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信號(hào)分子AHLs印跡熒光探針構(gòu)建及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-11-12 07:34
  群體感應(yīng)信號(hào)分子是細(xì)菌生長過程中的代謝產(chǎn)物,環(huán)境中菌體濃度越大分泌的信號(hào)分子越多。當(dāng)濃度達(dá)到閾值后,信號(hào)分子可調(diào)控細(xì)菌毒力、致腐性、生物被膜等基因的表達(dá)。因此,檢測食品環(huán)境中信號(hào)分子的含量可評估食品的細(xì)菌污染情況,對保證食品安全、降低食源性疾病的發(fā)生具有重要意義。本論文采用溶脹法制備了Eu(DBM)3Phen摻雜的羧基化聚苯乙烯熒光納米微球(FPM),該微球平均直徑約為136.8 nm。以FPM為核、Cbz-N酰基高絲氨酸內(nèi)酯為模板分子、甲基丙烯酸為功能單體、乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑構(gòu)建了信號(hào)分子AHLs的分子印跡熒光探針FPM@MIPs。吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:FPM@MIPs探針對模板分子的最大吸附容量為50.1 mg/g,在濃度為濃度為20 mg/L時(shí),8 min可達(dá)到吸附平衡;探針表面和內(nèi)部均分布著吸附模板分子的結(jié)合位點(diǎn),主要通過化學(xué)方式與模板分子結(jié)合。FPM@MIPs探針與目標(biāo)物孵育7 min后熒光信號(hào)穩(wěn)定,C4-HSL,C6-HSL和C8-HSL三種AHLs信號(hào)分子對探針的熒光猝滅效果好。... 

【文章來源】:渤海大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:75 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

信號(hào)分子AHLs印跡熒光探針構(gòu)建及應(yīng)用


細(xì)菌QS信號(hào)分子分子結(jié)構(gòu)

試紙,生物傳感器,食品


渤海大學(xué)碩士學(xué)位論文5圖1-2.試紙條生物傳感器檢測食品中3-oxo-C12-HSL信號(hào)分子結(jié)果[40]。Figure1-2.Arapidpaperbiosensor-basedtestforbacterialpathogensinfood.Deng等[37]應(yīng)用轉(zhuǎn)移特殊質(zhì)粒的E.coli為指示菌,建立了3-oxo-C6-HSL檢測方法,方法的檢測方位為5×10-8mol/L-1×10-5mol/L。薄層色譜(Thin-layerchromatography,TLC)是一種基于分子極性的分離技術(shù)。將細(xì)胞生物傳感器與薄層色譜相結(jié)合可提高二者的靈敏度。Charlesworth等[39]將E.coli傳感器與TLC結(jié)合建立了9種AHLs的檢測方法,方法的檢出限為0.009ng-1710ng。試紙條生物傳感器檢測技術(shù)為現(xiàn)場快速檢測提供了可能。Wynn等[40]E.coli作為探針構(gòu)建試紙條生物傳感器檢測AI-2和AHLs信號(hào)分子檢測方法,確定了牛奶和牛肉中信號(hào)分子與檢測信號(hào)的相互關(guān)系,方法的檢測限為1×10-7mol/L-1×10-9mol/L,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1-16%。圖1-2為試紙條生物傳感器檢測3-oxo-C12-HSL信號(hào)分子結(jié)果。1.2.2.3電化學(xué)傳感器電化學(xué)傳感技術(shù)(Electrochemicalsensingtechniques,ECST)具有響應(yīng)速度快、攜帶便攜、檢測成本低等特點(diǎn),已經(jīng)引起廣泛關(guān)注。在電化學(xué)傳感器中,轉(zhuǎn)換器將檢測信號(hào)轉(zhuǎn)換為可定量的電輸出,分子識(shí)別元件結(jié)合和識(shí)別目標(biāo)物[41]。大鼠嗜堿性白血。≧BL-2H3)肥大細(xì)胞系是一群免疫細(xì)胞,具有選擇識(shí)別AHLs的應(yīng)用潛力[42]。Jiang等[42]將RBL-2H3細(xì)胞固定于金電極表面構(gòu)建了檢測3-oxo-C12-HSL信號(hào)分子電化學(xué)傳感器,檢測結(jié)果顯示該檢測方法的最低檢出限為0.034μmol/L,表明該方法可以評估食品中細(xì)菌致病性(圖1-3基于EBL-2H3電化學(xué)傳感器示意圖)。Jiang等[27]將多壁碳納米管與RBL-2H3修飾的碳電極結(jié)合提高絲網(wǎng)

示意圖,電化學(xué),傳感器,過程


信號(hào)分子AHLs印跡熒光探針構(gòu)建及應(yīng)用6印刷碳電極電信號(hào)的傳輸性能和檢測方法的靈敏度,結(jié)果顯示該方法對3-oxo-C12-HSL的最低檢出限為0.094μmol/L,并應(yīng)用于魚汁樣品中信號(hào)分子的檢測。圖1-3基于EBL-2H3電化學(xué)傳感器及檢測過程示意圖[42]。Fig.1-3ProposedschemeforthepreparationofRBL-2H3mastcellsensorandprocessofAHLsdetection為克服細(xì)胞電化學(xué)傳感器中分子識(shí)別元件對環(huán)境的敏感性,Piletska等[43]首先將分子印跡仿生抗體作為識(shí)別元件構(gòu)建了AHLs信號(hào)分子電化學(xué)傳感器檢測方法;該方法以3-oxo-C12-AHL為模板分子,以亞甲基丁二酸為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑,為分子印跡電化學(xué)傳感器檢測AHLs信號(hào)分子奠定了基矗Jiang等[44]以Fe3O4@SiO2為核、以2,5-二甲基-4-羥基-3(2H)-呋喃酮為模板分子、乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑制備磁性分子印跡,并以此聚合物為識(shí)別元件構(gòu)建磁性碳電極,建立AHLs信號(hào)分子檢測方法。該方法的最低檢出限為8×10-10mol/L,線性范圍為2.5×10-9mol/L-1.0×10-7mol/L,實(shí)際食品樣品檢測中表現(xiàn)良好。摻硼金剛石(Boron-dopeddiamond,BBD)薄膜電極具有高電流密度、背景值低、電化學(xué)穩(wěn)定性好等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于分析方法的建立[45]。Zhu等[10]基于BBD電極建立了PQS信號(hào)分子檢測方法,在電壓為+0.768V和+1.182V之間,pH值為2時(shí)該


本文編號(hào):3490455

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