白藜蘆醇是廣泛存在于葡萄、花生和虎杖等植物中的一種多酚類化合物,具有良好的抗氧化、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗炎和保護(hù)心血管等多種生理功效,被廣泛應(yīng)用于保健食品、醫(yī)藥品等領(lǐng)域中。但是,白藜蘆醇存在著水溶性低、穩(wěn)定性差等缺點(diǎn),同時(shí)由于其在腸道和肝臟被迅速代謝排泄,其生物利用度很低,嚴(yán)重影響了生理活性的發(fā)揮。本論文從馬鮫魚(yú)（Scomberomorus niphonius）酶解制備得到馬鮫魚(yú)肽,可明顯提高白藜蘆醇的消化穩(wěn)定性和生物利用度,從而明顯提高其生理活性。對(duì)馬鮫魚(yú)酶解工藝進(jìn)行優(yōu)化,考察了不同蛋白酶、料液比、加酶量、酶解時(shí)間、酶解p H值對(duì)酶解效果的影響,確定最優(yōu)工藝為:堿性蛋白酶、料液比為1:10、加酶量為3000 U/g、酶解時(shí)間為4 h、酶解p H值為8、酶解溫度為50℃,其蛋白質(zhì)回收率為67.6±1.8%,水解度為22.5±2.9%。研究對(duì)比馬鮫魚(yú)酶解物（SH）、白藜蘆醇以及馬鮫魚(yú)酶解物-白藜蘆醇復(fù)合物（SH-R）對(duì)B16細(xì)胞的抑制作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在經(jīng)過(guò)模擬胃腸消化后,SH對(duì)B16細(xì)胞無(wú)毒害作用,在37℃、酚/肽比例為1:10時(shí),SH可使白藜蘆醇對(duì)B16細(xì)胞的抑制率提升14.3%（P<... 

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【部分圖文】：

肽的吸收途徑[17]

第一章緒論7降低脂質(zhì)過(guò)氧化作用，但是效果不如維生素C[66]。1.2.3白藜蘆醇的轉(zhuǎn)運(yùn)就白藜蘆醇而言，已經(jīng)開(kāi)發(fā)出多種方法（例如流式細(xì)胞儀、熒光光譜法），利用白藜蘆醇及其代謝物的內(nèi)在熒光特性檢測(cè)其轉(zhuǎn)運(yùn)途徑，現(xiàn)已證實(shí)白藜蘆醇被細(xì)胞吸收的過(guò)程是被動(dòng)擴(kuò)散或載體介導(dǎo)的[67,68]。白蛋白和脂蛋白（LDL）是白藜蘆醇的重要載體，在白藜蘆醇向組織和細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)中起重要作用，除此之外，白藜蘆醇還可以與很多細(xì)胞外分子復(fù)合，例如血清蛋白、脂肪酸、整合素（Integrin，也稱整聯(lián)蛋白），這些復(fù)合都會(huì)影響白藜蘆醇在機(jī)體內(nèi)的生物利用度[69]。圖1-2白藜蘆醇的吸收途徑[69]Figure1-2Absorptionpathwayofresveratrol由于白藜蘆醇的水溶性較差，為了能在血清中保持較高濃度，白藜蘆醇必須尋找能與之結(jié)合的蛋白質(zhì)。在可能發(fā)揮血漿載體作用的血清蛋白中，白蛋白是最為理想的，因?yàn)樗梢越Y(jié)合兩親分子[70]，但是人血清白蛋白（HSA）僅在濃度較高時(shí)才會(huì)與白藜蘆醇結(jié)合，因?yàn)镠SA可能只有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，因此白藜蘆醇濃度較低時(shí)HSA可使其有良好吸收[69]。研究證實(shí)，脂肪酸對(duì)白藜蘆醇和牛血清白蛋白（BSA）的結(jié)合有積極作用，通常情況下，脂肪酸因其提供了白藜蘆醇結(jié)合所需的親脂環(huán)境而被用作載體，它們對(duì)肝臟具有很高的親和力，并且由于與跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（肝臟血漿膜-脂肪酸結(jié)合蛋白）的特異性

課?000U/g，酶解時(shí)間為4h，酶解溫度及酶解pH值均為各種蛋白酶最適的溫度和pH�；诓煌鞍酌该盖形稽c(diǎn)的差異，選用堿性蛋白酶（酶切位點(diǎn)為精氨酸、組氨酸、賴氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、纈氨酸和酪氨酸等）、木瓜蛋白酶（酶切位點(diǎn)為賴氨酸、精氨酸、精氨酸和瓜氨酸等）、中性蛋白酶（酶切位點(diǎn)為甘氨酸、色氨酸、蘇氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺等）和胰蛋白酶（酶切位點(diǎn)為賴氨酸和精氨酸）分別對(duì)馬鮫魚(yú)肉進(jìn)行酶解，以酶解物的蛋白質(zhì)回收率和水解度為指標(biāo)，篩選酶解制備馬鮫魚(yú)酶解物的最佳酶種類。圖2-1酶種類對(duì)馬鮫魚(yú)酶解蛋白質(zhì)回收率、水解度的影響。圖中相同小寫(xiě)字母表示每組數(shù)值之間差異不顯著，不同字母表示差異顯著（P<0.05）。Figure2-1InfluenceofdifferentenzymesontheproteinrecoveryanddegreeofhydrolysisonthehydrolysisprocessofScomberomorusniphonius.Thesamelowercaselettersinthefigureindicatethatthedifferencebetweeneachgroupofvaluesisnotsignificant,anddifferentlettersindicatesignificantdifferences(P<0.05).如圖2-1所示，胰蛋白酶、堿性蛋白酶的酶解效率較高，其對(duì)應(yīng)蛋白質(zhì)回收率均高于50%，但木瓜蛋白酶和中性蛋白酶不足40%。此外，堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶酶解物的水解度最高顯著高于胰蛋白酶酶解物（P<0.05），其原因可能是胰蛋白酶具有特異性酶切位點(diǎn)，在一定程度上限制了馬鮫魚(yú)肉的酶解。從實(shí)際生產(chǎn)角度，選擇堿性蛋白酶進(jìn)行下一步優(yōu)化。2.4.1.2料液比對(duì)馬鮫魚(yú)肉酶解的影響料液比是蛋白質(zhì)酶解工藝中的一個(gè)關(guān)鍵參數(shù)，料液比過(guò)高會(huì)導(dǎo)致體系濃度過(guò)高，流動(dòng)相較差，蛋白酶與底物無(wú)法充分接觸，料液比過(guò)低會(huì)導(dǎo)致體系過(guò)度稀釋，酶解反應(yīng)不

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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