經(jīng)計算強雄腐霉粗多糖中總糖含量為83.62%，蛋白質(zhì)含量為6.89%，強雄腐霉粗多糖中蛋白質(zhì)含量較低，可以進行進一步的分級純化。圖2-1葡萄糖標準曲線Figure2-1Standardcurveofglucose圖2-2牛血清蛋白標準曲線Figure2-2Standardcurveofbovineserumalbumin2.2.2強雄腐霉胞外多糖的分級純化DEAE-52纖維素是一種陰離子交換樹脂，利用不同極性的洗脫液可將帶電荷不同的多糖分級洗脫下來，從而得到帶電特性不同的純化組分[102]。DEAE-52分離多糖的原理如圖

袁志香腐霉多糖的分離與鑒定及其在草莓采后保鮮中的作用研究第14頁2-3所示，通常利用純水作為洗脫液時可以將中性多糖洗脫下來，利用鹽溶液如NaCl溶液作為洗脫液洗脫時可以將酸性多糖洗脫下來[103]。帶電特性不同的純化多糖在結(jié)構(gòu)組成、生物活性等方面往往存在較大的差異，酸性多糖多含有糖醛酸、氨基酸或硫酸基等酸性基團[65]。圖2-3DEAE-52纖維素樹脂洗脫示意圖Figure2-3SchematicdiagramofDEAE-52celluloseelution圖2-4強雄腐霉胞外多糖（PEPS）洗脫曲線Figure2-4ElutioncurveofPythiumarrhenomanesexopolysaccharides(PEPS)強雄腐霉多糖的洗脫曲線如圖2-4所示。強雄腐霉粗多糖經(jīng)純水和不同濃度的鹽溶液（0.1M、0.3M、0.5M的NaCl溶液）洗脫共得到三個組分，分別為水洗組分PEPS-1、0.1MNaCl洗脫組分PEPS-2、0.5MNaCl洗脫組分PEPS-3，可以初步判定PEPS-1為中性多糖，PEPS-2和PEPS-3可能為酸性多糖，其中PEPS-2和PEPS-3易溶于0.5MNaOH溶液。

【參考文獻】：
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本文編號：3493360