黑果腺肋花楸（Aornia mealnocarpa Elliot）,又名不老莓。其果實富含大量的多酚類、黃酮類、芳香類等功能成分,其中花色苷含量高達1%。本課題組前期實驗發(fā)現(xiàn)黑果腺肋花楸花色苷（Anthocyanin in Aornia mealnocarpa Elliot,AMA）具有很強的抗氧化、抗癌、抗衰老、降糖降脂等功能。肝纖維化（HF）被認(rèn)為是最常見的慢性疾病之一。主要效應(yīng)細(xì)胞是肝星狀細(xì)胞（HSC）。當(dāng)肝細(xì)胞出現(xiàn)纖維化時,轉(zhuǎn)化生長因子β1（TGF-β1）的表達量隨之增高,同時它也是星狀細(xì)胞增殖和膠原生成的有效誘導(dǎo)劑。此外,TGF-β1的表達還與肝細(xì)胞中的形態(tài)改變有關(guān),例如上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。因此,探索EMT的機制對于開發(fā)新的有效的肝病治療方法非常重要。此外,旨在破壞TGF-β1產(chǎn)生或用特定小分子阻斷信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的策略對產(chǎn)生有效的肝病治療方法具有重要的理論和實踐意義。鑒于目前研究報道多酚類與肝疾病具有密切的關(guān)系,所以我們推測AMA在抗肝纖維化領(lǐng)域有著重要的意義。但是,AMA在TGF-β1誘導(dǎo)的肝細(xì)胞EMT中的細(xì)胞作用機制尚未探索。基于TGF-β/Smad信號通路、氧化應(yīng)激以及... 

【文章來源】：遼寧大學(xué)遼寧省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
    0.1 肝纖維化研究概述
    0.2 黑果腺肋花楸花色苷的結(jié)構(gòu)和功能
    0.3 肝纖維化的機制研究
    0.4 本課題研究的意義
    0.5 本課題的研究內(nèi)容及目標(biāo)
第1章 AMA對 TGF-β1 誘導(dǎo)的HSC-T6 細(xì)胞肝纖維化的作用及機制研究
    1.1 實驗?zāi)康?br>    1.2 實驗方案
    1.3 實驗材料、試劑與儀器設(shè)備
        1.3.1 細(xì)胞株
        1.3.2 主要試劑及耗材
        1.3.3 主要儀器設(shè)備
        1.3.4 試劑的配制
    1.4 實驗方法
        1.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.4.2 模型建立以及實驗分組
        1.4.3 肝功能指標(biāo)檢測
        1.4.4 RT-PCR檢測HSC-T6 細(xì)胞炎癥因子的mRNA表達水平
        1.4.5 HSC-T6細(xì)胞總蛋白提取
        1.4.6 HSC-T6 細(xì)胞總蛋白濃度測定(BCA法)
        1.4.7 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blotting)
    1.5 數(shù)據(jù)分析
    1.6 實驗結(jié)果
        1.6.1 AMA對 TGF-β1 誘導(dǎo)的HSC-T6 細(xì)胞存活率的影響
        1.6.2 AMA對 TGF-β1 誘導(dǎo)的HSC-T6 細(xì)胞肝功能指標(biāo)的影響
        1.6.3 AMA對 TGF-β1 誘導(dǎo)的HSC-T6 細(xì)胞炎癥因子IL-1,IL-6,TNF-α,COX-2mRNA水平的影響
        1.6.4 AMA對 TGF-β1 誘導(dǎo)的HSC-T6 細(xì)胞中TGF-β/Smad信號通路蛋白以及α-SMA和 CollagenⅠ蛋白表達的影響
    1.7 小結(jié)
第2章 AMA對肝纖維化的干預(yù)作用
    2.1 實驗?zāi)康?br>    2.2 實驗方案
    2.3 實驗材料、試劑與儀器設(shè)備
        2.3.1 實驗動物
        2.3.2 主要試藥及材料試劑
        2.3.3 主要儀器設(shè)備
    2.4 實驗動物模型建立及試驗分組
        2.4.1 實驗分組
        2.4.2 造模與給藥
        2.4.3 取材
        2.4.4 測定指標(biāo)
    2.5 實驗方法與步驟
        2.5.1 小鼠體重變化以及臟器指數(shù)
        2.5.2 小鼠病理切片制作與觀察
        2.5.3 小鼠血清中肝功能指標(biāo)檢測
        2.5.4 小鼠肝組織中肝功能指標(biāo)檢測
        2.5.5 小鼠肝組織中氧化應(yīng)激參數(shù)檢測
    2.6 數(shù)據(jù)分析
    2.7 實驗結(jié)果
        2.7.1 AMA對肝纖維化小鼠體重及肝系數(shù)的影響
        2.7.2 AMA對肝纖維化小鼠肝組織形態(tài)的影響
        2.7.3 AMA對肝纖維化小鼠血清肝功能指數(shù)的影響
        2.7.4 AMA對肝纖維化小鼠肝組織中肝功能指數(shù)的影響
        2.7.5 AMA對肝纖維化小鼠肝組織氧化應(yīng)激參數(shù)的影響
    2.8 小結(jié)
第3章 AMA抗肝纖維化機制研究
    3.1 實驗?zāi)康?br>    3.2 實驗方案
    3.3 實驗材料、試劑與儀器設(shè)備
        3.3.1 實驗動物
        3.3.2 試驗試劑及材料
        3.3.3 主要儀器設(shè)備
    3.4 實驗方法
        3.4.1 RT-PCR檢測小鼠肝組織炎癥因子的mRNA表達
        3.4.2 肝組織總蛋白提取
        3.4.3 肝組織總蛋白濃度測定(BCA法)
        3.4.4 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blotting)
    3.5 數(shù)據(jù)分析
    3.6 實驗結(jié)果
        3.6.1 .AMA對 CCl_4誘導(dǎo)的小鼠肝組織炎癥因子IL-1,IL-6,TNF-α,COX-2 m RNA水平的影響
        3.6.2 AMA對 CCl_4誘導(dǎo)小鼠肝組織中TGF-β/Smad信號通路相關(guān)蛋白表達的影響
        3.6.3 AMA對 CCl_4誘導(dǎo)小鼠肝組織中α-SMA和 CollagenⅠ蛋白表達的影響
    3.7 小結(jié)
第4章 結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文及參加科研情況



本文編號：3198028