據(jù)我國(guó)疾病爆發(fā)監(jiān)測(cè)和數(shù)據(jù)報(bào)告表明,在2009年至2019年期間由食源性致病菌引發(fā)的食源性疾病多達(dá)3170起。處于致病率首位的便是金黃色葡萄球菌,雖致死率不高,卻幾乎能污染所有的食物,尤其是肉類制品,從而引起機(jī)體嚴(yán)重的腸毒性疾病。其次造成重大危害的菌是大腸埃希氏菌O157:H7,由大腸埃希氏菌O157:H7引發(fā)的疾病,每年可導(dǎo)致近6億人次患病,是致使我國(guó)居民腹瀉的主要糞源性疾病,嚴(yán)重危害人們的身體健康,同時(shí)這兩種菌還易在食品加工生產(chǎn)、儲(chǔ)存運(yùn)輸環(huán)節(jié)中造成污染,存在著巨大的隱患。因此開展同步檢測(cè)兩種食源性致病菌的方法學(xué)研究對(duì)未來食品安全的保障具有重大意義。本研究基于適配體結(jié)合量子點(diǎn)技術(shù),建立一種同時(shí)針對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌O157:H7兩種食源性致病菌的快速高效、靈敏的檢測(cè)方法。1. 利用熒光檢測(cè)技術(shù)對(duì)4條同一菌種的適配體與其目標(biāo)菌結(jié)合的親和力進(jìn)行分析,根據(jù)熒光光譜數(shù)據(jù)等計(jì)算解離常數(shù),對(duì)應(yīng)選取解離常數(shù)最小的一條適配體序列;對(duì)選中的兩條適配體序列進(jìn)行特異性檢驗(yàn)。結(jié)合表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)確定適配體與其目標(biāo)結(jié)合物具有較高的特異性,并且在重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果良好。成功篩選出與目標(biāo)菌結(jié)合、親和力較... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 大腸埃希氏菌O157:H7
        1.1 大腸埃希氏菌O157:H7特點(diǎn)及危害
        1.2 大腸埃希氏菌O157:H7研究現(xiàn)狀
    2 金黃色葡萄球菌特點(diǎn)及危害
        2.1 金黃色葡萄球菌特點(diǎn)及危害
        2.2 金黃色葡萄球菌研究現(xiàn)狀
    3 常見食源性致病菌檢測(cè)方法及其研究進(jìn)展
        3.1 傳統(tǒng)微生物平板檢驗(yàn)法
        3.2 分子生物學(xué)檢測(cè)方法
        3.3 免疫學(xué)檢測(cè)法
        3.4 生物傳感器
    4 適配體
        4.1 適配體簡(jiǎn)介
        4.2 適配體技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展
    5 基于適配體檢測(cè)技術(shù)的常用手段
        5.1 表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)簡(jiǎn)述
        5.2 表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展
        5.3 熒光檢測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)述及應(yīng)用
        5.4 流式分析技術(shù)簡(jiǎn)述及應(yīng)用
    6 量子點(diǎn)
        6.1 量子點(diǎn)簡(jiǎn)介
        6.2 基于量子點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用進(jìn)展
    7 研究目的與意義
    8 創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 目標(biāo)菌最佳適配體篩選
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及主要溶劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.5 數(shù)據(jù)整理與分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 金黃色葡萄球菌適配體親和力分析結(jié)果
        2.2 大腸埃希氏菌O157:H7適配體親和力分析結(jié)果
        2.3 適配體特異性分析
    3 討論
    4 本章小結(jié)
第三章 建立同步檢測(cè)兩種目標(biāo)菌的“三明治結(jié)構(gòu)”
    1 材料和方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及主要溶劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)方法
        1.5 數(shù)據(jù)整理與分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 適配體功能化磁珠制備及結(jié)構(gòu)表征
        2.2 量子點(diǎn)顯微成像及其功能化表征
        2.3 “三明治結(jié)構(gòu)”表征
        2.4 對(duì)“三明治結(jié)構(gòu)”捕獲條件優(yōu)化
        2.5 同步檢測(cè)兩種目標(biāo)菌并確定其最低檢測(cè)限
    3 討論
    4 小結(jié)
第四章 食品樣品加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及主要溶劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)主要儀器
        1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    2 結(jié)果與分析
        2.1 牛奶樣品中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
        2.2 生豬肉肉糜樣品中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
        2.3 生牛肉肉糜樣品中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
        2.4 袋裝袋裝黃豆醬中金黃色葡萄球菌及大腸埃希氏菌O157:H7加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)
    3 討論
    4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3198042