發(fā)布時間：2021-10-05 13:24

　　目的將γδT細(xì)胞自健康成人外周血分離后,經(jīng)多種細(xì)胞因子體外誘導(dǎo)分化,形成細(xì)胞體系后分組,再加入不同濃度香菇多糖（Lentinan,LNT）以確定LNT對γδT細(xì)胞抗腫瘤活性的影響,為臨床如何應(yīng)用LNT提高γδT細(xì)胞過繼免疫治療療效提供理論依據(jù)。方法在無菌的前提下,通過密度梯度離心法分離健康成人外周血獲取單個核細(xì)胞,用重組人IL-2（1000 IU/ml）、唑來膦酸（5uM）等細(xì)胞因子誘導(dǎo)擴(kuò)增γδT細(xì)胞。采用直接細(xì)胞計數(shù)法,于體外培養(yǎng)的第0、4、7、10天計數(shù)γδT細(xì)胞。將體外培養(yǎng)第10天的γδT細(xì)胞分為12組,每組各設(shè)3個復(fù)孔,其中6組為實驗組,分別加入1640培養(yǎng)液溶解的注射用香菇多糖,使其終濃度分別為0 ug/ml、5 ug/ml、10 ug/ml、25ug/ml、50 ug/ml、75 ug/ml,記為LNT-I組、LNT-II組、LNT-III組、LNT-IV組、LNT-V組、LNT-VI組,剩余6組為對照組,記為LNT-I*組、LNT-II*組、LNT-III*組、LNT-IV*組、LNT-V*組、LNT-VI*組,然后按LNT的濃度梯度接種在96孔板上,繼續(xù)培養(yǎng),72小時后... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

香菇多糖（LNT）分子式

圖 4 離心后外周血分層分離出來的單個核細(xì)胞來膦酸及已配好的γδ察γδT 細(xì)胞的數(shù)量和（圖5），適時適量添d10計數(shù)細(xì)胞。將細(xì)胞T細(xì)胞及其細(xì)胞表面標(biāo)志養(yǎng)第10天的γδT細(xì)胞濃度為2×106個/ml，

內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文（5 與香菇多糖共培養(yǎng)體外培養(yǎng)第10天的γδT細(xì)胞分為12組，每組各設(shè)3個復(fù)孔，其中6組為實驗組，入1640培養(yǎng)液溶解的注射用香菇多糖，使其終濃度分別為0 ug/ml、5 ug/ml、/ml、25 ug/ml、50 ug/ml、75 ug/ml，記為LNT-I組、LNT-II組、LNT-III組、組、LNT-V組、LNT-VI組，剩余6組為對照組，記為LNT-I*組、LNT-II*組、LNT、LNT-IV*組、LNT-V*組、LNT-VI*組，然后按香菇多糖的濃度梯度分別接種在上。如下圖所示：1 2 3 4 5 6 7 8 9 100011 12A

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MiR-382對γδ T細(xì)胞殺傷肺癌細(xì)胞活性的影響及機(jī)制研究[J]. 李杰.  中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2018(01)
[2]帕米膦酸二鈉與唑來膦酸對體外培養(yǎng)人γδT細(xì)胞的殺傷功能影響比較[J]. 陳玲,呂小婷,陳復(fù)興,劉軍權(quán),鄭璐,徐晶,孫蕾清,周忠海.  免疫學(xué)雜志. 2016(12)
[3]γδT細(xì)胞對卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖的抑制作用[J]. 汪海嬌,范艷艷,張湜,張瑞麗,張海靜,韓亞輝,朱繼紅.  吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2016(05)
[4]腫瘤細(xì)胞免疫治療行業(yè)發(fā)展概況[J]. 陳艷萍,何凌冰,唐超.  云南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2016(S1)
[5]TWS119對人胃癌SGC-7901細(xì)胞和γδT細(xì)胞活性影響及機(jī)制研究[J]. 陳永強(qiáng),鄭璐,劉軍權(quán),呂小婷,孫蕾清,徐晶,周忠海,陳復(fù)興.  中國藥學(xué)雜志. 2016(05)
[6]應(yīng)用誘導(dǎo)多能干細(xì)胞治療的進(jìn)展與挑戰(zhàn)[J]. 邵海艷,劉洋,李羽薇,高冠群,張卓伯.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(22)
[7]香菇多糖誘導(dǎo)鼠肝癌H22細(xì)胞凋亡機(jī)制的初步探討[J]. 游如旭,張玉,汪柳,張琪琳,王凱平.  中國醫(yī)院藥學(xué)雜志. 2015(09)
[8]腫瘤DC-CIK細(xì)胞生物治療產(chǎn)業(yè)的國際市場現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢探討[J]. 丁洋,劉永軍.  中國藥物評價. 2015(02)
[9]Role of gamma-delta T cells in liver inflammation and fibrosis[J]. Linda Hammerich,Frank Tacke.  World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology. 2014(02)
[10]香菇多糖對小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞表型和功能的影響[J]. 胡婷婷,孟一鳴,單風(fēng)平.  微生物學(xué)雜志. 2014(02)

碩士論文
[1]香菇多糖對急性髓系白血病患者樹突狀細(xì)胞的成熟和功能影響的體內(nèi)外研究[D]. 王玉虹.蘭州大學(xué) 2010



本文編號：3419827