藜麥蛋白作為一種優(yōu)質(zhì)蛋白,平均含量可達(dá)到12%～23%,且含有種類(lèi)齊全和比例均衡的8種必需氨基酸,易于被人體吸收,由于其較高的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)和功能特性,藜麥蛋白在食品加工中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。但目前關(guān)于藜麥蛋白提取優(yōu)化及其功能特性改善的研究較少。本試驗(yàn)以脫皮藜麥為原材料,通過(guò)復(fù)合酶協(xié)同超聲提取藜麥蛋白;在此條件下,利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化藜麥蛋白與殼寡糖發(fā)生反應(yīng),研究糖基化修飾對(duì)藜麥蛋白抗氧化活性的影響;同時(shí)運(yùn)用超高壓技術(shù)處理藜麥蛋白,研究超高壓對(duì)藜麥蛋白乳化性和乳化穩(wěn)定性的影響,為藜麥蛋白在食品工業(yè)中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)與理論參考。具體研究?jī)?nèi)容及試驗(yàn)結(jié)果如下:（1）以藜麥蛋白的提取率為考察指標(biāo),根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果,固定酶配比,采用響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化藜麥蛋白的提取條件。得到最佳提取條件為:加酶量配比（纖維素酶:糖化酶）為4:6,酶解時(shí)間為71 min,酶解溫度為50℃,pH值為5.0,總加酶量為427 U/g,在此條件下,蛋白質(zhì)提取率為76.82%。凝膠電泳分析表明,藜麥蛋白的主要亞基分子量分別為50、32～39、22～23和8～9 kDa。（2）以接枝度、DPPH自由基清除率、羥自由基清除率、總還原... 

【文章來(lái)源】：青海師范大學(xué)青海省

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

藜麥植株(左)及種子(右)

青海師范大學(xué)碩士學(xué)位論文8酶催化下會(huì)發(fā)生兩種競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)，即伯胺類(lèi)物質(zhì)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行糖基化修飾的同時(shí)，蛋白質(zhì)分子間的交聯(lián)反應(yīng)也在進(jìn)行[53]。如圖1-2所示，反應(yīng)A中受體若由含有賴(lài)氨酸殘基的蛋白質(zhì)提供，則蛋白質(zhì)之間就會(huì)發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)；反應(yīng)B中受體若由含有伯胺基團(tuán)的糖類(lèi)提供，則引發(fā)糖類(lèi)與蛋白質(zhì)的糖基化反應(yīng)[54]。圖1-2轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化的蛋白質(zhì)交聯(lián)與胺類(lèi)化合物導(dǎo)入反應(yīng)Fig.1-2Cross-linkingofproteinsandincorporationofaminecompoundscatalyzedbytransglutaminase1.6.2轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶途徑糖基化的研究現(xiàn)狀研究表明，TGase催化糖基化修飾能有效改善蛋白質(zhì)的溶解度、乳化性、凝膠性、抗氧化性、熱穩(wěn)定性、流變學(xué)性質(zhì)等功能特性，同時(shí)對(duì)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)也會(huì)產(chǎn)生一定影響。Colas等研究了轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化糖基化修飾對(duì)豌豆球蛋白和小麥醇溶蛋白溶解度的影響，在等電點(diǎn)處，糖基化修飾蛋白的溶解度明顯比沒(méi)有處理過(guò)的蛋白要高一些，當(dāng)pH值低于5.0時(shí)，經(jīng)過(guò)糖基化處理的小麥醇溶蛋白的溶解度甚至略低于未處理的醇溶蛋白[55]。王曉杰等采用TGase催化促進(jìn)殼寡糖與玉米醇溶蛋白進(jìn)行反應(yīng)，殼寡糖的最大接入量為101.47mg葡萄糖胺/g蛋白，與未改性蛋白進(jìn)行比較，經(jīng)糖基化處理的玉米醇溶蛋白的溶解度和體外消化率均有顯著提高[56]。Hrynets等利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶催化葡萄糖胺和天然肌動(dòng)球蛋白進(jìn)行糖基化反應(yīng)，并研究了其功能性質(zhì)和凝膠結(jié)構(gòu)的變化，結(jié)果表明，在37℃和1:1蛋白/糖比的反應(yīng)條件下，葡萄糖胺和天然肌動(dòng)球蛋白的偶聯(lián)效率最高，與未處理的肌動(dòng)球蛋白相比，糖基化肌動(dòng)球蛋白在等電點(diǎn)處的溶解度顯著升高；粒度和分布分析表明，在37℃時(shí)其乳化性和乳化穩(wěn)定性明顯增大；在熱誘導(dǎo)凝膠化過(guò)程中糖基化反應(yīng)對(duì)肌動(dòng)球蛋白有保護(hù)作用，由SEM觀察到其?

青海師范大學(xué)碩士學(xué)位論文14藜麥蛋白的提取率為響應(yīng)值，Box-Behnken中心組合試驗(yàn)[71]因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)下表：表2-3響應(yīng)面的因素水平設(shè)計(jì)Table.2-3Factorsandlevelsusedinresponsesurfacedesign水平因素A溫度/℃BpH值C時(shí)間/minD總加酶量/(U/g)-1454.5403500505.0604001555.5804502.1.3.9藜麥蛋白的凝膠電泳分析根據(jù)LiyaYi等[72]的方法，稍作改動(dòng)。利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)測(cè)定藜麥蛋白的分子量分布，使用12%的分離膠，4%的濃縮膠，上樣量5μL，調(diào)節(jié)電壓至60V啟動(dòng)電泳，溴酚藍(lán)指示劑開(kāi)始進(jìn)入分離膠時(shí)，電壓調(diào)節(jié)為100V。電泳結(jié)束后立即用考馬斯亮藍(lán)染色，最后用脫色液洗脫至蛋白質(zhì)條帶清晰。2.2結(jié)果與分析2.2.1酶制劑的確定圖2-1不同酶制劑對(duì)蛋白質(zhì)提取率的影響Fig.2-1Effectofenzymetypeontheextractionrateofprotein如圖2-1所示，通過(guò)不同酶制劑及其復(fù)合酶對(duì)蛋白進(jìn)行提取，得到的提取率各不相同，其中選用纖維素酶復(fù)合糖化酶的效果最佳，提取率最高可達(dá)到67.92%，明顯大于纖維素酶所得到的最高提取率57.28%和糖化酶所得到的最高提取率

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]藜麥皂苷的分離純化及皂苷元的制備研究[D]. 雷蕾.青海師范大學(xué) 2019
[2]微波焙烤對(duì)藜麥功能特性及其應(yīng)用的影響研究[D]. 張芯蕊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[3]牦牛乳清蛋白泡沫分離及功能特性改善研究[D]. 劉龍.青海師范大學(xué) 2018
[4]藜麥皂苷的提取、分離純化及生物活性研究[D]. 徐曉敏.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[5]藜麥麩皮總皂苷的提取純化及其抗氧化和免疫增強(qiáng)作用[D]. 趙文婷.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3418920