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適配體結合量子點技術同步檢測金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏菌O157:H7的方法研究

發(fā)布時間:2021-05-20 16:03
  據(jù)我國疾病爆發(fā)監(jiān)測和數(shù)據(jù)報告表明,在2009年至2019年期間由食源性致病菌引發(fā)的食源性疾病多達3170起。處于致病率首位的便是金黃色葡萄球菌,雖致死率不高,卻幾乎能污染所有的食物,尤其是肉類制品,從而引起機體嚴重的腸毒性疾病。其次造成重大危害的菌是大腸埃希氏菌O157:H7,由大腸埃希氏菌O157:H7引發(fā)的疾病,每年可導致近6億人次患病,是致使我國居民腹瀉的主要糞源性疾病,嚴重危害人們的身體健康,同時這兩種菌還易在食品加工生產(chǎn)、儲存運輸環(huán)節(jié)中造成污染,存在著巨大的隱患。因此開展同步檢測兩種食源性致病菌的方法學研究對未來食品安全的保障具有重大意義。本研究基于適配體結合量子點技術,建立一種同時針對金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌O157:H7兩種食源性致病菌的快速高效、靈敏的檢測方法。1. 利用熒光檢測技術對4條同一菌種的適配體與其目標菌結合的親和力進行分析,根據(jù)熒光光譜數(shù)據(jù)等計算解離常數(shù),對應選取解離常數(shù)最小的一條適配體序列;對選中的兩條適配體序列進行特異性檢驗。結合表面增強拉曼光譜技術確定適配體與其目標結合物具有較高的特異性,并且在重復性實驗中結果良好。成功篩選出與目標菌結合、親和力較... 

【文章來源】:吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 文獻綜述
    1 大腸埃希氏菌O157:H7
        1.1 大腸埃希氏菌O157:H7特點及危害
        1.2 大腸埃希氏菌O157:H7研究現(xiàn)狀
    2 金黃色葡萄球菌特點及危害
        2.1 金黃色葡萄球菌特點及危害
        2.2 金黃色葡萄球菌研究現(xiàn)狀
    3 常見食源性致病菌檢測方法及其研究進展
        3.1 傳統(tǒng)微生物平板檢驗法
        3.2 分子生物學檢測方法
        3.3 免疫學檢測法
        3.4 生物傳感器
    4 適配體
        4.1 適配體簡介
        4.2 適配體技術應用進展
    5 基于適配體檢測技術的常用手段
        5.1 表面增強拉曼光譜技術簡述
        5.2 表面增強拉曼光譜技術應用進展
        5.3 熒光檢測技術簡述及應用
        5.4 流式分析技術簡述及應用
    6 量子點
        6.1 量子點簡介
        6.2 基于量子點檢測技術應用進展
    7 研究目的與意義
    8 創(chuàng)新點
第二章 目標菌最佳適配體篩選
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗試劑及主要溶劑
        1.3 實驗主要儀器
        1.4 實驗方法
        1.5 數(shù)據(jù)整理與分析
    2 結果與分析
        2.1 金黃色葡萄球菌適配體親和力分析結果
        2.2 大腸埃希氏菌O157:H7適配體親和力分析結果
        2.3 適配體特異性分析
    3 討論
    4 本章小結
第三章 建立同步檢測兩種目標菌的“三明治結構”
    1 材料和方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗試劑及主要溶劑
        1.3 實驗主要儀器
        1.4 實驗方法
        1.5 數(shù)據(jù)整理與分析
    2 結果與分析
        2.1 適配體功能化磁珠制備及結構表征
        2.2 量子點顯微成像及其功能化表征
        2.3 “三明治結構”表征
        2.4 對“三明治結構”捕獲條件優(yōu)化
        2.5 同步檢測兩種目標菌并確定其最低檢測限
    3 討論
    4 小結
第四章 食品樣品加標回收實驗
    1 材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗試劑及主要溶劑
        1.3 實驗主要儀器
        1.4 實驗方法
    2 結果與分析
        2.1 牛奶樣品中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標回收實驗
        2.2 生豬肉肉糜樣品中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標回收實驗
        2.3 生牛肉肉糜樣品中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標回收實驗
        2.4 袋裝袋裝黃豆醬中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標回收實驗
    3 討論
    4 小結
結論
參考文獻
作者簡介
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
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碩士論文
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[10]ISET聯(lián)合細胞免疫熒光檢測循環(huán)腫瘤細胞技術體系的建立及其臨床研究[D]. 王振丹.濟南大學 2015



本文編號:3198042

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