副溶血性弧菌既是水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物細(xì)菌性疾病的主要致病菌,又是引起細(xì)菌性食物中毒的首要食源性致病菌。因此,有效的防控副溶血性弧菌是亟須解決的問題。水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中副溶血性弧菌病的防治主要是利用抗生素,但抗生素的濫用不僅產(chǎn)生耐藥菌株,破壞水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)平衡,而且抗生素類的藥物在水產(chǎn)品中的殘留也給人類健康帶來威脅。因而尋求抗生素的理想替代品迫在眉睫。利用益生菌所產(chǎn)抗菌肽來控制副溶血性弧菌病害的發(fā)生,投放益生菌所產(chǎn)抗菌肽既可以維持水產(chǎn)動(dòng)物腸道菌群平衡,提高水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物免疫力,又可改善養(yǎng)殖水體環(huán)境。因此,抗菌肽將對(duì)對(duì)促進(jìn)水產(chǎn)品的食用安全和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展具有重要意義,是抗生素的理想替代品。目前,無論是實(shí)驗(yàn)室階段還是產(chǎn)業(yè)階段,關(guān)于抗菌肽在防治副溶血性弧菌病方面的報(bào)道還比較少,抑菌活性還不夠強(qiáng),并且利用第三代高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行益生菌菌株的生物信息學(xué)分析的尚不多見。鑒此,本研究將從水生環(huán)境中探尋對(duì)副溶血性弧菌有抑制作用的益生菌,并再應(yīng)用于水生環(huán)境,以減少因益生菌生長環(huán)境改變而造成的抑菌活性的減退或消失問題。從東海海水中篩選出一株抑菌活性強(qiáng)、廣譜抑菌活性的枯草芽孢桿菌,并對(duì)其進(jìn)行鑒定及確定其分類地位;探究了其... 

【文章來源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

菌株H19在營養(yǎng)瓊脂平板上的菌落形態(tài)和營養(yǎng)肉湯液體培養(yǎng)基

L2000；1：菌株 H19R 擴(kuò)增產(chǎn)物的瓊脂糖electrophoresis of PC基因序列構(gòu)建的枯草Bacillus subtilis H19 csequenceH19 (MG383451)is subsp. KCTC 13429( Aus haynesii NRRL B-4132us licheniformis ATCC 14Bacillus pumBacillus austBacillus aqu100

透析袋處理的蛋白粗提液中使各酶的終質(zhì)量濃度為 2 mg/mL，調(diào)節(jié) pH 值至各酶最適作用 pH 值，以不加酶的 3.5 kDa 透析袋處理所得蛋白粗提液作為空白對(duì)照37 ℃溫浴保存 2 h，再調(diào)節(jié)各酶解液 pH 值至 7.0。以副溶血性弧菌(Vibriparahaemolyticus，ATCC17802)為指示菌，采用打孔擴(kuò)散法測(cè)定各酶解液抑菌活性試驗(yàn)重復(fù) 3 次。3.4 結(jié)果與分析3.4.1 菌株 H19 產(chǎn)抑菌物質(zhì)的產(chǎn)量與枯草芽孢桿菌生長的關(guān)系由圖 3-1 可知，抑菌活性在 24 h 之前保持增加趨勢(shì)，在 24 60 h 保持平衡為640AU/mL，之后一直下降。每一百毫升菌體干在 0-24 h 干重量急劇增加，在 24-6h 緩慢增長至平衡，干重量為 0.29 g/100 mL，在整個(gè)發(fā)酵過程中，pH 基本呈上升趨勢(shì)，說明發(fā)揮抑菌作用的不是酸而是其他非酸類物質(zhì)。因此在 0-24 h 為 H19 生長對(duì)數(shù)期，在 24-60 h 為生長穩(wěn)定期，在 60 h 之后為衰退期。Antimicrobial activityOD600

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3059972